一、益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润及活化的影响（论文文献综述）
向双娣,喻强强,余建玮,余涛,叶超,薛汉荣[1]（2021）在《基于细胞自噬mTOR信号通路探讨益气温阳护卫法防治哮喘的作用机制》文中研究指明现阶段多项研究表明细胞自噬在哮喘发生、发展中有着重要的影响作用,成为国内外研究热点。笔者研究发现中医卫气与细胞自噬在功能、作用机制、特性等方向具有相似之处,认为二者具有一定的相关性,希望能通过调控细胞自噬以期达到防治哮喘的作用,并以此立论对中医卫气与自噬的联系,及运用益气温阳护卫法调控细胞自噬mTOR信号通路的理论依据进行初步探讨。
余涛[2]（2021）在《益气温阳护卫法对哮喘大鼠Th17细胞/Treg细胞免疫失衡的影响及作用机理研究》文中指出研究目的:本研究以哮喘Th17/Treg细胞免疫失衡为切入点,通过体内与体外实验研究,探讨益气温阳护卫法对哮喘大鼠Th17/Treg失衡的调节作用及具体调控机制,为该法防治哮喘提供可靠实验依据,丰富益气温阳护卫法的科学内涵。研究方法:第一章理论探讨搜集并梳理先秦至明清时期有关哮喘病名、病因病机及治疗方面的相关文献,初步总结现代医家对哮喘的认识与辨治经验。阐述国医大师洪广祥运用益气温阳护卫法防治哮喘的理论依据;以哮喘免疫失衡为切入点,将中医“气阳虚弱,卫气不足”理论与现代医学免疫失衡机制深入联系。第二章实验研究第一节体内实验研究建立哮喘大鼠模型,分为对照组（Control）、模型组（Model）、益气温阳护卫汤低剂量组（1g/m L）、益气温阳护卫汤中剂量组（2g/m L）、益气温阳护卫汤高剂量组（4g/m L）和地塞米松组（Dex）,每组分别于激发1周、2周、4周末三个时间点处理大鼠8只。各时期观察及检测指标:1.雾化激发时观察大鼠一般状态及行为学改变。2.肺组织病理切片HE染色。3.支气管肺泡灌洗液中炎症细胞计数及分类。4.流式细胞术分别检测肺泡灌洗液Th17、Treg细胞比例。5.RT-PCR检测肺组织中Th17细胞分化因子TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21m RNA表达量,以及Treg细胞分化因子Foxp3、IL-10 m RNA表达量。6.Western-blot检测肺组织中Th17细胞分化因子TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21蛋白水平,以及Treg细胞分化因子Foxp3、IL-10蛋白水平。第二节体外实验研究通过诱导因子构建体外Th17/Treg细胞失衡模型,给予益气温阳护卫汤含药血清干预,观察益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17/Treg细胞失衡的调节作用及具体调节机制。1.制备益气温阳护卫汤含药血清。2.CD4+T细胞原代分离、培养、鉴定。3.益气温阳护卫汤含药血清的细胞毒作用。4.构建体外Th17/Treg细胞失衡模型:分为对照组（Control）、模型组（Model）、益气温阳护卫组（YQWYHW）、地塞米松组（Dex）,除对照组外,其余组中分别加入等量的TGF-β、IL-6、IL-23溶液,诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化。5.益气温阳护卫含药血清对体外Th17/Treg细胞失衡的影响及机制:给予相应的含药血清干预,处理48h后,采用流式细胞技术检测各组Th17和Treg细胞比例。RT-PCR、Western blot分别检测Th17细胞分化因子TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21及Treg细胞分化因子Foxp3、IL-10 m RNA和蛋白表达水平。研究结果:第一章理论探讨本文总结了中医对哮喘病名、病因病机及治疗的认识演变过程,归纳了部分现代医家对哮喘的认识与辨治经验。在此基础之上,阐述了国医大师洪广祥“气阳虚弱,卫气不足”的哮喘发病观特点及运用益气温阳护卫法防治哮喘的理论依据,将免疫失衡机制与中医“气阳虚弱,卫气不足”理论深入联系,为后续的实验研究奠定了坚实的理论依据。第二章实验研究第一节体内实验研究结果1.益气温阳护卫汤对哮喘大鼠行为学的影响:模型组、各药物治疗组大鼠在激发1周后均出现哮喘样症状及毛发粗糙失泽,食欲下降,食量减少,喜蜷卧,精神欠佳等“气阳虚弱、卫气不足”的现象,对照组未见明显的异常表现,经益气温阳护卫汤、地塞米松分别干预后,大鼠的一般状态及行为学改变较模型组均有不同程度的改善。2.益气温阳护卫汤对哮喘大鼠肺组织病理的影响:与同期对照组比较,模型组肺组织支气管管壁明显增厚,管腔明显狭窄变形,平滑肌增生,肺泡组织、管腔黏膜水肿,黏性分泌物明显增多,支气管上皮细胞排列紊乱,可见大量炎性细胞浸润。与同期模型组比较,益气温阳护卫低、中、高剂量组及地塞米松组肺组织炎症浸润情况得到不同程度改善,主要表现为支气管管腔狭窄程度及平滑肌增厚程度减轻,炎症细胞浸润程度及黏性分泌物减少。3.益气温阳护卫汤对哮喘大鼠BALF中炎症细胞的影响:与同期对照组比较,模型组嗜酸性粒细胞及淋巴细胞比例均显着升高（P<0.01）;与同期模型组比较,益气温阳护卫汤中、高剂量组及地塞米松组嗜酸性粒细胞、淋巴细胞比例均显着减少（P<0.05,P<0.01）。4.益气温阳护卫汤对哮喘大鼠Th17细胞、Treg细胞比例的影响:与同期对照组比较,模型组大鼠BALF中Th17细胞比例均显着升高（P<0.05）、Treg细胞比例均显着下降（P<0.05）;与同期模型组比较,益气温阳护卫汤中、高剂量组及地塞米松组BALF中Th17细胞比例均显着下降（P<0.05）、Treg细胞比例均显着上升（P<0.05）。5.益气温阳护卫汤对哮喘大鼠肺组织Th17细胞、Treg细胞分化因子基因的影响:（1）对Th17细胞分化因子基因的影响:与同期对照组比较,模型组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21 m RNA相对表达量均显着上升（P<0.05,P<0.01）;与同期模型组比较,益气温阳护卫汤中、高剂量组及地塞米松TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21 m RNA相对表达量均显着降低（P<0.05,P<0.01）。（2）对Treg细胞分化因子基因的影响:与同期对照组比较,模型组Foxp3、IL-10 m RNA相对表达量均显着降低（P<0.05,P<0.01）;与同期模型组比较,益气温阳护卫汤中、高剂量组及地塞米松组Foxp3、IL-10 m RNA相对表达量均显着上升（P<0.05,P<0.01）。6.益气温阳护卫汤对哮喘大鼠肺组织Th17细胞、Treg细胞分化因子蛋白的影响:（1）对Th17细胞分化因子蛋白的影响:与同期对照组比较,模型组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21蛋白相对表达水平均显着上升（P<0.05）;与同期模型组比较,益气温阳护卫汤中、高剂量组及地塞米松组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21蛋白相对表达水平均显着下降（P<0.05）。（2）对Treg细胞分化因子蛋白的影响:与同期对照组比较,模型组Foxp3、IL-10蛋白表达水平显着降低（P<0.05）,与同期模型组比较,益气温阳护卫汤中、高剂量组及地塞米松组中Foxp3、IL-10蛋白表达水平均显着上升（P<0.05）。第二节体外实验研究结果1.体外Th17/Treg细胞失衡模型的构建结果:与对照组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显着上升（P<0.01）,Treg细胞比例显着下降（P<0.01）,表明成功构建体外Th17/Treg细胞失衡模型。2.益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17细胞、Treg细胞比例的影响:与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显着降低（P<0.05或P<0.01）,Treg细胞比例显着上升（P<0.05或P<0.01）。3.