一、糖皮质激素改善ARDS缺氧与休克的实验研究（论文文献综述）
张政,李倩[1]（2021）在《3种刺激性气体中毒临床治疗现状》文中进行了进一步梳理刺激性气体是一类对眼、呼吸道粘膜及皮肤具有以刺激作用为主的气体,对呼吸道产生的刺激作用最强,刺激性气体的种类较多。常见的刺激性气体中毒包括氯气中毒、氮氧化物气体中毒、光气中毒,此3种刺激性气体的急性中毒目前均无特效解毒药,一直以来是临床上比较棘手的问题,为了给以后的临床工作提供经验,本文通过查阅相关文献,综述有关此3种刺激性气体中毒的主要治疗方法及进展。
徐倩倩[2]（2021）在《机械通气治疗新生儿重症胎粪吸入综合征预后的危险因素分析》文中研究说明目的探讨影响机械通气治疗新生儿重症胎粪吸入综合征（MAS）预后的危险因素,分析这些因素的预测价值,为提高重症MAS的抢救和治疗水平提供帮助,从而降低重症MAS患儿的病死率。方法回顾性分析2014年1月至2020年1月我院收治的77例机械通气治疗的重症MAS患儿临床资料,根据治疗后病情转归情况分为治疗成功组（n=53）和治疗失败组（n=24）,对两组患儿的一般临床资料、动脉血气分析、肺表面活性物质（PS）使用情况及并发症进行分析比较,再对有统计学意义的观察指标进行多因素逐步Logistic回归分析及受试者工作特征（ROC）曲线分析。结果机械通气治疗重症MAS的预后与胎龄、日龄、出生体重、性别、分娩方式无关（P>0.05）,治疗成功组较治疗失败组机械通气联合PS气管内滴入使用率高,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗失败组胎儿宫内窘迫、持续性肺动脉高压（PPHN）及多器官功能障碍（MODS）发生率分别为66.7%、41.7%及66.7%,均高于治疗成功组（41.5%、5.7%、22.6%）,差异有统计学意义（P<0.05）,而缺氧缺血性脑病（HIE）、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）及新生儿肺出血（NPH）的发生在两组间比较无明显差异（P>0.05）。治疗失败组的1 min和5 min Apgar评分、p H值、动脉血氧分压（Pa O2）及碱剩余（BE）值均明显低于成功组,差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示Pa O2、BE值、PPHN、MODS是影响机械通气治疗重症MAS预后的独立危险因素。BE值预测重症MAS预后的ROC曲线下面积为0.713（95%CI:0.558-0.867,P<0.05）,临界值为-8.5,敏感性和特异性分别为94.3%和58.3%;Pa O2预测重症MAS预后的ROC曲线下面积为0.726（95%CI:0.559-0.853,P<0.05）,临界值为40.5mm Hg（1mm Hg=0.133k Pa）,敏感性和特异性分别为79.2%和58.3%。结论胎儿宫内窘迫、酸中毒和Apgar评分与重症MAS预后不良有关。机械通气联合PS气管内滴入有助于改善重症MAS的预后,但不是影响其预后的独立危险因素。Pa O2、BE值及并发症PPHN、MODS是影响机械通气治疗重症MAS预后的独立危险因素,Pa O2及BE值可作为重症MAS早期预测指标,早期及时对这些危险因素采取防治措施能够降低重症MAS的病死率。
徐秋实[3]（2021）在《冷诱导RNA结含蛋白在重症急性胰腺炎相关性肺损伤发病机制中的作用及大黄素干预的实验研究》文中研究表明背景:随着世界范围内生活方式的广泛改变,致使肥胖和胆结石发生率日益增加,导致急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）的发病率呈逐年上升趋势。AP是临床上常见的腹部急症,其特点是起病急,进展快。临床上常将急性胰腺炎分为轻症急性胰腺炎（mild acute pancreatitis,MAP）和重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）,其中重症急性胰腺炎占20%左右。最新资料显示,SAP患者的病死率在13%～35%之间。而急性肺损伤（Acute Lung Injury,ALI）则是SAP最常见的早期并发症之一,ALI可进一步发展为危重的急性呼吸窘迫综合征（Acute Respiratory Distress Syndrome,ARDS）。入院1周内死亡的SAP患者中有60%死于呼吸功能衰竭,ARDS被认为是造成SAP患者死亡的主要原因之一。目前,国内、外学者将这种由急性胰腺炎所导致的肺损害称为急性胰腺炎相关性肺损伤（Acute Pancreatitis-Associated Acute Lung Injury,APALI）,虽然在APALI的发病机制和药物干预方面的相关研究越来越多,但近年来APALI的治疗效果仍无明显改善,死亡率仍然居高不下。因此,亟待深入探索APALI的发病机制及有效的治疗策略。细胞外冷诱导RNA结合蛋白（Extracellular cold inducible RNA-binding protein,e CIRP）是一种损伤相关分子模式（Damage-associated molecular pattern,DAMP）。在失血性休克或败血症患者中可检测到高水平的血清CIRP,其升高程度与死亡率呈正相关。在功能上,eCIRP可以激活NLRP3炎性小体,加剧炎症性疾病并导致组织损伤。NLRP3炎性小体是一个蛋白复合物,它可以直接与凋亡相关斑点样蛋白（Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC）相互作用激活caspase-1,激活的caspase-1裂解活化gasdermin D（GSDMD）,pro-IL-1β和pro-IL-18,导致细胞焦亡和IL-1β以及IL-18的分泌。细胞焦亡是近年来发现的一种新的细胞死亡形式,与炎症有关,可导致疾病进程恶化。肺常驻巨噬细胞,如肺泡巨噬细胞活化产生剧烈炎症反应释放多种炎症介质是ALI/ARDS发病的关键因素。肺泡巨噬细胞焦亡可以通过产生炎性细胞因子IL-1β、IL-18等,加剧肺组织损伤。然而,对于eCIRP是否引能起肺泡巨噬细胞焦亡以及其是否参与APALI的发生发展过程,目前尚无报道,值得进一步探索。历经20余年的探索,本研究组在APALI的发病机制以及中西医结合治疗方案的基础与临床方面的研究证实,应用中西医结合方案治疗APALI,可明显缩短SAP病程,并降低病死率。因此,在SAP、APALI的诊疗方面,将现代医学与祖国传统医学相结合,优势互补,具有广阔的应用前景。经过多年的临床实践和实验研究,“肺与大肠相表里”理论得到充分阐释,并且经后世医家发展,成为中医学理论的重要组成部分之一。研究显示APALI的发生、发展可能与SAP时肠屏障功能发生障碍,肠内细菌和毒素易位后被吸收入血,循环至肺部有关。上述研究结果与中医脏腑相关理论中的“肺与大肠相表里”相关理论不谋而合,即“腑气不通,上逆于肺”,所以从治疗角度上要注重“从肠治肺”,故病变早期治法上以攻里通下为主,引肺气下行以止喘息。中医常用大黄以泻下攻积,清热泻火,故目前临床在中西医结合治疗急性胰腺炎方剂中都配伍中药大黄,而大黄素是大黄的主要活性成分之一。为探究大黄素在治疗APALI中可能的作用机理,本研究通过5%牛磺胆酸钠（Sodium Taurocholate,STC）逆行胰胆管注射法,应用SD大鼠建立APALI动物模型,利用现代生物学方法与技术,探究eCIRP在APALI发病机制中的病理潜在作用及大黄素的干预作用,以期进一步揭示APALI的发病机制并为中西医结合疗法防治APALI提供实验依据和新的治疗策略。目的:通过检测APALI大鼠模型CIRP的表达变化及拮抗CIRP对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的影响,以及应用重组大鼠CIRP刺激大鼠肺泡巨噬细胞并检测CIRP对该细胞的影响,以探索CIRP在APALI发病机制中的作用,同时应用大黄素进行干预性治疗的研究,探究大黄素治疗APALI的靶点,从而为治疗APALI寻找潜在靶点和应用大黄素治疗APALI提供理论依据。方法:第一部分:动物模型体内实验研究。将40只雄性SD（Sprague Dawley）大鼠,随机分为4组:假手术组（CON）,重症胰腺炎组（SAP）,C23（CIRP拮抗剂）干预组（C23）,大黄素干预组（EMO）。采用5%牛磺胆酸钠溶液（Sodium Taurocholate,STC）经胆胰管逆行注射（1ml/kg,0.1ml/min）诱导SAP大鼠模型,CON组大鼠经胆胰管逆行注入等体积无菌生理盐水。C23干预组于造模后2小时经尾静脉注入C23（8mg/kg）。大黄素干预组于术后2小时及术后12小时分别灌胃给予大黄素（40mg/kg）。造模24小时后,将各组大鼠麻醉后,开腹经腹主动脉采血,并收集胰腺及肺组织。进行HE染色观察胰腺及肺组织病理改变,并进行胰腺和肺组织病理评分来评价C23和大黄素对SAPALI的保护作用;酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定血清中CIRP、淀粉酶、IL-1β;应用全自动血气分析仪进行动脉血气分析测定;免疫组化染色观察胰腺和肺组织内CIRP表达情况及肺组织中Ly6G+细胞;采用qRT-PCR测定胰腺和肺组织中的CIRP mRNA水平及肺组织中的NLRP3、IL-1β和CXCL1的mRNA表达水平;以蛋白印迹（Western blot）法检测CIRP、p-P65、t-P65、p-IKBα、t-IKBα、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、CXCL1蛋白在各组大鼠中的表达;采用多重荧光染色观察胰岛中CIRP及肺内常驻巨噬细胞（F4/80+细胞）NLRP3和CXCL1的表达。