益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17细胞、Treg细胞分化因子m RNA的影响:（1）对体外Th17细胞分化因子m RNA的影响:与对照组比较,模型组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21 m RNA相对表达量均显着升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21 m RNA相对表达量均显着降低（P<0.05）。（2）对体外Treg细胞分化因子m RNA的影响:与对照组比较,模型组Foxp3、IL-10 m RNA相对表达量均显着降低（P<0.01）;与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Foxp3、IL-10 m RNA相对表达量均显着升高（P<0.05,P<0.01）。4.益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17细胞、Treg细胞分化因子蛋白的影响:（1）对体外Th17细胞分化因子蛋白的影响:与对照组比较,模型组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21蛋白相对表达水平均显着升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组TGF-β、IL-6、STAT3、RORγ、IL-17、IL-21蛋白相对表达水平均显着降低（P<0.05,P<0.01）。（2）对体外Treg细胞分化因子蛋白的影响:与对照组比较,模型组Foxp3、IL-10蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Foxp3、IL-10蛋白相对表达水平显着升高（P<0.05,P<0.01）。结论1.益气温阳护卫法能有效改善哮喘大鼠Thl7/Treg失衡及体外Thl7/Treg失衡。2.益气温阳护卫法治疗哮喘的机制可能与抑制IL-6-STAT3信号通路,下调促炎因子IL-17、IL-21以抑制Th17细胞分化及功能相关。3.益气温阳护卫法治疗哮喘的机制可能与上调Foxp3、IL-10表达以促进Treg细胞分化及功能相关。
鲍梦婕,洪滔,薛汉荣,余建玮,洪广祥,叶超,李轩,喻强强[3]（2019）在《基于Th1/Th2失衡初探益气温阳护卫法对哮喘炎症白三烯通道干预作用》文中研究指明支气管哮喘（简称哮喘）是慢性气道炎症为特点的一种异质性疾病,有多种细胞及细胞组分共同参与,涉及多机制多通路。白三烯通道是哮喘气道炎症重要的通道。以T细胞为细胞免疫应答的Th2占优势的Th1/Th2失衡是哮喘发病机制,Th1/Th2失衡与白三烯通道共同参与哮喘气道炎症形成,相互影响。气阳虚弱为哮喘气道炎症产生根本所在。文章就Th1/Th2失衡与白三烯通道在哮喘气道炎症方面的关系及益气温阳护卫法是否通过调节Th1/Th2失衡影响炎症白三烯通道展开初步探讨。
段亚辉[4]（2019）在《款冬花总倍半萜对OVA致敏大鼠哮喘模型的干预作用及其机制研究》文中研究指明选题依据:中药款冬花为菊科植物款冬（Tussilago farfara L.）的干燥花蕾,主要用来治疗喘咳痰多、久咳不愈、急慢性气管炎等症。款冬花主要含黄酮、苯丙素、倍半萜、三萜以及生物碱等物质,具有抗炎,抗氧化,抗过敏等作用。本课题组研究发现,款冬花水提物具有止咳化痰的功效,款冬花石油醚提取物具有干预过敏性哮喘的活性。已有研究表明,款冬花总倍半萜具有抗炎作用。本研究在前期研究基础上将进一步分析款冬花石油醚部位中特征性成分倍半萜对卵清蛋白（OVA）致敏的过敏性哮喘大鼠的干预作用;并采用代谢组学技术分析其干预机制。目的:分析款冬花总倍半萜对OVA致敏的过敏性哮喘大鼠的干预作用及其作用机制。方法:（1）款冬花总倍半萜的制备:利用中压制备对款冬花石油醚部位中的总倍半萜类物质进行分离与富集,并考察不同型号FLASH柱对款冬花总倍半萜制备的影响;采用NMR技术对款冬花总倍半萜类成分进行定性分析;采用HPLC测定款冬花总倍半萜的含量。（2）款冬花总倍半萜对OVA致敏的过敏性哮喘大鼠的干预作用:本文以款冬花总倍半萜为实验材料,利用OVA致敏的过敏性哮喘大鼠模型,通过血清生化指标、肺及支气管病理切片、支气管肺泡灌洗液（BALF）炎症细胞计数技术来分析款冬花总倍半萜对OVA致敏的过敏性哮喘大鼠的干预作用。（3）款冬花总倍半萜对OVA致敏的过敏性哮喘大鼠的干预机制:采用液质代谢组学技术找到相关代谢物及其代谢通路。采用Western blot技术对上述实验动物肺组织p65 NF-kB蛋白表达量进行分析,寻找款冬花总倍半萜对OVA致敏哮喘大鼠的干预通路。结果:（1）款冬花总倍半萜的制备。选用Angle C 18 FLASH柱（20 g,20-35μm）,以85%的甲醇为流动相,中压制备色谱在线洗脱,等度洗脱35 min。收集5-35 min的流分,减压浓缩即得款冬花总倍半萜。利用NMR定性分析总倍半萜部位,脂肪酸杂质较少,和石油醚部位相比经过中压制备后款冬花总倍半萜得到了富集。其中款冬酮纯度较石油醚部位提高约10倍。（2）款冬花总倍半萜对OVA致敏的过敏性哮喘大鼠的干预作用。款冬花总倍半萜可以减轻肺部炎症细胞浸润,改善支气管的增生与变形,有效地回调血清中s OVA-Ig E、IL-4、IL-13等炎症因子的水平,缓解哮喘症状。（3）款冬花总倍半萜对OVA致敏的过敏性哮喘大鼠的干预机制。款冬花总倍半萜可以影响精氨酸、精胺、苯丙氨酸、前列腺素E1、前列腺素E2、EPA等内源性代谢物水平,干预精氨酸和脯氨酸代谢通路等5条显着变化通路,对大鼠哮喘起到调节作用,同时也可以下调p65 NF-kB蛋白表达量,阻断促炎因子向胞内信号的传导,抑制炎症因子释放,减轻炎症。结论:本文通过中压制备建立了款冬花总倍半萜制备方法,但其制备工艺还需进一步的摸索。通过OVA致敏的哮喘大鼠动物模型验证了款冬花总倍半萜具有干预过敏性哮喘的作用。采用液质代谢组学技术找到相关代谢物及其代谢通路,款冬花总倍半萜可以干预机体代谢平衡,同时抑制p65 NF-kB蛋白过度表达,阻断促炎因子向胞内信号的传导,抑制炎症因子释放,减轻炎症。
方宇林[5]（2014）在《温肺哮喘方对哮喘大鼠模型bcl-2和bax表达的影响》文中研究表明研究目的在临床应用温肺哮喘方治疗支气管哮喘取得良好疗效的基础上，进一步观察温肺哮喘方对支气管哮喘大鼠调控基因Bcl-2和Bax表达的影响，探讨温肺哮喘方治疗支气管哮喘的可能机制。研究方法60只SD大鼠随机分为6组,即正常组（A组）、支气管哮喘模型组（B组）、温肺哮喘方低剂量组（C组）、温肺哮喘方高剂量组（D组）、氨茶碱组（E组）、桂龙咳喘宁组（F组）,参考《动物实验造模》[1]加以改进建立动物模型：实验第1天和第8天给除正常组外大鼠腹腔内、腰部两侧注射卵蛋白（10%卵蛋白与氢氧化铝混合液2ml，腹腔1ml，腰部左右各0.5ml）致大鼠致敏。A组以等量生理盐水代替。造模第14天起用1%卵蛋白与氢氧化铝混合液100ml喷雾激发大鼠哮喘发作,雾化流量为5ml/min,20-30分钟/次，1次/日，连续2周。A组以等量生理盐水代替。第1次激发（第1次雾化），大鼠出现呼吸加快、口唇发绀、腹肌痉挛、点头呼吸及站立不稳等表现为激发成功。C组、D组、E组、F组均从第1次哮喘激发开始（造模第14天）连续14天每天灌胃给药, A组及B组均予等量生理盐水，C组予温肺哮喘方（麻黄、桂枝、细辛、干姜、白芍、五味子、法半夏、紫菀、款冬花、苦杏仁、当归、川芎、仙鹤草、巴戟天、肉苁蓉、仙灵脾等组成）浓缩成12.15g/kg，D组予温肺哮喘方浓缩成48.6g/kg，E组予氨茶碱混悬液0.027g/kg，F组予桂龙咳喘宁混悬液0.405g/kg。最后同时处死大鼠，应用TUNEL法检测肺组织嗜酸粒细胞（EOS）凋亡,免疫组织化学检测肺组织调控基因Bcl-2和Bax的表达。结果采用统计软件进行分析处理。研究结果1、肺组织EOS凋亡的影响：温肺哮喘方低剂量组和高剂量组大鼠肺组织嗜酸粒细胞绝对值计数显着低于哮喘模型组（P<0.01）,低剂量组肺组织嗜酸粒细胞绝对值计数低于氨茶碱组（P<0.01），低高剂量组肺组织嗜酸粒细胞绝对值计数低于桂龙咳喘宁组（P<0.01），温肺哮喘方低剂量组显着低于温肺哮喘方高剂量组（P<0.01）；2、肺组织调控基因Bcl-2的表达：温肺哮喘方低剂量组和高剂量组大鼠肺组织Bcl-2阳性细胞的比例显着低于哮喘模型组（P<0.01）,低剂量组低于桂龙咳喘宁对照组（P<0.05），Bcl-2的细胞比例温肺哮喘方低剂量组、温肺哮喘方高剂量组、氨茶碱片组之间无显着差异（P>0.05）；3、肺组织调控基因Bax的表达：温肺哮喘方低剂量组和高剂量组大鼠肺组织Bax阳性细胞的比例显着高于哮喘模型组（P<0.01）,高剂量组、低高剂量组、桂龙咳喘宁组、氨茶碱组之间无显着性差异（P>0.05）。结论温肺哮喘方可显着减少支气管哮喘模型大鼠肺内EOS的募集和促进EOS凋亡,可能与其能抑制凋亡基因Bcl-2和促进凋亡基因Bax的表达相关。