第二部分:体外细胞学实验研究。以大鼠肺泡巨噬细胞珠NR8383细胞为研究对象,观察重组大鼠CIRP对肺泡巨噬细胞焦亡及炎症小体相关分子基因和蛋白表达的影响及大黄素的干预作用。实验一,NR8383细胞随机分为5组:对照组（Control）,重组CIRP处理组（CIRP）,TAK-242（一种TLR4受体特异性抑制剂）处理组（CIRP+TAK242）,C23处理组（CIRP+C23）,大黄素处理组（CIRP+EMO）。其中,对照组不予特殊处理,其余各组在采用重组大鼠CIRP（1.5μg/ml）处理NR8383细胞6h的同时,分别予应用TAK-242（500μM）预处理24h、应用C23（300ng/ml）预处理1h以及同时给予大黄素（20μM）干预。应用流式细胞术检测各组细胞的焦亡（Caspase-1以及PI双染）率。采用qRT-PCR测定各组细胞NLRP3、IL-1β和CXCL1的mRNA表达水平。采用Western blot法检测p-P65、t-P65、p-IKBα、t-IKBα、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、CXCL1蛋白在各组细胞中的表达。实验二,细胞分为Control组,CIRP组,CIRP+Si-IL-1β组和CIRP+NC（Negative control）组,应用NC siRNA或IL-1β特异性siRNA,在Lipofectamine 2000的介导下转染NR8383细胞48h后,用1.5μg/ml的CIRP处理CIRP组、NC组及Si-IL-1β组6h。此外,分别用不同浓度（0、1 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml）的重组大鼠IL-1β和应用10 ng/ml的IL-1β,以不同的时间点（0、6、12、24h）处理NR8383细胞,然后收集细胞,提取蛋白和RNA,采用q RT-PCR法和Western blot法研究IL-1β在CIRP诱导CXCl1表达中的作用。结果:第一部分,动物模型实验结果:（1）与CON组相比,SAP组大鼠胰腺及肺组织显示出明显的病理损伤,病理评分显着性增高（p<0.001）。此外,与CON组相比,SAP组大鼠血清CIRP、淀粉酶、IL-1β均明显升高（p<0.001）,且SAP组动脉血PaO2水平明显下降（p<0.001）,与此同时该组动脉血PaCO2水平明显上升（p<0.001）。与SAP组相比,C23组及EMO组胰腺及肺组织损伤明显缓解（p<0.001）,血清CIRP、淀粉酶、IL-1β均明显下降（p<0.001）,以及动脉血PaO2水平明显上升（p<0.001）而PaCO2水平明显下降（p<0.001）。（2）通过免疫组化、免疫荧光、qRT-PCR以及Western blot检测发现,与CON组相比,SAP组大鼠胰腺（主要位于胰岛）及肺组织CIRP表达明显增加（p<0.001）。与CON组相比,SAP组大鼠肺内p-P65、p-IKBα、NLRP3、ASC（Monomer,Dimer,Polymer）、Caspase-1 p20、GSDMD-N、IL-1β（pro-IL-1β以及p17）、CXCL1表达明显增高（p<0.001）,且SAP组大鼠肺组织内中性粒细胞（Ly6G+细胞）的浸润明显增加。（3）与SAP组相比,C23组及EMO组胰岛及肺组织CIRP表达明显被抑制,且伴随着肺内p-P65、p-IKBα、NLRP3、ASC（Monomer,Dimer,Polymer）、Caspase-1 p20、GSDMD-N、IL-1β（pro-IL-1β以及p17）、CXCL1表达的下降（p<0.05）及肺内Ly6G+细胞的浸润的明显减少。第二部分,体外细胞学实验结果。（1）用CIRP（1.5μg/ml）诱导了NR8383细胞内p-IKBα和p-P65及NLRP3、ASC（Monomer,Dimer,Polymer）、Caspase-1 p20、GSDMD-N、IL-1β（pro-IL-1β以及p17）蛋白的表达增高（p<0.001）,并进一步促进了NR8383细胞的焦亡（p<0.001）,同时还促进了其表达CXCL1（p<0.001）。TLR4受体抑制剂TAK-242几乎完全地抑制了CIRP所致的上述细胞效应（p<0.001）。结果表明,CIRP通过TLR4受体介导的NF-κB信号及NLRP3炎症小体的激活诱导NR8383细胞焦亡。CIRP拮抗剂C23和大黄素均显示出能够显着性抑制CIRP所致的NR8383细胞内NF-κB的活化、NLRP3炎症小体及组装与激活、细胞焦亡及CXCL1的表达,差异有统计学意义（p<0.05）。（2）CIRP对NR8383细胞表达CXCL1的影响。结果显示,与Control组相比,CIRP组的CXCL1表达明显增高（p<0.001）。而与CIRP组相比,CIRP+Si-IL-1β组的CXCL1表达水平显着性下降（p<0.001）,CIRP+NC（Negative control）组的CXCL1表达水平则无明显改变（p>0.05）。结果表明,IL-1β是CIRP促进NR8383细胞表达CXCL1的关键介质。分别用不同浓度（0、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml）的重组大鼠IL-1β和以相同浓度的IL-1β（10ng/ml）以不同的时间点（0、6、12、24h）刺激NR8383细胞,结果显示,IL-1β以剂量依赖性的方式和时间依赖性的方式促进NR8383细胞表达CXCL1。结论:（1）采用5%牛磺胆酸钠溶液经胆胰管逆行注射制备SAP肺损伤模型24h后,模型组大鼠血清淀粉酶含量的显着升高,胰腺和肺组织出现了明显的病理损伤,同时动脉血气分析结果也显示大鼠出现明显的呼吸功能障碍,表明SAP诱发肺损伤模型制备成功。（2）CIRP在APALI大鼠模型的胰岛及肺组织中表达增高,并伴有血清CIRP水平的升高。应用CIRP拮抗剂C23后,CIRP在胰岛、肺组织中表达下调且血清中CIRP水平下降,并明显缓解了ALI,提示CIRP与APALI发生发展密切相关。CIRP拮抗剂C23能抑制APALI大鼠肺组织中NF-κB的激活、NLRP3炎症小体的组装与活化、肺组织中CXCL1的表达及中性粒细胞的浸润,并缓解了SAP时的肺损伤。（3）CIRP可能通过TLR4受体介导激活大鼠肺泡巨噬细胞的NF-κB信号及NLRP3/IL-1β/CXCL1信号通路,在APALI中发挥重要作用。（4）大黄素能能显着降低APALI大鼠的血清淀粉酶、CIRP和IL-1β水平,能明显减轻SAP大鼠胰腺和肺组织的病理损伤,并能够改善肺功能,显示出对APALI具有较好的治疗作用。（5）大黄素可能通过抑制CIRP-TLR4介导的NF-κB和NLRP3/IL-1β/CXCL1信号通路减少中性粒细胞向肺内浸润从而发挥其治疗APALI的药理作用。
罗景华[4]（2020）在《分泌型磷脂酶A2阻断剂通过减少肺表面活性剂降解对脂多糖致新生大鼠ARDS肺损伤的保护作用》文中研究指明背景:急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）是指由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性呼吸衰竭。2017年国际上首次制定新生儿ARDS标准（蒙特勒标准）。由于新生儿生物学、病理生理学等特殊性,其发病机制仍不明。我们前期收集2014年1月1日～2017年7月30日925例呼吸窘迫早产儿临床资料,基于新生儿ARDS标准进行分组,发现与新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）相比,ARDS新生儿气管内滴入肺表面活性剂后氧合改善、临床症状好转,但很快病情反复,需要多次肺表面活性剂的使用。我们推测ARDS患儿体内存在使肺表面活性剂快速灭活的成份,阻断此活性成份,可有效改善ARDS患儿临床症状。研究表明分泌型磷脂酶A2（sPLA2）能够改变肺表面活性剂磷脂的组成、降低肺泡稳定性,且为多种炎性介质的限速酶。另外研究显示ARDS时炎症反应的失控与P38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导通路及核因子-κB（NF-κB）的激活密切相关。故本研究将通过体内外实验观察分泌型磷脂酶A2阻断剂（Varespladib）对ARDS新生大鼠肺表面活性剂中二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）、肺表面活性蛋白A（SP-A）、p38MAPK/NF-κB信号通路关键因子等表达的影响,探讨Varespladib对新生大鼠ARDS肺的保护作用及可能机制。方法:采用腹腔注射LPS构建新生儿ARDS模型,随机分成3组:对照组（38 只）、LPS 组（41 只）、LPS+sPLA2 阻断剂组（Varespladib）（40 只）。HPLC检测肺组织中DPPC含量;电子天平称量肺组织湿重,称重后干燥48h,称量干重,计算肺组织湿/干重比例;HE染色观察病理变化及计算肺组织损伤评分:ELISA检测各组血清中SP-A、IL-1、IL-4、TNF-a、sPLA2及肺泡灌洗液中SP-A表达。RT-PCR、WB检测肺组织中sPLA2、p38 MAPK及NF-κB信号通路关键因子（p38 MAPK、p-p38 MAPK,NF-κB p65、p-NF-κB p65）表达;体外LPS干预肺Ⅱ上皮细胞（A549）,随机分为5组:对照组、LPS组、LPS+Varespladib 组、LPS+Varespladib 组+p38 MAPK 激动剂（Anisomycin）组、LPS+Varespladib 组+NF-κB p65 激动剂（Betulinic acid）。通过 CCK8 检测各组细胞增殖情况,RT-PCR检测p38 MAPK、NF-κB p65mRNA的表达,WB检测p38 MAPK、p-p38MAPK（Thr180+Tyr182）,NF-κB p65,p-NF-κB p65（Ser536）蛋白表达。结果:LPS可减少新生大鼠肺组织中DPPC、SP-A表达及促进IL-1、IL-4、TNF-a、sPLA2等炎性因子的表达导致肺损伤;Varespladib可上调DPPC、SP-A的表达,抑制IL-1、IL-4、TNF-a、sPLA2炎性因子的表达,减轻肺损伤、降低死亡率（P<0.05）;LPS可显着上调新生大鼠肺组织中P38 MAPKmRNA、NF-κB P65mRNA表达和磷酸化蛋白/总蛋白比值（p-p38MAPK/p38MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65）（P<0.05）,促进其磷酸化（P<0.05）。Varespladib 可下调新生大鼠肺组织中P38 MAPK、NF-κB P65mRNA表达和磷酸化蛋白/总蛋白比值（P<0.05）,抑制 P38 MAPK 及 NF-κB P65 磷酸化（P<0.05）。LPS 促进肺 Ⅱ型上皮细胞系（A549）的贴壁生长、促进细胞异常增殖;LPS促进A549细胞中P38 MAPKmRNA、NF-κB P65mRNA和磷酸化蛋白/总蛋白比值增加（P<0.05）,促进其磷酸化（P<0.05）;Varespladib抑制肺Ⅱ型上皮细胞（A549）异常增殖、下调A549细胞中P38 MAPKmRNA、NF-κB P65mRNA和磷酸化蛋白/总蛋白比值（P<0.05）,抑制 P38 MAPK 及 NF-κB P65 磷酸化（P<0.05）。结论:sPLA2阻断剂通过减少肺表面活性物的降解,减少炎性因子的释放对ARDS新生大鼠肺起保护作用;sPLA2阻断剂可能通过阻断P38MAPK/NF-κB p65信号通路减少ARDS新生大鼠肺损伤。
江银玲[5]（2020）在《原花青素β2对百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制研究》文中研究指明研究背景与目的:急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）是常见的呼吸危重症,可由多种原因引起,其发生与发展过程复杂,发病机理尚未完全阐明。可能的机制包括氧化应激损伤、炎症因子风暴等损伤肺上皮细胞与微血管内皮细胞,引起肺血管通透性增加,大量含蛋白质的液体进入肺间质和肺泡腔,从而诱发顽固性呼吸衰竭。百草枯是一种常用的杂环除草剂,因其具有嗜肺性,中毒后主要引起急性呼吸窘迫综合征而具有较高的毒性,可用于制作ARDS动物模型,且百草枯中毒目前暂无有效解毒剂,故进一步深入探究其引起急性呼吸窘迫综合征的致病机制具有极大的临床价值。鉴于氧化损伤与炎症反应是引起百草枯的系列毒性反应的主要原因,我们设想抗氧化与抗炎治疗可有效防治百草枯引起的肺损伤。抗氧化应激损伤、减轻炎症反应也一直是这几年来ARDS治疗领域的研究热点。原花青素是具有很强抗氧化能力的天然提取物,其对于百草枯所致ARDS有无治疗作用及相关作用机理暂未见报道。本研究通过使用原花青素β2处理百草枯染毒大鼠ARDS模型观察其疗效,并探究其可能的机制。研究方法:1.ARDS模型的建立:通过腹腔注射百草枯染毒SD大鼠,观察动物一般情况及肺组织切片HE染色,确定成功制备ARDS动物模型。2.对氧化应激、肺血管通透性的影响:实验动物分为对照组（control组）,百草枯组（PQ组）,低剂量原花青素β2组（25mg/kg-PCβ2）,中等剂量原花青素β2组（50mg/kg-PCβ2）,高剂量原花青素β2组（100mg/kg-PCβ2）。处死大鼠后测定肺组织MDA、SOD、MPO等过氧化指标、肺湿干比及肺泡灌洗液中PMN。3.机制研究:Elisa法测定肺泡灌洗液中IL-1β、IL-18,RT-PCR法测定肺组织中IL-1β、IL-18 m RNA含量,western blot测定肺组织NLRP3炎性小体的表达。4.静默NLRP3基因,观察各组大鼠肺通透性、BALF中PMN的变化,测定肺组织中IL-1β、IL-18含量进一步探究NLRP3炎性小体在百草枯所致ARDS中的作用及原花青素β2发挥肺保护作用的机制。研究结果:1.大鼠一般情况:生理盐水组活泼强壮,食欲、反应均正常,活动敏捷,毛色均匀有光泽,呼吸平稳。造模组大鼠腹腔注射百草枯溶液30分钟-2小时左右即开始出现进食饮水减少、活动减少、反应迟钝、毛发竖起。72小时后精神萎靡、毛发蓬松、饮食欠佳、呼吸急促,口唇、肢端、鼠尾发绀明显,有的出现鼻腔、口腔出血,深大呼吸等。PCβ2组一般状况较PQ组有所改善,呈剂量依赖性。2.肺组织病理改变:对照组大鼠肺组织镜下肺泡结构清晰正常,肺泡腔清晰,肺泡壁结构无异常,肺泡间隔均匀一致,没有出血、坏死及炎症渗出。PQ组大鼠肺泡内皮细胞肿胀、毛细血管充血、肺泡腔内大量渗出、有大量炎性细胞浸润、肺泡壁明显增厚;PCβ2组肺组织内皮细胞肿胀、毛细血管充血、炎性细胞浸润均较PQ组减轻,且呈剂量依赖性。PQ组肺损伤评分显着高于空白对照组（P<0.001）,PCβ2组肺损伤评分较PQ组下降（P<0.05）,且呈剂量依赖性。3.肺湿干比计算:对照组大鼠未见明显肺水肿,PQ组大鼠肺含水量增加,肺水肿明显,肺湿干比明显高于对照组（P<0.001）,而PCβ2组大鼠肺含水量随剂量增加依次减轻,肺湿干比呈下降趋势,且呈剂量依赖性（P<0.05）。4.肺通透指数检测:PQ组肺通透指数显着高于对照组,P<0.001,PCβ2组肺通透指数明显下降,且随着给药剂量的增加,肺通透指数下降更明显,较PQ组变化均有统计学意义,但仍高于空白对照组。5.肺泡灌洗液PMN计数:PQ组BALF中PMN计数显着高于空白对照组,而PCβ2组BALF中PMN计数呈下降趋势,且呈剂量依赖性。6.氧化应激指标的变化:PQ组与PCβ2组较对照组MDA水平、MPO活性明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,MDA水平、MPO活性均有不同程度的下降。PQ组与PCβ2组较对照组SOD活性明显下降,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,SOD均有不同程度的上升。7.BALF中IL-1β、IL-18含量的变化:PQ组IL-1β、IL-18水平较对照组明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,IL-1β、IL-18含量均有不同程度的下降,且随着原花青素剂量的增加,IL-1β、IL-18含量均呈下降趋势。8.肺组织中IL-1β、IL-18 m RNA的变化:PQ组IL-1β、IL-18m RNA水平较对照组明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,IL-1β、IL-18 m RNA含量均有不同程度的下降,且随着原花青素剂量的增加,IL-1β、IL-18 m RNA含量均呈下降趋势。9.肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1水平的变化:PQ组NLRP3、ASC、caspase-1水平较对照组明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,NLRP3、ASC、caspase-1含量均有不同程度的下降,且呈剂量依赖性。10.静默NLRP3基因对肺组织及IL-1β、IL-18水平的影响:NLRP3基因静默组肺组织W/D、肺通透性及BALF中PMN较PQ组明显下降,其肺组织中IL-1β与IL-18的含量较PQ组明显下降（P<0.01）,PCβ2组IL-1β与IL-18的含量与基因静默组相仿,差异无统计学意义。NLRP3基因静默组大鼠IL-1β、IL-18较空白对照组明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）。研究结论:本实验通过腹腔注射百草枯成功建立ARDS模型,可用于ARDS的研究。原花青素β2可降低ARDS大鼠肺血管通透性,减轻肺水肿,降低BALF中PMN。其抗氧化作用可降低肺组织中MDA水平与MPO活性,上调SOD活性从而减轻肺损伤。静默NLRP3基因提示NLRP3炎性小体参与介导百草枯所致的ARDS。原花青素β2可通过抑制NLRP3炎性小体而下调IL-1β、IL-18的表达从而对百草枯所致ARDS起到一定的干预效果。