闫云霞[6]（2012）在《柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5、IL-13及肺组织TGF-β1影响的实验研究》文中提出目的：通过探讨柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5、IL-13及肺组织中TGF-β1的影响,从气道炎症及气道重塑方面为柴胡渗湿汤治疗哮喘提供可靠地实验依据。方法：将84只雄性Wi star大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、定喘汤组、柴胡渗湿汤低剂量组、柴胡渗湿汤中剂量组、柴胡渗湿汤高剂量组,每组12只,采用卵蛋白制作大鼠哮喘模型,予相应药物干预。用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中IL-5及IL-13水平以及应用免疫组化的方法测定肺组织中TGF-β1的含量。实验数据采用SPSS16.0统计软件进行分析。结果：实验后各组死亡率比较均无差异（p>0.05）；模型对照组与正常对照组血清中IL-5及IL-13含量水平有显着差异,表明大鼠哮喘模型血清中IL-5及IL-13含量异常增高的病理状态；与模型对照组相比较,各治疗组血清中IL-5及IL-13的含量明显降低,其中尤以地塞米松组、柴胡渗湿汤中剂量组和柴胡渗湿汤高剂量组的作用更明显。模型对照组与正常对照组组间比较,模型对照组肺组织内TGF-β1吸光值显着高于正常对照组,表明大鼠哮喘模型肺组织内存在TGF-β1过度表达的病理状态；与模型组相比,各治疗组中肺组织内TGF-β均明显降低,其中尤以地塞米松组与柴胡渗湿汤高剂量组的作用更明显。结论：柴胡渗湿汤能下调哮喘大鼠体内IL-5及IL-13浓度,能有效抑制TGF-β1的表达,减轻气道炎症及气道重塑；上述作用具有一定的量效关系,即随着给药剂量的增加有加强趋势。
徐丽[7]（2012）在《天贝汤对支气管哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响的实验研究》文中认为目的：支气管哮喘（bronchial asthma，简称哮喘）是以气道炎症、气道重塑、可逆性气道阻塞、气道高反应性为主要特征的由多种因素引起的一种气道慢性炎症性疾病，是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的一种呼吸系统疾病。近二十年来，随着工业化和全球污染的加剧，在世界范围内哮喘的发病率和死亡率呈逐年上升的趋势，全球患者约3亿左右，严重威胁着人们的身体健康和生存质量。加之哮喘病程绵长难愈，给社会带来了严重的经济负担。所以，哮喘已成为严重的公共卫生问题而引起了世界各国的极大关注。到目前为止，全身或局部应用糖皮质激素仍然是治疗哮喘的首选，但长期应用副作用明显。中医中药防治哮喘应该受到重视，特别是在减少副作用，预防复发等方面与西药比较有一定的优势。本文还概述了历代中医学家对哮喘的病名、病因病机、辨证施治的认识，对中药及中医药治疗哮喘的现代临床与机理研究作了全面总结。阐述了哮喘的现代流行病学、病因病机等。天贝汤是导师郭振武教授的临床经验方，具有宣肺降气、化痰平喘之功。本课题在建立大鼠支气管哮喘模型的基础上，予天贝汤进行干预，通过对本动物实验的观察，选择与哮喘发病机制相关的多项指标，探讨天贝汤对支气管哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的作用和机制，为中医中药临床治疗支气管哮喘提供理论依据。材料与方法：72只健康雄性SPF级Wistar大鼠，体重240±20g，实验动物许可证号SCXK（京）2009-0004，随机分为正常对照组、哮喘模型组、天贝汤高剂量组（以下简称为高剂量组）、天贝汤中剂量组（以下简称为中剂量组）、天贝汤低剂量组（以下简称为低剂量组）、小青龙对照组（以下简称为小青龙组），每组12只。天贝汤组成：麻黄、茯苓、清半夏、川贝、天麻等组成，小青龙胶囊组成：麻黄、白芍、细辛、干姜、炙甘草、桂枝、半夏、五味子。将上方加水煎煮三次合并后过滤。低温（4℃）放置备用。天贝汤高、中、低剂量组，给药剂量分别是：高剂量组9ml/kg,中剂量组4.5ml/kg，低剂量组2.25ml/kg，小青龙组给药剂量0.972g/kg。从第15天开始给药，直至处死，每日1次灌胃，连续6周。各组参照吕国平等介绍的方法，分为致敏和激发两步。除正常对照组外，实验第1d和第8d共2次每只大鼠腹腔注射新鲜配制的含10%卵蛋白的生理盐水1ml（内含卵蛋白100mg，氢氧化铝100mg和灭活百日咳杆菌6×109个）致敏，致敏15d后各组灌胃后1小时后将大鼠放入不完全封闭的雾化吸入箱内开始激发，用超声雾化器喷入含1%卵蛋白激发，每次雾化20分钟，每日1次，激发6周，激发后以大鼠烦躁、打喷嚏、咳嗽、抓鼻、大小便失禁、呼吸幅度加深及喘促发作、紫绀等哮喘发作症状，认为哮喘造模成功。正常对照组以生理盐水代替卵蛋白进行腹腔注射及雾化吸入，雾化流量及时间同前。第一部分天贝汤对支气管哮喘大鼠支气管病理组织学观察末次喷雾激发后18-24h内予乙醚麻醉动物，以固定板固定后打开并暴露胸腔，开胸结扎，剥离肺组织，取出肺组织，于4℃4%多聚甲醛固定，脱水、包埋、切片，HE染色观察。第二部分各组大鼠体重和被激发时的表现的变化第三部分天贝汤对支气管哮喘大鼠肺组织核因子-κB（NF-κB）的影响核因子-κB（NF-κB）是一种具有多种功能的核转录因子，具有广泛的生物学活性，不仅参与哮喘的气道炎症反应，还参与哮喘气道重塑的过程。动物分组、模型建立、用药情况及数据统计处理同前。动物麻醉完全后，取肺组织于4%多聚甲醛固定，脱水、包埋、切片，行免疫组织化学ABC法染色。一抗选用兔抗p52（N F-кB的一个亚单位）多克隆抗体（武汉博士德生物工程公司）稀释度1∶100;用SABC法试剂盒进行操作,操作步骤按试剂盒说明书进行。主要操作步骤如下：石蜡切片常规脱蜡脱水，3%H2O2溶液灭活内源性过氧化物酶，热修复1h。滴加山羊封闭血清，湿盒孵育，加入一抗（1:100稀释）湿盒孵育1h，4℃冰箱内过夜，PBS漂洗，加入生物素化二抗37℃孵育，PBS漂洗5min，3次。⑧滴加ABC复合物37℃孵育30min，PBS漂洗5min，3次。⑦二氨基联苯胺（DAB）光镜下显色5-15min，终止呈色反应。苏木精衬染，常规裱片、封片和观察。计算机图象处理软件半定量测定NF－κB表达。第四部分天贝汤对支气管哮喘大鼠血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的影响。气道重塑是慢性哮喘反复发作的重要病理生理基础，它与哮喘肺功能损害及气道高反应性密切相关。细胞外基质（ECM）的沉积和降解的失衡是导致气道壁结构异常、间质增生和肺实质破坏的重要原因，ECM主要由基质金属蛋白酶（MMPs）来降解,其中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是锌依赖性蛋白酶，MMP-9催化集团区含有3个重复的类Ⅱ型纤维连接蛋白结合区，决定了它对明胶和弹力纤维的底物特异性，主要降解Ⅳ型以及Ⅴ型胶原。近来研究表明MMP-9在支气管哮喘患者的气道炎症和气道重塑中发挥重要作用。动物分组、模型建立、给药情况及数据统计处理同第一部分。动脉血血清中MMP-9、TIMP-1含量检测：采用双抗体夹心法ABC-ELISA法测定MMP-9、TIMP-1含量，具体方法如下。①建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔中加入样品稀释液100μl，第一孔加入标准品100μl，混匀后用加样器吸出100μl，移至第二孔，如此反复行对倍稀释至第七孔，最后，从第七孔中吸出100μl弃去，使之体积为100μl，第八孔为空白对照。②加样：待测样品孔中每孔加入待测样品100μl。③将反应板充分混匀后放置37℃120分钟。④洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。⑤每孔中加入第一抗体工作液50μl，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。⑥用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。⑦每孔加酶标抗体工作液100μl，将反应板置37℃60分钟。⑧用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次。每孔加入底物工作液100μl，置37℃暗处反应5-10分钟。每孔加入1滴终止液混匀，在492nm处测吸光值。以标准品2000、500、250、125、62、31、0ng/ml之OD值在半对数纸上作图，画出标准曲线，根据样品OD值在该标准曲线上查出MMP-9的含量，TIMP-1方法同MMP-9。第五部分天贝汤对支气管哮喘大鼠肺组织表面相关凋亡基因蛋白Fas和Bcl-2表达的影响动物分组、模型建立、用药情况及数据统计处理同前。动物完全麻醉后，取肺组织，加入Trizol充分匀浆，提取总RNA，采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中相关凋亡基因蛋白Fas和Bcl-2表达的变化。统计学方法：数据采用均数±标准差（—x±s）表示，用SPSS统计软件处理，统计方法采用单因素方差分析及LSD检验。显着差异水平以0.05和0.01为标准。结果：1.天贝汤对哮喘大鼠支气管-肺组织病理学的影响肺组织肉眼形态观察:正常对照组:肺组织颜色淡红，肺组织柔软而富有弹性，表面光滑。哮喘模型组:肺组织过度膨胀，部分肺组织颜色变深，呈暗红色，质地稍硬，表面有呈颗粒状的瘀点。天贝汤各剂量组和小青龙组肺组织颜色稍暗，膨胀不明显，无瘀斑瘀点。光镜观察：正常对照组：大鼠支气管内及其周围无明显的炎性细胞浸润，支气管壁完整光滑，细胞排列规整，平滑肌层厚度正常，支气管粘膜规整，管腔内无脱落上皮细胞。模型组：支气管管壁及伴行的动脉周围有大量嗜酸性粒细胞、单核细胞及淋巴细胞为主的炎性细胞浸润，管腔内容物增多，微血管渗漏，可见管腔内炎性分泌物增多，有的小支气管甚至被粘液栓及炎性细胞所堵塞。杯状细胞增生，气道上皮指状增生，平滑肌层增厚，排列紊乱，支气管粘膜水肿增厚，上皮脱落，上皮下纤维化，支气管粘膜皱壁增多、延长。高剂量组：嗜酸性粒细胞及淋巴细胞等炎性细胞浸润明显减少，几乎消失，水肿明显消失，管壁和平滑肌层厚度接近正常对照组,逐渐恢复，支气管粘膜规整，支气管管腔内偶见脱落上皮细胞及粘液。中剂量组：嗜酸性粒细胞及淋巴细胞等炎性细胞浸润有所减少，管壁和平滑肌层厚度有所减少，气管管壁结构层次清楚，支气管管腔内偶见脱落上皮细胞及黏液，管腔渗出物逐渐吸收。低剂量组：支气管周围嗜酸性粒细胞及其他炎性细胞浸润略微减少，管壁和平滑肌层厚度略减少，管腔内偶见脱落上皮细胞及黏液。小青龙组：黏膜下层见轻度充血水肿及少量炎症细胞，管腔内见炎性渗出物，粘膜增生，支气管腔内少量脱落细胞和粘液。2.各组大鼠体重和被激发时的表现的变化体重：激发后各组大鼠体重均增。空白组大鼠体重与其余各组有差异，高于其余各组（p<0.01）；高、中、低剂量组，小青龙组及模型组之间无统计学意义（p>0.05）。被激发时的表现：空白组大鼠表现活泼好动，动作灵敏，毛色光滑，呼吸平稳。模型组大鼠在吸入OVA后不久即出现过敏症状如：躁动不安，搔抓、舔肢体、打喷嚏等，继而大鼠反应迟钝，出现呼吸急促，呼吸困难（明显的腹式呼吸），伴轻度紫绀，部分大鼠可闻及响亮的呼气相喘鸣音和不规则呼吸。与哮喘模型组比较，高、中剂量组症状减轻，无呼吸急促，无紫绀，无呼气相喘鸣音；低剂量组和小青龙组呼吸稍急促，无紫绀，喘鸣音减轻。在高中低剂量组比较中，高剂量组较低剂量组比较有明显好转，没有呼吸急促和呼吸困难症状，大鼠毛色光泽较好，精神也较好。3.对哮喘大鼠支气管NF－κB表达的影响与正常对照组比较，模型组NF－κB表达明显增加，差异具有显着性意义（P<0.01）。与模型组比较，NF－κB在各治疗组阳性表达减少，高剂量组降低最明显（P<0.01），其次为中剂量组、小青龙组、小剂量组；与小青龙组对比，高剂量组NF－κB含量低，二者差异具有显着意义﹙p<0.01﹚。4.对支气管哮喘大鼠动脉血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的影响。与正常对照组相比，模型组大鼠MMP-9、TIMP-1含量明显升高，差异具有显着性意义﹙p<0.01﹚，证明哮喘模型建立成功；与模型组比较，各治疗组MMP-9含量均降低，高剂量组降低最明显﹙p<0.01﹚，其次为中剂量组、小青龙组，低剂量组次之。与小青龙组相比，高剂量组含量低，二者差异具有显着意义﹙p<0.01﹚。5.对支气管哮喘大鼠相关基因蛋白Fas mRNA、Bcl-2mRNA表达的影响。与正常对照组比较，模型组Bcl-2mRNA表达明显增多（P﹤0.01），Fas mRNA表达明显减少﹙p<0.05﹚；与模型组比较，各治疗组Bcl-2mRNA表达减少，高剂量组减少最明显﹙p<0.01﹚，其次为中剂量组、小青龙组、小剂量组，与小青龙组比较高、中、低剂量组无统计学意义；与低剂量组比较，高剂量组Bcl-2mRNA表达强度低，二者差异具有显着意义﹙p<0.05﹚。与模型组比较，Fas mRNA在各治疗组表达有所增多,高剂量组增多最明显﹙p<0.05﹚，其次为中剂量组、小青龙组、小剂量组，但均无统计学意义；与小青龙组比较高、中、低剂量组均无统计学意义。与低剂量组比较，高、中剂量组、小青龙组均无统计学意义。结论：1.哮喘发病与痰、风等致病因素有关。风盛痰阻、气道挛急是哮喘发作的主要病机，治疗以宣肺降气、化痰平喘及调理脏腑并举。2.天贝汤具有宣肺降气、化痰平喘及调理脏腑的作用，对哮喘有确切的治疗作用。3天贝汤治疗哮喘的作用机制3.1对气道重塑的影响。对支气管-肺组织病理学观察结果显示，模型组支气管粘膜上皮部分脱落，黏膜下层充血水肿，嗜酸性粒细胞等炎细胞浸润，黏膜下平滑肌显着增生肥厚。与正常对照组相比，模型组出现气道重塑。经天贝汤治疗后，气管管壁结构逐渐恢复，炎症明显减轻，水肿明显消失，增生的平滑肌细胞基本恢复正常。提示天贝汤具有抑制哮喘豚鼠气道重塑，从而发挥平喘作用。其机制可能是通过减少气道EOS浸润，减少炎症介质分泌、释放，减轻炎性细胞渗出，抑制杯状细胞和平滑肌细胞增生，从而减轻气道炎症反应，抑制气道重塑。3.2天贝汤能降低支气管哮喘大鼠肺组织中NF－κB的含量，从而从细胞因子角度解释天贝汤对气道炎症的抑制作用。3.3天贝汤抑制气道重塑和细胞外基质沉积的作用可能与其降低动脉血清中MMP-9、TIMP-1含量有关。3.4天贝汤抑制气道炎症和气道重塑的作用可能与其降低肺组织中Bcl-2mRNA表达，增加Fas mRNA表达有关。4.天贝汤对实验性哮喘大鼠的平喘作用，具有剂量依赖关系，并且部分优于经典方剂小青龙汤，其机制有待于进一步深入研究。天贝汤通过多途径、多层次、多靶点抑制气道炎症和气道重塑，具有广阔的应用前景。
封继宏,刘恩顺,孙增涛[8]（2011）在《中医药治疗支气管哮喘作用机制研究近况》文中指出支气管哮喘是世界范围内严重影响公众健康的慢性疾病之一,其患病率和死亡率随环境恶化等因素在逐年上升。由于哮喘具有反复发作和进行性加重的病理特点,对患者本人的健康、生存质量造成严重威胁,同时也成为患者和社会的重要经济负担。在我国,中医药在治疗支气管哮喘中积累了两千余年的经验,发
林光常[9]（2011）在《冷哮丸对哮喘豚鼠模型作用机制的实验研究》文中认为1目的本课题以卵蛋白（OVA）致敏和攻击复制豚鼠哮喘模型,探讨冷哮丸对豚鼠哮喘模型在乙酰胆碱（Ach）激发后所致呼气阻力和气管螺旋条对组织胺反应性的影响；外周血和肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）数量、肺组织形态学观察；以及对血清免疫球蛋白E（IgE）,血清和BALF中IL-4、IL-5、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）等指标的影响,从免疫反应、气道炎症反应、气道重塑和气道反应性等方面探讨该方的平喘作用机制。2方法2.1材料2.1.1实验动物：普通级豚鼠60只,雄性,体重250±50g,湖北省实验动物研究中心提供,实验动物许可证号：SCXK（鄂）2008—0005。2.1.2药剂制备：冷哮丸由麻黄、生川乌、细辛、蜀椒、白矾、牙皂、半夏曲、陈胆星、杏仁、甘草、紫菀、款冬花共12味中药组成,按1：1：1：1：1：1：1：1：1：1：2：2比例,加10倍量的水煎煮2h,医用纱布过滤,滤渣加入6倍量的水煎煮1h,过滤,两次滤液合并,低温放置24h,过滤并水浴浓缩至原生药含量1.6g/m1,置低温冰箱中（4℃）备用。由湖北中医药大学国医堂制剂室制备。地塞米松片,0.75mg/片。临用时以蒸馏水稀释至相应药物浓度灌胃。剂量：地塞米松1mg/g;中药冷哮丸小剂量组4mg/g;中药冷哮丸中剂量组8mg/g;中药冷哮丸大剂量组16mg/g。