郭敏[6]（2020）在《炎性细胞因子表达水平在创伤性ARDS及肺部感染和胸部手术患者的差异性分析及临床预后》文中指出目的:探讨炎性细胞因子IL-6,IL-10,IFN-γ和TNF-α,IL-1β,IL-4,IL-8在创伤性ARDS患者和肺部感染及胸部手术患者外周血中表达水平差异性及相关性,并为临床治疗提供理论参考。方法:（1）选取2017年05月至2019年12月在我院重症医学科收治的94例创伤性ARDS患者作为实验组。根据患者病情严重程度并参考2012年柏林标准将入组患者划分为轻度组（A组）、中度组（B组）以及重度组（C组）。对比各组患者入院时的血气分析结果、病情最重时的APACHEⅡ评分水平和ICU入住时间;通过CT扫描观察3组患者肺部影像结果;采用ELISA检测方法,检测所有患者入院当天和治疗后第2、5、7天清晨空腹静脉血血清中IL-6、IL-10、IFN-γ的水平;（2）健康对照组（D组）:选择在同一时期在同一医院的健康查体的40名健康成人,采用ELISA检测方法,检测清晨空腹静脉血血清中IL-6、IL-10、IFN-γ的水平;（3）肺部感染患者组（E组）:选取2019年11月1日至2020年3月31日在我院呼吸与危重症医学科住院的肺部感染患者32例为平行对照组,采用流式细胞法对其入院第2天和治疗7天后分别进行细胞因子检测;（4）胸部手术患者组（F组）:选取同期住院的胸部手术患者24例,采用流式细胞法对术前和手术后2天分别进行细胞因子检测作为平行对照研究。结果:（1）比较实验组三组患者入院时的血气分析:pH、PO2和PCO2水平均存在统计学差异（P<0.05）。各组间比较表明,肺损伤程度越重,血清p H水平和动脉血氧分压越低,二氧化碳分压越高。对各组患者APACHEⅡ评分和ICU入住时间分析,提示随疾病程度增加,患者评分水平不断上升,ICU入住时间不断延长;（2）各组创伤性ARDS患者血清IL-6、IL-10和IFN-γ平均表达水平均高于健康对照组（P<0.05）;（3）各实验组患者血清IL-6表达水平比较:三组患者血清IL-6含量自创伤后开始增高,在第1～2天达到高峰,之后逐渐下降,C组较A、B组达峰时间更长,增高程度更高,差异具有明显统计学意义（P=0.000）;（4）各实验组患者血清IL-10表达水平分析:自创伤后血清IL-10含量开始增高,在第1～2天达到高峰,之后逐渐下降,C组较A、B组达峰时间更长,增高程度更高。但其在早期差异明显（P<0.05）,5天后差异无统计学意义（P>0.05）,提示在损伤后期血清IL-10表达水平与损伤程度无相关性;（5）各实验组患者血清IFN-γ表达水平分析:自创伤后血清IFN-γ含量开始增高,在第1天即达到高峰,之后逐渐下降。病情越重,增高程度越大,差异具有明显统计学意义（P=0.000）;（6）对各实验组患者血清中IL-6、IL-10、IFN-γ的浓度与病情严重程度（APACHE II）行相关性分析,均呈正相关（均P<0.05）;（7）各实验组肺部CT影像:A组患者CT影像提示肺组织密度较正常组织无明显改变,B组患者CT影像表现为双肺透过性减低,部分肺叶可见多发斑片状磨玻璃状密度影,C组患者影像提示斑片状磨玻璃影范围较B组增大,可有合并肺不张或血气胸。（8）E组患者治疗前后细胞因子表达水平结果:血IL-1β,IL-4,IL-6,IFN-γ在肺部感染性疾病患者中,治疗7天前后表达水平没有差异性（P>0.05）,而IL-8,IL-10和TNF-α表达水平差异具有统计学意义（P<0.05）。（9）F组患者手术前后细胞因子表达水平:肺部创伤手术患者术前与术后第2天血IL-6,IL-8,IL-10,IFN-γ和TNF-α的表达水平具有差异性（P<0.05）,而IL-1β,IL-4表达水平无差异性（P>0.05）。结论:（1）IL-6、IL-10、IFN-γ在创伤性ARDS患者血清中的表达水平较健康对照组升高,且在不同程度的创伤性ARDS患者的血清中表达量不同;通过联合检测各项炎症因子水平,对创伤性ARDS的早期诊断及严重程度的评估具有重要的临床意义。（2）细胞因子IL-8,IL-10和TNF-α表达水平可以预测肺部感染性疾病患者治疗效果,而IL-6,IL-8,IL-10,IFN-γ和TNF-α表达水平可以评估胸外科创伤手术后患者疗效和指导用药。
张仕娜[7]（2020）在《升陷汤加味对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）后期呼吸机依赖肺肾气虚患者的影响》文中提出目的研究升陷汤加味对急性呼吸窘迫综合征后期呼吸机依赖肺肾气虚患者的影响。方法将64例符合急性呼吸窘迫综合征后期呼吸机依赖,中医证属肺肾气虚患者,按照随机平行分组法分为治疗组与对照组,其中治疗组32例,对照组32例;治疗上,对照组给予西医基础治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用中药汤剂“升陷汤加味”治疗,每日1剂,分早晚2次服用。疗程均为2周,比较两感染相关指标、血气分析指标、APACHE II评分、氧合指数、中医证候总有效率、中医证候积分改善情况、撤机成功例数、撤机成功率及平均有创机械通气时长改善情况。结果经2周的观察治疗,治疗组与对照组WBC、PCT、CRP治疗前后组间组内P均<0.05,有明显差异,治疗组较对照组改善明显;两组患者PH值、PO2、氧合指数（Pa O2/Fi O2）、APACHE II评分治疗前后有明显差异,组间比较P均<0.05,有明显差异,治疗组明显优于对照组;但治疗后两组PCO2经统计学处理,P>0.05,无统计学意义;两组平均机械通气时间比较P<0.05,治疗组明显短于对照组;两组患者撤机成功例数组间比较P<0.05,有明显差异,治疗组撤机成功率高于对照组;两组间比较,中医证候治疗总有效率治疗组大于对照组,组间P<0.05,有明显差异,治疗组优于对照组;两组中医证候积分比较P<0.05,治疗组明显小于对照组;两组间中医证候疗效比较P<0.05,有统计学意义,治疗组优于对照组。结论经过本研究发现,运用升陷汤加味治疗急性呼吸窘迫综合征,可有效改善患者WBC、PCT、CRP、APACHE II评分、PH值、PO2、Fi O2/PO2等指标,能降低患者机械通气时间,提高撤机成功率,有效降低患者中医证候积分,提高中医证候疗效,改善患者临床症状,值得临床进一步推广应用。
郭婷婷[8]（2020）在《香兰素对LPS诱导急性肺损伤的预保护作用机制研究》文中认为背景:急性肺损伤（ALI）/急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是一种严重的呼吸系统疾病,可引起严重的肺部炎症,破坏肺泡毛细血管膜细胞,并导致严重的急性呼吸衰竭,具有极高的死亡率。最新爆发的新型冠状病毒肺炎也属于一种病毒感染诱发的急性肺损伤。目前在临床上还未存在有特异性的分子标志物,这为其诊断和治疗提供了一定的难度。治疗上通常采用机械通气的方法,但只是支持性的治疗,且容易引起如气压伤、循环紊乱等医源性的并发症,治疗的重点还是要针对疾病的根本原因。目前还未有效果显着的药物应用于临床,对于急性肺损伤的药物研究也成为热点,但诸如糖皮质激素、沙丁胺醇等药物的应用并不能得到临床实验的支持,且存在一定的毒副作用,因此寻找有效的、经济的且毒副作用小的治疗急性ALI/ARDS的药物迫在眉睫。当ARDS发生时,肺部往往表现出强烈的炎症反应,并伴有大量的炎性细胞浸润,导致肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）、IL-6等促炎因子的释放。脂多糖（LPS）是已知的诱发各种器官,如肠、神经和乳腺等产生炎症反应的刺激物。目前,通过LPS刺激产生气道炎症来建立ALI动物模型的技术已被研究者普遍接受。以前的研究表明脂多糖刺激肺组织后促进大量炎症细胞和中性粒细胞的浸润,释放相关促炎介质,影响多种炎症通路。氧化还原体内平衡是由氧化剂和自由基平衡来维持的,特别是活性氧（ROS）和内源性抗氧化系统的清除能力。然而,接触有害刺激后,过多活性氧的产生可能会削弱细胞的抗氧化能力,对包括DNA、脂质和蛋白质在内的细胞成分产生毒性,加剧了氧化负担进而导致氧化应激。越来越多的证据表明氧化应激参与多种疾病的发病机制,如动脉粥样硬化、糖尿病、癌变,气道紊乱。潜在的抗氧化途径可以被内源性或外源性化合物调节,可能成为解决ALI的治疗目标。香兰素是一种天然产物,在自然界中广泛存在,常在香英兰豆、香茅,丁香花蕾、甜菜根、苏合香脂等一些天然物质中存在,常用于香料、化妆品或食物的香精中。人类用香英兰豆来获取天然香兰素的历史接近500年。我们惊喜地发现相关研究表明香兰素具有抗炎、抗氧化、抗诱变及抗肿瘤的药理作用,这为我们研制ALI/ARDS的临床药物提供了突破口。因此我们选用香兰素为研究对象,从炎症反应和氧化应激两个方面入手,探究其对急性肺损伤发挥预保护作用的分子机制。我们将从体内及体外实验探究在急性肺损伤过程中香兰素对ERK、p38、AKT及NF-κB的调节方式极其与炎性因子的关系。以支气管上皮细胞为对象模拟急性肺损伤时对细胞造成的氧化损伤,验证香兰对氧化因子及ROS调节的具体分子机制,为香兰素应用于ALI/ARDS的治疗提供科学依据,方法与内容:1.香兰素在急性肺损伤中发挥抗炎作用的研究（1）构建急性肺损伤动物模型,使用HE染色评估小鼠肺组织的损伤程度;MPO检测中性粒细胞浸润程度,使用ELISA方法评估炎性因子IL-6,IL-1β,TNF-α的蛋白表达水平;western blot方法检测ERK、p38、AKT及NF-κB的蛋白水平的表达。（2）体外实验验证香兰素发挥预保护作用的分子机制。CCK8实验选取合适的细胞给药浓度,ELISA方法评估炎性因子IL-6,TNF-α的蛋白表达水平;western blot方法检测ERK、p38、AKT及NF-κB的蛋白水平的表达。2.香兰素在急性肺损伤中发挥抗氧化作用的研究（1）在体外实验中ELISA方法检测小鼠肺组织的总抗氧化能力FRAP,ROS,SOD,GSH,CAT和MDA的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测相关细胞保护基因HO-1,GCLM,GCLC和NQO1基因水平的表达,western blot方法检测Nrf2,N-Nrf2,p AMPK,H3K9/14,HO-1蛋白水平的表达。（2）体内实验:CCK8实验方法选择香兰素预保护支气管上皮细胞的最适浓度;细胞免疫荧光实验分析香兰素对Nrf2入核情况及核内H3K9/14乙酰化水平的影响;之后western blot方法检测香兰素对支气管上皮细胞内Nrf2,N-Nrf2,p-AMPK蛋白水平表达的影响;实时荧光定量PCR检测相关氧化酶HO-1,GCLM,GCLC和NQO1基因水平的表达;双荧光素酶报告基因检测NRF2与ARE启动子的结合情况;实时荧光定量PCR检测相关氧化酶HO-1,GCLM,GCLC和NQO1基因水平的表达;使用AMPK通路阻滞剂CC后western blot方法检测Nrf2,N-Nrf2,p-AMPK蛋白水平的表达;使用组蛋白乙酰化酶抑制剂AA后实时荧光定量PCR检测相关氧化酶HO-1,GCLM,GCLC和NQO1基因水平的表达;模拟急性肺损伤的环境,使用CCK8的实验方法测量细胞活性选取最合适的刺激物配比;使用Nrf2抑制剂后使用ELISA方法检测小鼠肺组织的总抗氧化能力FRAP,ROS,SOD,GSH,CAT和MDA的蛋白表达水平;western blot方法检测Nrf2,p-AMPK,H3K9/14蛋白水平的表达;实时荧光定量PCR检测相关氧化酶HO-1,GCLM,GCLC和NQO1基因水平的表达。结果:1.成功构建小鼠ALI模型,香兰素可以抑制LPS诱导产生的急性肺损伤的肺组织损伤程度;相比于LPS组,香兰素+LPS组的MPO水平明显降低,IL-6,IL-1β,TNF-α的蛋白表达水平也显着降低;香兰素能够上调小鼠肺组织ERK、p38、AKT及NF-κB的蛋白水平。2.香兰素能够使巨噬细胞分泌的炎性因子IL-6,TNF-α表达下调,促进巨噬细胞内ERK、p38、AKT及NF-κB的蛋白表达。3.相比于LPS组,香兰素+LPS组小鼠肺组织内的总抗氧化能力FRAP,SOD,GSH和CAT的蛋白表达水平明显增高,ROS及MDA的表达水平降低,相关细胞保护基因HO-1,GCLM,GCLC和NQO1的转录水平增高,Nrf2,N-Nrf2,p-AMPK,H3K9/14,HO-1的蛋白表达水平增高。4.香兰素能够增加支气管上皮细胞内Nrf2的核积累及H3K9/14的乙酰化水平,且随时间的延长增多;香兰素能够促进支气管上皮细胞内Nrf2,N-Nrf2,p-AMPK蛋白水平表达,并促进Nrf2与ARE启动子的结合,进而提高下游细胞保护基因HO-1,GCLM,GCLC和NQO1的转录水平;使用AMPK抑制剂后,香兰素对p-AMPK及Nrf2、N-Nrf2的上调受到抑制;使用组蛋白乙酰化酶抑制剂AA后,香兰素对HO-1,GCLM,GCLC和NQO1转录水平的上调受到抑制;相比于氧化损伤组细胞,加入香兰素再刺激细胞损伤后细胞的总抗氧化能力FRAP,SOD,GSH和CAT的蛋白表达水平明显增高,ROS及MDA的表达水平降低,Nrf2抑制剂组则削弱了香兰素对FRAP,SOD,GSH,CAT,ROS及MDA的影响;对比与氧化损伤的细胞,加入香兰素后支气管上皮细胞内HO-1,GCLM,GCLC和NQO1的转录水平增高,Nrf2,N-Nrf2,p-AMPK,乙酰化H3K9/14,HO-1的蛋白表达水平增高。结论:1.香兰素能够对急性肺损伤发挥预保护作用,且通过对ERK、p38、AKT及NF-κB的调节来降低炎症因子的蛋白表达水平,从而减轻炎症。2.香兰素能够增强肺组织及细胞的总抗氧化能力,增强相关抗氧化酶的表达,上调相关细胞保护基因的转录水平进而发挥其抗氧化作用。3.香兰素是通过AMPK通路来激活Nrf2的,同时促进Nrf2核积累以及核内H3K9/14乙酰化,增加Nrf2与其下游ARE启动子的结合从而增高相关细胞保护基因的转录水平,并最终增强相关抗氧化酶的蛋白表达,减少ROS的分泌发挥其抗氧化作用。综上所述,我们的实验结果证实了香兰素对急性肺损伤的预保护作用,其发挥作用的途径是抗炎和抗氧化两个方面,炎症反应与氧化应激的相互作用仍需要进一步探讨。炎症反应和氧化应激作为急性肺损伤的两个重要机制,可能成为治疗ALI/ARDS药物研究的新方向,同时我们为香兰素作为ALI临床治疗的候选提供了科学的理论依据。
张松[9]（2020）在《中西医综合方案治疗ARDS的多中心，前瞻性，随机对照及动物实验研究》文中研究表明目的:评价复苏合剂联合西医综合方案治疗急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者的临床疗效,同时研究复苏合剂对ARDS大鼠肺泡细胞及炎性因子的影响。为中医药在ARDS的临床诊疗中提供科学的试验依据,用客观数据验证中医药治疗ARDS的疗效,同时也提高中医药在治疗ARDS中的参与度。方法:选取成都中医药大学附属医院、眉山市中医医院、内江市第二人民医院和遂宁市中医医院重症医学科2018年8月-2019年12月间收治符合纳入标准的ARDS患者105例。使用计算机生成随机数字表,按照随机数字表法分为对照组53例,治疗组52例。两组同时予西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗基础上加复苏合剂（制附子30克、砂仁15克、龟板30克、麻黄10克、干姜10克、甘草12克,以上药物加工为超微细粉,每次20g,每日三次,鼻饲或者口服）,对照组给予等量的安慰剂（成都中医药大学附属医院药剂科提供）。两组疗程均为14天。收集两组患者28天病死率,90天死亡率,ICU住院时间,中医疗效评价、中医证候评分、呼吸机参数、氧合、APACHEⅡ评分、呼吸机使用情况、抗生素使用与院内感染情况等,并观察两组患者在治疗过程中出现的不良反应。采用SPSS25.0统计软件进行数据分析,评价其临床疗效及安全性。以内毒素（LPS）诱导ARDS小鼠模型,造模成功后,设空白组、模型组、治疗低剂量组、治疗高剂量组,除空白组外,其余组别予以复苏合剂进行7天的干预,通过组织病理检测不同组别小鼠的肺泡I型和II型上皮细胞的数量和形态,免疫组化检测肺泡上皮细胞中标记蛋白AQP-5、SP-C、DLK1、Notch水平,各组脓毒症小鼠炎性指标检测:Elisa检测各组小鼠血清IL-6、TNF-α。明确复苏合剂对于小鼠I型和II型肺泡上皮细胞增殖的良性干预效应和细胞因子水平变化。结果:1、一般资料比较共纳入105例患者,入组治疗组53例,男性26例（49.06%）,女性27例（50.94%）,中位年龄为62.00岁;对照组男性31例（59.62%）,女性21例（40.38%）,中位年龄为58.00岁。在对治疗组和对照组患者的年龄、性别、疾病严重程度,导致ARDS的诱因,基础疾病构成,入院时的生命体征和氧合,初始的中医证候评分和APACHEⅡ评分,初始带机方式及呼吸机参数,两组患者均无显着差异（P>0.05）。2. 主要结局指标在治疗28天后,治疗组28天病死率为,对照组28天病死率为,差异有统计学意义（HR:0.502,95%CI:0.259-0.970,P=0.035<0.05）。随访90天,治疗组死亡率为32.08%,对照组死亡率为55.77%,两组患者比较,差异有统计学意义（P<0.05）。3. 次要结局指标在治疗第一周后,两组患者在APACHEⅡ评分、PEEP、Pa O2/Fi O2等方面均有改善,且两组间比较,差异具有统计学意义（均P<0.05）。在治疗第二周后,两组患者在中医证候评分、APACHEⅡ评分、Pa O2/Fi O2等方面均有改善,且两组间比较,差异具有统计学意义（均P<0.05）。在中医疗效评价方面,两组患者的中医疗效比较,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组总有效率为79.25%,对照组总有效率为61.54%,两组患者总有效率比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。在机械通气时间方面,治疗组中位时间为114.00h,对照组中位时间为210.75h,两组患者比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。在ICU住院时间方面,治疗组中位时间为182.00h,对照组为328.00h,两组患者比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。4. 激素使用与院感发生情况比较对照组比治疗组患者使用了更长时间和更大剂量的激素治疗（7.00d vs.3.50d,480.00mg vs.180.00mg,P<0.05）。治疗组有8例（15.38%）患者发生院感,其中发生VAP的有7例（13.21%）;对照组有11例（20.00%）患者发生院感,其中发生VAP的有9例（17.31%）,两组患者院内感染率比较,差异无统计学意义（x2=1.362,P=1.00>0.05）。5. 不良反应与安全性治疗组和对照组中分别有5例和3例患者出现恶心症状、10例和4例患者出现呕吐症状、8例和10例患者出现腹泻症状,两组患者不良反应比较无统计学意义（均P>0.05）,提示临床使用复苏合剂具有较好的安全性。6. 实验研究模型组干预后,与空白组及模型组比较,SP-C,AQP-5和notch蛋白表达明显增加;模型组的TNF-α及IL-6较空白组明显升高,复苏合剂干预后IL-6无明显变化,但TNF-α下降明显。SP-C、AQP-5和Notch蛋白显着均高于空白组织染色评分（P<0.01）,有明显统计学意义;且干预组SP-C、AQP-5和Notch蛋白表达均高于模型组,有统计学意义（P<0.05）。SP-C、AQP-5和Notch蛋白表达从“空白组→模型组→干预组”逐渐增加,且各组间比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论:临床研究表明:中西医综合方案能降低急性呼吸窘迫综合征患者28天病死率和90天病死率,与对照组相比在中医证候积分、APACHEⅡ评分、PEEP和Pa O2/Fi O2、呼吸机使用时间、ICU住院时间、氧合方面,疗效优于对照组。动物实验表明:复苏合剂可以促进Ⅰ型、Ⅱ型肺泡上皮细胞增生,且与Notch蛋白相关;能降低TNF-α水平,具有良好的肺保护作用。