2.1.3主要试剂：卵白蛋白（OVA）, Sigma公司；乙酰胆碱,上海科丰化学试剂责任公司；磷酸组胺,上海喜润化学工业有限公司；IgE放免试剂盒,北方生物技术研究所生产；NO测定试剂盒,南京建成生物工程研究所；豚鼠IL-4试剂盒,豚鼠IL-5试剂盒,深圳晶美生物工程有限公司；ET-1放免试剂盒,北京东亚放射免疫所。2.1.4主要仪器：JSC-OK双头式多功能型超声波雾化器；RJE压力换能器；LMS-2B型二道生理记录仪；DH-140型动物人工呼吸机；ThermoLabsystems Multiskan MK3酶标分析仪；722型光栅分光光度计；Olympus BX50F-3双显微镜（含自动照相装置NikonE990）；VEX380型-80℃低温冰箱。2.2方法2.2.1动物模型复制以卵蛋白致敏和攻击复制豚鼠哮喘模型。实验第1天,配制100g/L卵蛋白生理盐水,豚鼠腹腔注射1ml卵蛋白生理盐水以致敏；第15天将致敏豚鼠置于15升透明玻璃罩内,给予1%卵蛋白生理盐水雾化吸入。以后每隔24h以1%卵蛋白生理盐水诱喘,共4次。正常对照组用同样方法以等量生理盐水进行腹腔注射及雾化吸入。2.2.2动物分组将豚鼠随机分为6组：①正常对照组,②哮喘模型组,③西药对照组（地塞米松治疗组）,④冷哮丸大剂量组,⑤冷哮丸中剂量组,⑥冷哮丸小剂量组,每组10只。2.2.3实验检测项目2.2.3.1实验一冷哮丸对哮喘豚鼠气道反应性的影响。①一般情况观察：包括各组豚鼠的行为、饮食、体重、排便、皮毛及死亡等情况。②乙酰胆碱（Ach）支气管激发试验：于第23 d治疗结束后2h,用3%戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射麻醉,仰面固定于木板上,切开颈部皮肤暴露颈静脉及气管,用静脉留置针行颈外静脉穿刺置管,行气管切开、气管插管,连DH-140型动物人工呼吸机行辅助通气。每只豚鼠分别给予成倍增加的乙酰胆碱（0、12.5、25、50、100、200μg/kg）,每次进液量200μ1,两个相邻给药点间隔5min。采用AniRes2003动物肺功能分析系统连续动态测定呼气阻力（expiratory resistance, Re）,计算各给药时间点的Re与基础的Re比值（以百分数表示）,以Re的变化代表气道反应性。③组织胺气道反应性测定：豚鼠麻醉后,纵向剪开颈部皮肤及皮下组织,暴露气管,取中段气管软骨环,剪开形成3 mm宽的气管螺旋条。用细线将螺旋条一端固定于浴槽底部,另一端连与压力换能器。对螺旋条施以2g的起始张力,平衡1h后,间隔2-3min依次加入10-6-10-3mol/L的组织胺进行刺激,连续记录气管螺旋条的张力变化。2.2.3.2实验二冷哮丸对哮喘豚鼠外周血和BALF中EOS数量及肺组织形态学的影响。于第23d麻醉动物,分离颈动脉,取颈动脉血lml作白细胞分类和EOS计数。其余全血离心,取血清,放置-20℃低温冰箱中保存待检。对采血后的豚鼠进行肺泡灌洗,并回收肺泡灌洗液（BALF）,瑞氏染色后行EOS计数,肉眼及光镜观察豚鼠肺组织形态学变化。2.2.3.3实验三、四、五冷哮丸对哮喘豚鼠血清总IgE、血清和BALF中NO、IL-4、IL-5、ET-1的影响。按豚鼠IgE、NO、IL-4、IL-5、ET-1等相关试剂盒说明进行操作测定。2.3统计学方法数据均以x±s表示,采用SPSS17.0统计软件进行数据处理,组间数据比较采用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。3结果3.1实验一：冷哮丸对哮喘豚鼠气道反应性的影响3.1.1一般情况结果：正常对照组豚鼠无任何不适反应,平均体重增加,毛色光泽。哮喘模型组豚鼠普遍精神较差,活动减少,反应迟钝,进食及饮水量明显下降,毛色失去光泽,出现不同程度的呼吸次数增加,张口等呼吸困难症状,在整个喂养过程中体重增加不明显。哮喘模型组1只豚鼠哮喘严重发作经抢救无效死亡。各用药组豚鼠情况均较哮喘模型组明显改善。3.1.2各组豚鼠在不同浓度Ach激发后Re增长率比较：在Ach浓度为50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg时,哮喘模型组Re的增长率与正常对照组比较,差异有显着统计学意义（P<0.01）。在Ach浓度为50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg时,地塞米松治疗组、冷哮丸大、中、小剂量组与哮喘模型组Re的增长率比较,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。地塞米松治疗组与冷哮丸大剂量组之间,及其与正常对照组之间Re的增长率比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。3.1.3各组豚鼠气管螺旋条对组织胺的反应性比较：当浴槽中组织胺浓度达到10-5-10-3mol/L时,各组豚鼠气管螺旋条产生剂量依赖性收缩。哮喘模型组豚鼠气管螺旋条张力明显高于正常对照组（P<0.05）。地塞米松治疗组和冷哮丸大、中、小剂量组哮喘豚鼠的气管螺旋条对组织胺的反应性均降低,各个浓度组织胺所诱导的气管螺旋条收缩张力与正常组类似（P>0.05）。3.2实验二冷哮丸对哮喘豚鼠外周血和BALF中EOS数量及肺组织形态学的影响3.2.1冷哮丸对豚鼠血及BALF中EOS计数的影响各组豚鼠血及BALF中EOS计数结果表明：正常对照组豚鼠血及BALF中白细包总数（white blood-cell count, WBC）、EOS绝对值及百分比均较低,模型组豚鼠血及BALF中WBC、EOS绝对值及百分比显着增加,与正常组比较,差异有显着统计学意义（P<0.01）。结果表明,哮喘可引起实验豚鼠外周血及BALF中炎性细胞总数,尤其是EOS增多,这是气道炎症反应的病理学基础。治疗组各组动物外周血和BALF中白细胞总数、EOS数与哮喘模型组比较,差异均有显着统计学意义（P<0.01）,其中地塞米松组和冷哮丸大剂量组EOS数与正常对照组比较,差异无统计学意文（P>0.05）,而冷哮丸中、小剂量组EOS数与正常对照组比较,差异仍有统计学意义（P<0.05）。说明冷哮丸能较好地控制哮喘的气道炎症性反应,而且存在剂量依赖关系。3.2.2肺组织肉眼观察正常对照组：肺组织呈淡红色,表面光滑,组织柔软富有弹性。哮喘模型组：肺组织呈暗红色,表面呈颗粒状,组织膨胀明显,部分组织颜色加深。药物治疗各组肺组织介于前二者之间。3.2.3肺组织HE染色光镜观察正常对照组：豚鼠肺组织支气管黏膜上皮排列整齐,黏膜下层及外膜层次清楚,无炎症反应,管腔清洁完整无分泌物。哮喘模型组：支气管黏膜上皮可见局灶性脱落,黏膜下层明显充血水肿,EOS灶状浸润,内夹少许淋巴细胞、浆细胞。高倍镜下见黏膜杯状细胞增生,数量增多,平滑肌增生肥大。黏膜下层炎症细胞灶状浸润。地塞米松组：支气管管壁结构完整,黏膜上皮部分恢复正常,黏膜下层轻度充血水肿,管腔未见分泌物。冷哮丸大剂量组：支气管管壁结构基本完整,黏膜上皮部分恢复正常,黏膜下层水肿明显减轻,支气管管腔恢复正常,未见炎性渗出物。冷哮丸中剂量组：管腔内见少许脱落的上皮细胞,粘膜增生,基层轻度肥厚。黏膜下层见轻度充血水肿及少量炎症细胞,管腔内仍见炎性渗出物。冷哮丸小剂量组：支气管管壁结构层次清楚,黏膜上皮逐渐恢复,管腔内可见部分炎性渗出物。3.3实验三冷哮丸对哮喘豚鼠血清总IgE、血清和BALF中NO的影响3.3.1冷哮丸对哮喘豚鼠血清IgE含量的影响与正常对照组比较,哮喘模型组豚鼠血清总IgE含量升高,差异有显着统计学意义（P<0.01）。各治疗组血清总IgE含量较模型组均明显降低（P<0.01）,各治疗组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。3.3.2冷哮丸对哮喘豚鼠血清和BALF中NO含量的影响哮喘模型组血清和BALF中NO含量明显升高,与正常对照组相比,差异有显着统计学意义（P<0.01）。给予地塞米松或不同剂量冷哮丸经治疗后,血清和BALF中NO含量均明显降低,与哮喘模型组比较,差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。但治疗后,冷哮丸中、小剂量组血清和BALF中NO含量与正常对照组相比,差异仍有统计学意义（P<0.05）。3.4实验四冷哮丸对哮喘豚鼠血清和BALF中IL-4、IL-5的影响3.4.1冷哮丸对哮喘脉鼠血清和BALF中IL-4含量的影响哮喘模型组豚鼠血清和BALF中IL-4含量明显升高,与正常对照组比较,差异有显着统计学意义（P<0.01）。各治疗组豚鼠血清血清和BALF中IL-4含量明显下降,与哮喘模型组比较,差异均有显着统计学意义.（P<0.01）。