姜茗宸[10]（2021）在《清肺口服液类黄酮组分调控ALI小鼠AM能量代谢机制研究》文中指出目的:通过系统整理中医药防治小儿肺炎疾病文献,探索现代医师对小儿肺炎疾病用药规律,为类黄酮治疗肺部炎症疾病提供依据;基于网络药理学方法研究清肺类黄酮组分的主要活性成分改善急性肺损伤（acute lung injury,ALI）潜在作用靶标;研究清肺口服液中类黄酮组分改善脂多糖（LPS）导致的小鼠急性肺损伤作用效果及机制,从清肺类黄酮组分不同剂量调节小鼠RAW264.7巨噬细胞（alveolar macrophage,AM）能量代谢角度及调节线粒体功能介导的肺部炎症的角度进行研究,评价清肺类黄酮低剂量对LPS刺激的RAW 264.7巨噬细胞能量代谢的影响,探讨清肺类黄酮高剂量对RAW 264.7巨噬细胞能量代谢的影响以及清肺类黄酮高剂量诱导的IFN-β与炎症和线粒体之间的关联。为优化中药复方以及治疗ALI提出可靠的理论依据。方法:基于数据挖掘探讨小儿肺炎用药规律:检索自建库以来至2020年4月中国知网、万方医学收录的中医药治疗小儿肺炎的相关文献为研究来源,根据已经制定好的检索策略,统一检索后同时联合手工检索,进一步人工筛选中医药相关治疗参考文献并从原文中提取治疗方药进行分析。清肺口服液中与类黄酮组分定性,定性检测方法:基于梯度乙醇提取清肺类黄酮组分分析结果,将相同的混合标准品和院内制剂清肺口服液进行比对,通过混合标准品进行核对定性分析清肺口服液类黄酮成分,使用Aquity H-Clas型超高效液相色谱仪联合LTQ Orbitrap XLETD型液相色谱质谱联用仪,以AQUITY UPLC HSS T3色谱柱,正负离子模式切换扫描模式采集,应用电喷雾离子源（HESI）定性鉴定目标化合物。清肺类黄酮组分治疗ALI网络药理学分析:使用PubChem获取化合物的SDF格式文件及其对应的SMILES结构。将前期鉴定出的类黄酮化合物的SDF文件、SMILES结构导入Swiss Target Prediction数据库、SEA数据库,筛选、取并集得到预测靶点。通过UniProt数据库对获得的靶点信息进行规范统一。再利用Genecards、DisGeNET、TTD数据库获得ALI疾病靶点,STRING平台以及Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病相互作用网络,最后DAVID 6.8数据库进行GO分析和KEGG通路富集研究分析。在体实验研究:通过LPS气道滴注诱发小鼠ALI模型,造模前1 h对清肺类黄酮低、高剂量组进行灌胃给药,同时使用地塞米松作为阳性对照,感染6 h后对小鼠进行肺部病理检测以及干/湿重比评价。通过ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6以及SOD、MDA、MPO水平,利用细胞计数器对肺泡灌洗液中的细胞进行分类,评价清肺类黄酮低剂量和高剂量对于ALI小鼠肺部炎症反应。通过非靶标蛋白质组学以及非靶标代谢组学联合分析,探讨不同剂量清肺类黄酮对于ALI小鼠模型的作用机制,用qPCR分别检测清肺类黄酮低剂量和高剂量对肺部IFN-β以及IFN-α、IFN-β mRNA水平。体外实验研究:清肺类黄酮低剂量作用于LPS刺激的RAW 264.7巨噬细胞12 h,通过靶标代谢组学技术,检测RAW 264.7巨噬细胞糖代谢、TCA相关的代谢产物水平,通过qPCR分析细胞炎症因子、氧化应激相关因子以及细胞线粒体相关蛋白。将清肺类黄酮高剂量以及清肺类黄酮高剂量伴随IFN-β Ab直接作用于RAW 264.7巨噬细胞24 h,通过靶标代谢组学技术,检测清肺类黄酮高剂量作用后的RAW 264.7巨噬细胞的糖代谢、TCA相关代谢产物水平。结果:1.对265首方剂进行频数分析,使用频次15次以上的中药共计30味。用药使用频次排名前10位的是黄芩、金银花、连翘、甘草、杏仁、炙麻黄、山羊角、熊胆粉、生石膏、川贝母。关联规则可以挖掘隐藏在数据间的相互关系。设置支持度0.23,置信度0.13,得到治疗小儿细菌性肺炎的中药组合共30个。采用K-均值聚类法对265首方剂中涉及到的所有药物进行聚类分析,得出7组治疗小儿细菌性肺炎的核心组合新方剂。2.在清肺口服液中负离子模式鉴定出6种化合物,正离子模式鉴定出28种化合物,共鉴定出34种化合物。3.82种类黄酮共挖掘靶标242个,得到与急性肺损伤共同靶点73个,排名前5的靶点为血管内皮生长因子（VEGFA）、白细胞介素6（IL-6）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT1）、表皮生长因子受体（EGFR）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等,靶标功能富集结果显示清肺类黄酮组份治疗ALI作用机制主要与HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路等途径相关。4.肺病理结果显示,ALI小鼠肺组织具有严重的肺泡组织周边水肿伴随着显着浸润的炎症细胞。ELISA检测结果显示类黄酮低剂量能够有效降低IL-6、IL-1β以及TNF-α,以及改善SOD、MDA、MPO水平,清肺类黄酮高剂量对于肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α无明显改善作用,对SOD、MDA、MPO水平并无明显改善。5.非靶标蛋白组学分析清肺类黄酮低/高剂量对于ALI小鼠模型的作用机制,显着性富集分析发现作用蛋白主要活性以“粒细胞趋化性”、“中性粒细胞迁移”为主,而清肺类黄酮高剂量的显着性富集分析发现作用蛋白主要活性以“对干扰素β的反应”为主。非靶标代谢组分分析清肺类黄酮低/高剂量对于ALI小鼠模型的作用机制,经差异代谢物分析得到相关代谢通路,清肺类黄酮低剂量干预ALI小鼠涉及到的代谢通路为丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,D-谷氨酰胺与D-谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙酮酸代谢,而清肺类黄酮高剂量干预ALI小鼠涉及到的代谢通路为丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,丙酮酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、糖酵解/糖异生、柠檬酸循环（TCA循环）。与清肺类黄酮低剂量组比,清肺类黄酮高剂量组的肺组织中IFN-α、IFN-β mRNA上调十分明显。6.靶标代谢组学技术检测结果显示,清肺类黄酮低剂量作用于LPS刺激的RAW 264.7巨噬细胞12 h后可以改善细胞能量代谢,减少琥珀酸、柠檬酸累积,降低HIF-1α进而减少IL-1β以及其他炎症因子的释放,缓解线粒体损伤,上调抗炎因子水平。靶标代谢组学技术检测结果显示,清肺类黄酮高剂量以及清肺类黄酮高剂量伴随IFN-β Ab直接作用于RAW 264.7巨噬细胞24 h,清肺类黄酮高剂量组增加巨噬细胞能量代谢紊乱,降低了IDH,使柠檬酸累积,IFN-β Ab对IFN-β抑制后,可以调节清肺类黄酮高剂量组所造成的巨噬细胞能量代谢紊乱,上调IDH水平,减少柠檬酸累积。结论:（1）现代医师治疗小儿细菌性肺炎的中药中整体来看,常用（频次较高）的药物中都有富含类黄酮成分,且药物大多性味苦寒。（2）利用Aquity H-Clas联合LTQ Orbitrap XL ETD技术,使用标准品比对可准确地定性分析清肺口服液中的以类黄酮为主的34种化合物。（3）通过网络药理学研究方法,获得清肺口服液类黄酮组分治疗ALI的作用机制主要与HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路等多途径相关,证实了中药化合物具有多靶点、多途径的治疗特点。（4）每只C57BL/6小鼠通过气道滴注可引起十分显着的肺组织炎症反应和病理损伤;清肺类黄酮低剂量对于肺部病理、炎症及氧化应激的改善作用均优于清肺类黄酮高剂量组。（5）清肺类黄酮低剂量和清肺类黄酮高剂量对ALI小鼠模型产生作用的蛋白主要活性不同,类黄酮低剂量侧重“粒细胞趋化性”、“中性粒细胞迁移”,类黄酮高剂量侧重“对干扰素β的反应”,同样清肺类黄酮低剂量和清肺类黄酮高剂量对ALI小鼠模型作用的代谢通路也有所不同,清肺类黄酮高剂量比低剂量更侧重于糖酵解/糖异生以及柠檬酸循环（TCA循环）。另外清肺类黄酮高剂量能诱导小鼠肺组织中产生更多的IFN-β。（6）清肺类黄酮高剂量（0.128 mg/ml）长时间（24 h）对RAW264.7巨噬细胞产生和其最初截然相反的减低细胞活性作用;清肺类黄酮低剂量（0.032 mg/ml）对RAW 264.7巨噬细胞活性能维持在稳定状态（24 h）;清肺类黄酮低剂量可以通过降低琥珀酸、柠檬酸等TCA循环,可以改善LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞能量代谢,巨噬细胞线粒体功能,且通过减少琥珀酸累积,降低HIF-1α水平,下调细胞分泌的炎症因子以及缓解氧化应激反应。清肺类黄酮高剂量诱导过度的IFN-β几乎阻断了异柠檬酸脱氢酶（Isocitrate dehydrogenas,IDH）的产生,导致柠檬酸累积,是致使RAW 264.7巨噬细胞能量代谢紊乱原因之一。