3.4.2冷哮丸对哮喘豚鼠血清和BALF中IL-5含量的影响哮喘模型组豚鼠血清和BALF中IL-5含量明显升高,与正常对照组比较,差异有显着统计学意义（P<0.01）。各治疗组豚鼠血清和BALF中IL-5含量明显下降,与哮喘模型组比较,差异均有显着统计学意义（P<0.01）。3.5实验五冷哮丸对哮喘豚鼠血清和BALF中ET-1的影响3.5.1冷哮丸对哮喘脉鼠血清和BALF中ET-1L含量的影响哮喘模型组豚鼠血清和BALF中ET-1含量明显升高,与正常对照组比较,差异有显着统计学意义（P<0.01）。各治疗组豚鼠血清和BALF中ET-1含量明显下降,与哮喘模型组比较,差异均有显着统计学意义（P<0.01）,各治疗组间血清和BALF中ET-1含量比较,差异无显着统计学意义（P>0.05）。3.5.2对气道重塑的影响哮喘豚鼠支气管黏膜上皮局灶性脱落,黏膜下层明显充血水肿,EOS等炎症细胞灶状浸润,黏膜杯状细胞增生,数量增多,平滑肌增生肥大,显示哮喘模型组出现气道重塑病理改变。经冷哮丸治疗后,豚鼠的气道黏膜下层充血水肿,杯状细胞增生、平滑肌增生肥大等气道重塑病理也明显改善。4结论4.1以卵蛋白致敏加攻击方法,可以诱发豚鼠气道变态反应,成功复制哮喘豚鼠模型。4.2实验证实哮喘发病与风、寒、痰等密切相关。宿痰伏肺,遇寒触发,致气道挛急是哮喘发作的主要病机。4.3冷哮丸有温肺散寒,涤痰化饮,解痉平喘之功,对哮喘豚鼠有良好的治疗效果,其作用机制是多途径、多层次、多靶点综合作用的结果。4.3.1冷哮丸能明显抑制哮喘模型Ⅰ型变态反应。作用机制与冷哮丸降低血清：总工gE含量,下调IL-4、IL-5水平,抑制过敏介质的释放密切相关。4.3.2冷哮丸能有效控制哮喘豚鼠模型的气道炎症反应,作用机制与冷哮丸降低血及BALF中炎性细胞数量,减轻炎症浸润,并降低血清和BALF中IL-4、IL-5、NO水平有关。4.3.3冷哮丸能明显缓解哮喘模型气道重塑改变。作用机制与冷哮丸抑制气道炎症,阻断气道平滑肌和粘膜的增厚,降低血清和BALF中ET-1水平有关。4.3.4冷哮丸能明显降低哮喘模型气道高反应性。其作用机制与冷哮丸松弛气道平滑肌,控制气道炎症,抑制气道重塑等功能有关。
徐立然[10]（2011）在《“补益肺肾、祛风化痰法”治疗支气管哮喘慢性持续期的临床研究和机理探讨 ——周仲瑛教授临床经验应用与评价方法研究》文中研究表明目的：中医药治疗支气管哮喘慢性持续期在“治未病”思想指导下,具有疗效好,作用持续,有效防治复发等特点,在整个支气管哮喘的防治工作中具有重要地位。我国着名国医大师周仲瑛教授以“风痰夙根论”及“发时治标、平时治本相对论”等学术观点形成独特的理论体系,确立“补益肺（脾）肾、祛风化痰”为哮喘慢性持续期治疗大法,并制定温养化痰方和清养化痰方为基础构成治疗方案。本文通过对周老治疗方案的临床观察和实验机理研究,以继承名医的理论体系和临床经验为目的,探讨其理法方药体系以及作用机理。方法：临床研究部分：本研究采用队列研究的方法,应用周老温养化痰方和清养化痰方与常规治疗方剂进行对照研究,观察与评价对支气管哮喘慢性持续期进行干预治疗的疗效和安全性。课题共纳入211例患者,其中脱落及剔除9例,进入统计分析病例202例。其中名中医组中寒哮患者73例,热哮患者48例,共121例。而常规组中寒哮患者44例,热哮患者37例,共81例。以上患者分别给予温养化痰方、清养化痰方、固本咳喘汤、麦味地黄汤,每日1剂,水煎200ml,1日2次,口服。小儿患者30kg以下者用量如上,但分两天服用。通过疗效性观察和安全性观察,比较名中医组和常规组的临床疗效。实验研究部分：将135只Wistar雄性大鼠随机分成正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、清养化痰方低剂量组、清养化痰方中剂量组、清养化痰方高剂量组、温养化痰方低剂量组、温养化痰方中剂量组、温养化痰方高剂量组,每组15只,以卵蛋白致敏、反复长期激发的方式建立大鼠慢性哮喘模型,并予相应药物干预,观察记录大鼠—般状况,至实验结束,光镜下观察大鼠肺组织病理学变化,酶联免疫吸附法检测大鼠血清中TNF-α的含量,免疫组化法检测肺组织中NF-κB及MIF的表达,图像分析定量。数据用SPSS15.0统计软件进行统计学处理。结果：临床研究部分：1.在寒哮证中,名中医组临床控制率为20.0%,临床控制显效率为74.0%,总有效率为98.6%；而常规组分别为13%、43.2%、84.1%。两组比较,名中医组的临床控制显效率和总有效率明显高于常规组（P<0.01）。2.在热哮证中,名中医组临床控制率为22%,临床控制显效率为68.8%,总有效率为91.7%；而常规组分别为8.0%、35.1%、78.4%。两组比较,名中医组的临床控制显效率明显高于常规组（P<0.01）。3.名中医组与常规组相比,名中医组的临床控制显效率和总有效率明显高于常规组（P<0.01）。同时在名中医组和常规组进行远期疗效、生活质量、及ECP、IL-2、IL-4、IL-13、IFN-γ等指标改善方面的比较,名中医组具有明显优势。实验研究部分：成功复制大鼠慢性哮喘模型,各治疗组可明显改善大鼠的一般状态；哮喘模型组大鼠肺组织中大量炎症细胞浸润,气道上皮损伤,气道壁增厚,各治疗组病理学改变较哮喘模型组轻,清养化痰方低剂量组、温养化痰方中、高剂量组及地塞米松组改善明显。肺组织NF-κB表达方面,哮喘模型组大鼠肺组织NF-κB表达显着高于正常对照组（P<0.01）,各治疗组的表达显着低于模型组（P<0.05）,但显着高于正常对照组（P<0.01）,温养化痰方高、中剂量组和清养化痰方低剂量组的表达水平与地塞米松组比无显着性差异（P>0.05）,其余中药各组则显着高于地塞米松组（P<0.05）；温养化痰方高剂量组低于清养化痰方高剂量组,两者有显着性差异（P<0.05）。肺组织MIF表达方面,哮喘模型组大鼠肺组织MIF表达显着高于正常对照组P<0.01),各治疗组的表达显着低于模型组P<0.05),但显着高于正常组（P<0.01）；化痰方各治疗组与地塞米松组比无显着性差异（P>0.05）,温养化痰方高剂量组表达水平最低,且与清养化痰方高剂量组比有显着性差异（P<0.05）。哮喘模型组及各治疗组血清TNF-α显着高于正常对照组（P<0.05）,各治疗组与哮喘模型组有显着性差异（P<0.05）,可明显降低血清TNF-α水平,中药组与地塞米松组比无显着性差异（P>0.05）,清养化痰方高剂量及温养化痰方高剂量组作用最为明显。结论：温养化痰方、清养化痰方可以明显缓解支气管哮喘慢性持续期（肺肾气虚、寒痰证和肺肾阴虚、痰热内蕴证）患者的喘息、咯痰、咳嗽、胸闷、哮鸣音等临床症状体征,增加哮喘控制测试的评分,同时在远期疗效、生活质量等方面的改善,名中医组具明显优势。本药物无明显不良反应,具有良好的安全性。实验结果提示：1.化痰方能有效缓解慢性哮喘模型大鼠的临床表现和病理学改变,其作用机理在于：降低了NF-κB及MIF的表达及血清中TNF-a含量。2.寒热不同治法的清养和温养两方作用于同一哮喘模型在降低NF-κB、MIF的表达及血清TNF-α含量方面有着共同的作用,但量效方面存在着差异,这可能与本实验模型不具备“证”的特点有关。
二、益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润及活化的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润及活化的影响（论文提纲范文）
（1）基于细胞自噬mTOR信号通路探讨益气温阳护卫法防治哮喘的作用机制（论文提纲范文）
| 细胞自噬与哮喘发病 |
| m TOR介导并调控细胞自噬 |
| 中医卫气与细胞自噬的相关性 |
| 益气温阳护卫法与哮喘 |
| 1.“气阳虚弱，卫气不固”为哮喘发病的内因 |
| 2.益气温阳护卫法调节细胞自噬干预哮喘的可能 |
（2）益气温阳护卫法对哮喘大鼠Th17细胞/Treg细胞免疫失衡的影响及作用机理研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 注释表 |
| 引言 |
| 第一章 理论探讨 |
| 第一节 古代文献关于哮病的认识 |
| 1.病名源流追溯 |
| 2.病因认识 |
| 3.病位认识 |
| 4.病机认识 |
| 5.治疗概述 |
| 第二节 现代医家对哮喘的认识与辨治 |
| 第三节 现代医学哮喘发病机制和治疗进展 |
| 1.哮喘发病机制 |
| 2.治疗进展 |
| 第四节 Th17/Treg免疫失衡与哮喘 |
| 1.Th17 细胞功能及分化 |
| 2.Treg细胞功能及分化 |
| 第五节 益气温阳护卫法调节哮喘Th17/Treg免疫失衡理论依据 |
| 1.益气温阳护卫法防治哮喘理论依据 |
| 2.益气温阳护卫法立法组方特点 |
| 3.“气阳虚弱,卫气不足”与免疫失衡相关 |
| 小结 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 体内实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 第二节 体外实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 全文总结 |
| 结论 |
| 创新性 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简历 |
（3）基于Th1/Th2失衡初探益气温阳护卫法对哮喘炎症白三烯通道干预作用（论文提纲范文）
| 1 白三烯通道是导致哮喘气道炎症的重要通道 |
| 2 Th1/Th2失衡导致哮喘气道炎症形成 |
| 3 益气温阳护卫法通过调节Th1/Th2失衡干预哮喘气道炎症形成 |
| 3.1 哮喘发病内因“气阳虚弱”与Th1/Th2失衡相关 |
| 3.2 益气温阳护卫法通过调节Th1/Th2失衡干预哮喘气道炎症形成 |
| 4 Th1/Th2失衡与白三烯通道在哮喘气道炎症方面相互影响 |
（4）款冬花总倍半萜对OVA致敏大鼠哮喘模型的干预作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 立题背景与意义 |
| 1.2 研究内容、技术路线图及创新点 |
| 第二章 文献综述 |
| 2.1 款冬花总倍半萜研究进展 |
| 2.2 哮喘模型研究进展 |
| 2.3 平喘中药研究进展 |
| 2.4 中药干预哮喘的作用通路研究进展 |
| 第三章 款冬花总倍半萜的制备与分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 仪器与材料 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 款冬花总倍半萜制备方法的研究 |
| 3.3.2 款冬花总倍半萜成分的定性与定量分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 款冬花总倍半萜制备条件 |
| 3.4.2 ~1H-NMR定性检测款冬花总倍半萜 |
| 3.4.3 HPLC定量检测款冬花总倍半萜的含量 |
| 3.5 小结与讨论 |
| 第四章 款冬花总倍半萜雾化吸入对OVA致敏大鼠哮喘模型的干预作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 仪器与材料 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 款冬花总倍半萜雾化吸入对OVA致敏哮喘大鼠的干预作用动物实验 |
| 4.3.2 BALF中炎症细胞计数 |
| 4.3.3 肺组织病理切片HE染色、PAs染色、Masson染色 |
| 4.3.4 支气管病理切片HE染色 |
| 4.3.5 ELISA检测血清中s OVA-Ig E、IL-4、IL-13 水平 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 血液白细胞计数结果 |
| 4.4.2 BALF细胞计数结果 |
| 4.4.3 肺组织病理切片结果及半定量分析 |
| 4.4.4 支气管病理切片结果及半定量分析 |
| 4.4.5 血清中s OVA-Ig E、IL-4、IL-13 的浓度 |
| 4.5 小结与讨论 |
| 第五章 款冬花总倍半萜雾化吸入对OVA致敏大鼠哮喘模型的干预作用机制研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 样本来源 |
| 5.3.2 肺组织液质代谢组学研究 |
| 5.3.3 Western blot检测大鼠肺组织中p65 NF-kB的表达量 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 大鼠肺组织中p65 NF-kB的表达量 |
| 5.4.2 肺组织中差异代谢物的指认及分析 |
| 5.4.3 代谢通路通路分析 |
| 5.5 小结与讨论 |
| 第六章 总结与展望 |
| 6.1 本课题研究工作总结 |
| 6.1.1 款冬花总倍半萜的提取方法 |
| 6.1.2 款冬花总倍半萜对OVA致敏大鼠哮喘的干预 |
| 6.1.3 款冬花总倍半萜对OVA致敏大鼠哮喘干预的代谢通路 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（5）温肺哮喘方对哮喘大鼠模型bcl-2和bax表达的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 试剂及仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 动物排除标准 |
| 2.3 模型建立 |
| 2.4 实验步骤 |
| 2.5 检测指标 |
| 2.6 观察及记录 |
| 2.7 统计学处理 |
| 结果 |
| 1 实验大白鼠死亡情况 |
| 2 各组大鼠肺组织及支气管壁 EOS 数量比较 |
| 3 各组大鼠肺组织 Bcl-2 免疫组化染色结果比较 |
| 4 各组大鼠肺组织 Bax 免疫组化染色结果比较 |
| 讨论 |
| 1 肺肾阳虚与支气管哮喘的关系 |
| 2 温法治疗支气管哮喘 |
| 2.1 益气温阳 |
| 2.2 温阳补肾 |
| 2.3 温肺化饮 |
| 2.4 温灸 |
| 3 支气管哮喘与 EOS |
| 4 EOS/Bcl-2 和 Bax 的最新研究 |
| 5 温肺哮喘方的组方特色 |
| 6 温肺哮喘方对支气管哮喘模型大鼠的影响 |
| 6.1 温肺哮喘方对支气管哮喘大白鼠嗜酸性粒细胞凋亡的影响 |
| 6.2 温肺哮喘方对支气管哮喘膜细胞大鼠相关凋亡基因 Bcl-2和 Bax 阳性表达的影响 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1. 附图 |
| 2. 附表 |
| 研究生期间发表论文情况 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5、IL-13及肺组织TGF-β1影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 实验研究 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 实验用药品 |
| 1.1.3 实验用试剂 |
| 1.1.4 实验仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 造模方法与模型评价 |
| 1.2.2 给药方法及途径 |
| 1.2.3 标本采集与方法 |
| 1.2.4 观察指标与检测方法 |
| 1.3 实验结果与统计分析 |
| 1.3.1 一般情况 |
| 1.3.2 各组大鼠肺组织光镜下病理学观察 |
| 1.3.3 实验后大鼠存活率比较 |
| 1.3.4 实验前后大鼠体重的变化 |
| 1.3.5 大鼠血清中IL-5含量比较 |
| 1.3.6 大鼠血清中IL-13含量比较 |
| 1.3.7 各组肺组织TGF-β1表达比较(计算机图像分析10D值) |
| 第二章 讨论 |
| 2.1 背景 |
| 2.2 柴胡渗湿汤对哮喘动物模型检测指标影响及结果分析 |
| 2.2.1 关于模型选择及模型评价 |
| 2.2.2 大鼠一般状况表现比较 |
| 2.2.3 各治疗组对模型大鼠IL-5/IL-13含量及肺组织TGF-β1的影响 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 附录 |
| 致谢 |
（7）天贝汤对支气管哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 一、现代医学对哮喘的认识 |
| 二、祖国医学对哮喘的认识 |
| 实验一 天贝汤对支气管哮喘大鼠肺组织核因子-κB（NF-κB）的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 分析讨论 |
| 结论 |
| 实验二 天贝汤对支气管哮喘大鼠动脉血清中基质金属蛋白酶9和组织基质金属蛋白酶抑制物1含量的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 分析讨论 |