二、糖皮质激素改善ARDS缺氧与休克的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、糖皮质激素改善ARDS缺氧与休克的实验研究（论文提纲范文）
（1）3种刺激性气体中毒临床治疗现状（论文提纲范文）
| 1 氯气中毒与治疗 |
| 1.1 短程大剂量地塞米松联合山莨菪碱 |
| 1.2 维生素B6联合20AA复合氨基酸 |
| 1.3 柴黄参祛毒固本汤 |
| 1.4 ECMO与氯气中毒 |
| 2 氮氧化物气体中毒与治疗 |
| 2.1 糖皮质激素联合莨菪类药物 |
| 2.2 20AA复合氨基酸联合维生素B6 |
| 2.3 氧疗 |
| 2.4 ECMO |
| 2.5 小剂量美蓝及大剂量维生素C |
| 3 光气中毒与治疗 |
| 3.1 早期足量糖皮质激素治疗 |
| 3.2 L-精氨酸治疗光气中毒致肺损伤 |
| 3.3 ECMO联合CRRT治疗 |
| 3.4 干细胞治疗 |
| 4 结语与展望 |
（2）机械通气治疗新生儿重症胎粪吸入综合征预后的危险因素分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 A 英文缩略词表 |
| 附录 B 机械通气治疗重症 MAS 患儿观察指标记录表 |
| 附录 C 个人简历 |
| 附录 D 综述 胎粪吸入综合征相关问题研究进展 |
| 参考文献 |
（3）冷诱导RNA结含蛋白在重症急性胰腺炎相关性肺损伤发病机制中的作用及大黄素干预的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分:CIRP 在 SAP 大鼠模型中的表达及其在 APALI 发病机制中的作用和大黄素干预的研究 |
| (一)引言 |
| (二)材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 药物配制 |
| 2.2 实验动物分组及模型制备 |
| 2.3 采集样本 |
| 2.4 苏木精-伊红(Hematoxylin & Eosin, HE)染色 |
| 2.5 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)检测血清 CIRP、淀粉酶(amylase)、IL-1β 水平 |
| 2.6 免疫组化检测 CIRP 及 Ly6G 的表达 |
| 2.7 免疫荧光法(Immunofluoresence, IF)实验步骤 |
| 2.8 Western blot法实验步骤 |
| 2.9 Quantitative Real-time PCR (qRT-RCR) 法实验步骤 |
| 2.10 统计学方法 |
| (三)结果 |
| 3.1 各组大鼠一般状态的比较 |
| 3.2 各组大鼠胰腺及肺组织的病理学观察结果 |
| 3.3 各组大鼠肺功能的变化 |
| 3.4 各组大鼠血清中的淀粉酶、IL-1β 及CIRP水平的变化 |
| 3.5 各组大鼠胰腺和肺组织中 CIRP mRNA 的表达 |
| 3.6 各组大鼠胰腺和肺组织中CIRP蛋白的表达 |
| 3.7 免疫组化观察各组大鼠胰腺及肺组织中CIRP的表达 |
| 3.8 免疫荧光观察各组大鼠胰岛中CIRP的表达 |
| 3.9 各组大鼠肺组织内NF-κB p65 和IKBα 磷酸化水平的比较 |
| 3.10 各组大鼠肺组织内 NLRP3 及 IL-1β mRNA 的表达 |
| 3.11 各组大鼠肺组织内 NLRP3 炎性小体的组装与活化水平 |
| 3.12 各组大鼠肺组织中 CXCL1 表达水平的比较 |
| 3.13 各组大鼠肺内中性粒细胞的浸润的比较 |
| (四)讨论 |
| (五)小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分:CIRP 对 NR8383 细胞 NF-κB 及 NLRP3/IL-1β/CXCL1信号通路的影响及大黄素干预的实验研究 |
| (一)引言 |
| (二)材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 试剂准备 |
| 2.2 细胞的复苏 |
| 2.3 细胞培养条件 |
| 2.4 细胞的传代 |
| 2.5 细胞的冻存 |
| 2.6 CCK8 实验检测大黄素的细胞毒性 |
| 2.7 细胞的分组及处理 |
| 2.8 流式细胞术检测细胞焦亡 |
| 2.9 siRNA瞬时转染 |
| 2.10 Western blot分析 |
| 2.11 Quantitative Real-time PCR (qRT-PCR) |
| 2.12 统计学方法 |
| (三)结果 |
| 3.1 大黄素对 NR8383 细胞增殖活性的影响 |
| 3.2 各组NR8383 细胞NF-κB p65 和IKBα 磷酸化水平的的比较 |
| 3.3 各组NR8383 细胞的NLRP3 和IL-1β mRNA的表达水平 |
| 3.4 各组 NR8083 细胞内 NLRP3 炎性小体的组装与活化水平 |
| 3.5 各组NR8383 细胞焦亡率的比较 |
| 3.6 各组NR8383 细胞的CXCL1 的表达水平比较 |
| 3.7 RNA 干扰 IL-1β 对 CIRP 诱导 NR8383 细胞 CXCL1 表达的影响 |
| 3.8 IL-1β 促进NR8383 细胞表达CXCL1 的剂量和时间依赖性关系 |
| (四)讨论 |
| (五)小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 本研究存在的不足与展望 |
| 综述 冷诱导 RNA 结合蛋白(Cold-inducible RNA binding protein)在炎症性疾病中作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（4）分泌型磷脂酶A2阻断剂通过减少肺表面活性剂降解对脂多糖致新生大鼠ARDS肺损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分: 外源性肺表面活性剂在新生儿ARDS中的疗效观察 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分: 分泌型磷脂酶A2阻断剂对新生大鼠ARDS肺损伤作用的体内实验研究 |
| 1 实验材料及方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分: 分泌型磷脂酶A2阻断剂在新生大鼠ARDS肺损伤中保护作用的体外实验 |
| 1 实验材料及方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 分泌型磷脂酶A2及其在ARDS中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 中英文缩写简要 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（5）原花青素β2对百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 百草枯所致ARDS模型的建立及原花青素β2的干预作用 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 动物及材料 |
| 2.2 实验动物分组及处理 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 大鼠一般情况监测 |
| 3.2 肺组织大体观察 |
| 3.3 肺湿干比 |
| 3.4 各组大鼠肺通透指数的改变 |
| 3.5 各组大鼠肺组织及肺泡灌洗液中炎症细胞的变化 |
| 3.6 肺组织病理学观察及肺损伤评分 |
| 4 讨论 |
| 4.1 ARDS模型的建立与评价 |
| 4.2 百草枯与ARDS |
| 4.3 原花青素β2对肺通透性的影响 |
| 4.4 原花青素β2对炎症反应的影响 |
| 4.5 原花青素β2对百草枯所致ARDS的治疗作用 |
| 5 结论 |
| 第二部分 原花青素β2改善百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的机制研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验药品与试剂 |
| 2.2 溶液配制 |
| 2.3 实验仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 原花青素β2对百草枯所致中性粒细胞炎症和氧化应激的影响 |
| 3.2 原花青素对百草枯中毒大鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-18含量的影响 |
| 3.3 原花青素对百草枯中毒大鼠肺组织中IL-1β、IL-18 mRNA的影响 |
| 3.4 原花青素对百草枯中毒大鼠肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1水平的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 氧化应激与ARDS |
| 4.2 原花青素β2通过抗氧化应激作用减轻肺损伤 |
| 4.3 NLRP3炎性小体与ARDS |