| 结论 |
| 实验三 天贝汤对支气管哮喘大鼠肺组织表面 Fas 和 Bcl-2 mRNA 表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 分析讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）中医药治疗支气管哮喘作用机制研究近况（论文提纲范文）
| 1 抑制气道炎症 |
| 2 调节免疫功能 |
| 3 调整神经失衡 |
| 4 降低气道反应性 |
| 5 改善气道重塑 |
| 6 评价与展望 |
（9）冷哮丸对哮喘豚鼠模型作用机制的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 实验一 冷哮丸对哮喘豚鼠气道反应性的影响 |
| 实验二 冷哮丸对哮喘豚鼠外周血和BALF中EOS数量及肺组织形态学的影响 |
| 实验三 冷哮丸对哮喘豚鼠血清总IgE、血清和BALF中NO的影响 |
| 实验四 冷哮丸对哮喘豚鼠血清和BALF中IL-4、IL-5的影响 |
| 实验五 冷哮丸对哮喘豚鼠血清和BALF中ET-1的影响 |
| 讨论与结论 |
| 1 哮喘的中医学认识 |
| 1.1 哮喘的命名 |
| 1.2 哮喘的病因病机 |
| 1.3 哮喘的中医治则治法 |
| 2 现代医学对哮喘的认识 |
| 2.1 哮喘的定义 |
| 2.2 哮喘的致病机制 |
| 2.3 哮喘之危险因子 |
| 2.4 医理小结 |
| 2.5 治疗方式 |
| 3 健康心理学对哮喘的观点 |
| 4 对哮喘豚鼠模型的评价 |
| 5 冷哮丸的选用依据与药理作用分析 |
| 5.1 冷哮丸的选用依据 |
| 5.2 冷哮丸的药理作用 |
| 6 冷哮丸治疗哮喘的机制探讨 |
| 6.1 对哮喘变态反应的影响 |
| 6.2 对哮喘气道炎症反应的影响 |
| 6.3 对气道重塑的影响 |
| 6.4 对哮喘气道高反应性的影响 |
| 7 结论 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 博士学位期间发表的学术论文及着作 |
| 致谢 |
（10）“补益肺肾、祛风化痰法”治疗支气管哮喘慢性持续期的临床研究和机理探讨 ——周仲瑛教授临床经验应用与评价方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1. 历史文献研究 |
| 1.1 病名及其内涵和外延 |
| 1.2 病因病机探讨 |
| 1.3 辨证论治研究 |
| 2. 近年中医药研究 |
| 2.1 支气管哮喘慢性持续期的病因病机认识 |
| 2.2 支气管哮喘慢性持续期的中医治疗法则 |
| 2.3 支气管哮喘慢性持续期的中医药复方应用 |
| 2.4 支气管哮喘慢性持续期的中医药实验研究 |
| 3. 现代医学研究 |
| 3.1 与体质相关的发病危险因素 |
| 3.2 支气管哮喘与IgE |
| 3.3 支气管哮喘与细胞因子 |
| 3.4 支气管哮喘与核因子-κB |
| 3.5 支气管哮喘与肺功能 |
| 3.6 支气管哮喘的生活质量评价 |
| 4. 目前存在的问题和解决的思路 |
| 5. 周仲瑛教授学术思想探讨 |
| 5.1 肺肾两虚、风痰伏肺,是哮喘慢性持续期的病机关键 |
| 5.2 补益肺肾、祛风化痰,是哮喘慢性持续期的治疗大法 |
| 5.3. 风痰瘀虚夹杂,是哮喘慢性持续期的复杂因素 |
| 5.4 防控复发,是哮喘慢性持续期的"治未病"学术思想 |
| 5.5 "温养化痰方"和"清养化痰方"探微 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1. 病例选择标准 |
| 1.1 西医诊断标准 |
| 1.2 临床分期标准 |
| 1.3 临床分级标准 |
| 1.4 中医辨证标准 |
| 1.5 病例纳入标准 |
| 1.6 病例排除标准 |
| 1.7 退出和中止试验病例标准 |
| 1.8 不良事件处理 |
| 2. 统计学方法 |
| 3. 临床资料 |
| 3.1 病例来源及分组 |
| 3.2 性别与年龄分布 |
| 3.3 证型分布 |
| 3.4 病情严重程度分级 |
| 4. 治疗方法 |
| 4.1 采用前瞻性队列研究 |
| 4.2 暴露(或治疗)界定 |
| 5. 观察指标 |
| 5.1 疗效性观察 |
| 5.2 安全性观察 |
| 6. 疗效评定标准 |
| 6.1 疾病疗效判断标准 |
| 6.2 中医证候疗效评价标准 |
| 6.3 安全性评价标准 |
| 7. 治疗结果 |
| 7.1 疗效比较 |
| 7.2 治疗前后哮喘控制测试(ACT)评分比较 |
| 7.3 治疗前后症状、体征变化 |
| 7.4 治疗期间各时间点症状、体征变化 |
| 7.5 两组治疗前后次症变化 |
| 7.6 治疗前后实验室检查变化 |
| 7.7 远期疗效观察 |
| 7.8 生存质量调查 |
| 8. 安全性观察 |
| 9. 讨论 |
| 9.1 总体疗效突显 |
| 9.2 减少发作频次和程度 |
| 9.3 改善患者生存质量 |
| 9.4 改善肺的通气功能 |
| 9.5 作用机理探讨 |
| 9.6 安全可靠,未见毒副反应 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 温养化痰方、清养化痰方对哮喘大鼠NF-κB的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1 一般状况 |
| 2.2 各组大鼠肺组织病理学观察 |
| 2.3 NF-κB在各组肺组织中的表达情况 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 实验二 温养化痰方、清养化痰方对哮喘大鼠MIF的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 一般状况 |
| 2.2 各组大鼠肺组织病理学观察 |
| 2.3 MIF在各组肺组织中的表达情况 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 实验三 温养化痰方、清养化痰方对哮喘大鼠TNF-α的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2. 实验结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 实验总结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞浸润及活化的影响（论文参考文献）
- [1]基于细胞自噬mTOR信号通路探讨益气温阳护卫法防治哮喘的作用机制[J]. 向双娣,喻强强,余建玮,余涛,叶超,薛汉荣. 中华中医药杂志, 2021(11)
- [2]益气温阳护卫法对哮喘大鼠Th17细胞/Treg细胞免疫失衡的影响及作用机理研究[D]. 余涛. 江西中医药大学, 2021(01)
- [3]基于Th1/Th2失衡初探益气温阳护卫法对哮喘炎症白三烯通道干预作用[J]. 鲍梦婕,洪滔,薛汉荣,余建玮,洪广祥,叶超,李轩,喻强强. 时珍国医国药, 2019(07)
- [4]款冬花总倍半萜对OVA致敏大鼠哮喘模型的干预作用及其机制研究[D]. 段亚辉. 山西大学, 2019(01)
- [5]温肺哮喘方对哮喘大鼠模型bcl-2和bax表达的影响[D]. 方宇林. 湖北中医药大学, 2014(11)
- [6]柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5、IL-13及肺组织TGF-β1影响的实验研究[D]. 闫云霞. 青岛大学, 2012(09)
- [7]天贝汤对支气管哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响的实验研究[D]. 徐丽. 辽宁中医药大学, 2012(06)
- [8]中医药治疗支气管哮喘作用机制研究近况[J]. 封继宏,刘恩顺,孙增涛. 辽宁中医杂志, 2011(06)
- [9]冷哮丸对哮喘豚鼠模型作用机制的实验研究[D]. 林光常. 湖北中医药大学, 2011(05)
- [10]“补益肺肾、祛风化痰法”治疗支气管哮喘慢性持续期的临床研究和机理探讨 ——周仲瑛教授临床经验应用与评价方法研究[D]. 徐立然. 南京中医药大学, 2011(07)