| 4.4 IL-1β与ARDS |
| 4.5 IL-18与ARDS |
| 5 结论 |
| 第三部分 NLRP3炎性小体在百草枯所致急性呼吸窘迫综合征中的作用研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料与动物分组 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 静默NLRP3基因对大鼠一般状况的影响 |
| 3.2 静默NLRP3基因对肺湿干比的影响 |
| 3.3 静默NLRP3基因对肺通透性的影响 |
| 3.4 静默NLRP3基因对肺泡灌洗液PMN的影响 |
| 3.5 静默NLRP3基因对肺组织中IL-1β与IL-18的表达情况的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本课题的创新点与局限性 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 急性呼吸窘迫综合征发病机制及治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
（6）炎性细胞因子表达水平在创伤性ARDS及肺部感染和胸部手术患者的差异性分析及临床预后（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 血清IL-6、IL-10、IFN-γ与创伤性ARDS差异性及相关性 |
| 资料与方法 |
| 1、一般资料 |
| 2、方法 |
| 3、疗效观察 |
| 4、统计学方法 |
| 结果 |
| 1、临床指标监测结果 |
| 2、影像学结果 |
| 3、各组患者血清中炎症因子IL-6、IL-10、IFN-的表达水平与健康对照组比较 |
| 4、各组患者血清中IL-6的表达情况 |
| 5、各组患者血清中IL-10的表达情况 |
| 6、各组患者血清中IFN-γ的表达情况 |
| 7、血清中IL-6、IL-10、IFN-γ水平与病情严重程度的相关性分析 |
| 第二部分 炎性细胞因子IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和IFN-γ与肺部感染性疾病及胸部手术患者的差异性及相关性 |
| 材料与方法 |
| 1、一般资料 |
| 2、方法 |
| 3、统计学方法 |
| 结果 |
| 1、E组:肺部感染者抗炎治疗前后血清IL-1β,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10 和TNF-α,IFN-γ表达水平 |
| 2、F组:肺部手术患者手术前后血清IL-1β,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10和TNF-α,IFN-γ表达水平 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 附录 |
| 致谢 |
（7）升陷汤加味对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）后期呼吸机依赖肺肾气虚患者的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 临床研究实施方案 |
| 1.一般资料 |
| 1.1 .疾病诊断标准 |
| 1.2 纳入病例标准 |
| 1.3 排除病例标准 |
| 1.4 病例剔除和脱落标准 |
| 1.5 终止试验标准 |
| 1.6 记录不良事件 |
| 2.试验分组及治疗方法 |
| 2.1 试验分组 |
| 2.2 治疗方法 |
| 3.疗效观察指标 |
| 3.1 治疗效果指标 |
| 3.2 安全性监测指标 |
| 4.疗效评定 |
| 4.1 临床疗效评定标准 |
| 4.2 中医证候疗效评定标准 |
| 5.统计分析 |
| 第二部分 结果与分析 |
| 1.一般资料 |
| 1.1 纳入病例情况 |
| 1.2 两组受试患者基础信息对比 |
| 2.疗效比较 |
| 2.1 临床疗效指标 |
| 2.2 中医证候比较 |
| 3.不良反应 |
| 第三部分 讨论 |
| 1.西医对ARDS的研究 |
| 1.1 ARDS的定义 |
| 1.2 发病机制 |
| 1.3 ARDS诊断及分期 |
| 1.4 ARDS的治疗 |
| 2.中医对急性呼吸窘迫综合征的研究 |
| 2.1 中医对急性呼吸窘迫综合症病名认识 |
| 2.2 .祖国医学对本病病因病机的认识 |
| 2.3 ARDS 的中医药治疗 |
| 3.导师对急性呼吸窘迫综合征呼吸机依赖患者的认识及治疗经验 |
| 4.升陷汤组方用药特点及药理研究 |
| 5. 升陷汤对ARDS后期呼吸机依赖肺肾气虚患者的影响 |
| 6.问题及展望 |
| 第四部分 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 文献综述 急性呼吸窘迫综合征中、西医诊疗研究进展 |
| 参考文献 |
（8）香兰素对LPS诱导急性肺损伤的预保护作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 急性肺损伤概述 |
| 1.1.1 ARDS的定义 |
| 1.1.2 流行病学,发病率和死亡率 |
| 1.1.3 环境和遗传影响 |
| 1.1.4 ALI/ARDS的病理生理 |
| 1.1.5 ARDS的放射学 |
| 1.1.6 ARDS病理生理的分子机制研究 |
| 1.1.7 ARDS有效的治疗方法 |
| 1.1.8 ALI/ARDS的实验方法 |
| 1.2 香兰素的药理学研究 |
| 1.2.1 香兰素的合成 |
| 1.2.2 香兰素的药理作用 |
| 1.3 炎症反应在急性肺损伤过程中的作用机制 |
| 1.3.1 促和抗炎细胞因子涉及ARDS |
| 1.3.2 导致急性肺损伤的炎症途径 |
| 1.3.3 针对炎症途径的天然产物 |
| 1.4 氧化应激与ALI/ARDS |
| 1.5 Nrf2:一种抗炎抗氧化转录因子 |
| 1.6 结语 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验设备 |
| 2.1.2 实验耗材 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要试剂配制 |
| 2.1.5 实验细胞及培养 |
| 2.1.6 动物来源及饲养 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 ALI模型的构建 |
| 2.2.2 肺脏组织的病理学检测 |
| 2.2.3 MPO活性的测定 |
| 2.2.4 炎性细胞因子蛋白水平的测定 |
| 2.2.5 细胞及小鼠组织RNA的提取 |
| 2.2.6 实时PCR荧光定量 |
| 2.2.7 Western Blot蛋白印迹杂交 |
| 2.2.8 细胞生存能力分析 |
| 2.2.9双荧光素酶报告基因实验 |
| 2.2.10 FRAP,CAT,SOD,GSH,ROS,MDA的蛋白质水平的测定 |
| 2.2.11 细胞及动物组织核蛋白提取 |
| 2.2.12 免疫荧光染色实验 |
| 2.2.13 统计分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 香兰素可以抑制ALI发生过程中的炎症反应 |
| 3.2 香兰素可以抑制ALI发生过程中的氧化应激反应 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 香兰素在ALI/ARDS中的抗炎作用 |
| 4.2 香兰素在ALI/ARDS中的抗氧化应激作用 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
（9）中西医综合方案治疗ARDS的多中心，前瞻性，随机对照及动物实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词汇表 |
| 引言 |
| 第一部分 复苏合剂治疗急性呼吸窘迫综合征的理论探讨 |
| 1.中医学对急性呼吸窘迫综合征的认识和研究 |
| 1.1 中医学对急性呼吸窘迫综合征的认识 |
| 1.2 中医宗气与阳气理论 |
| 2 关于急性呼吸窘迫综合征的治则治法 |
| 2.1 辨证论治与辨病论治 |
| 2.2 急性呼吸窘迫综合征的治则治法 |
| 2.2.1 急性呼吸窘迫综合征的治则概述 |
| 2.2.2 急性呼吸窘迫综合征的治法 |
| 第二部分 中西医结合综合方案治疗ARDS的多中心,前瞻性,随机对照研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究对象 |
| 2.1 研究对象的来源 |
| 2.2 研究对象的选择 |
| 3 研究方案 |
| 3.1 试验研究设计 |
| 3.2 分组 |
| 3.3 干预 |
| 3.4 常规治疗 |
| 3.5 中药治疗 |
| 3.6 观察指标 |
| 3.7 盲法设计及实施 |
| 3.8 临床研究质量控制与质量保证 |
| 3.9 总结与资料保存 |
| 3.10 伦理委员会审批 |
| 3.11 临床试验注册 |
| 3.12 样本量及其计算的依据 |
| 3.13 统计分析 |
| 3.14 研究流程图 |
| 4 研究结果 |
| 4.1 病例收集情况 |
| 4.2 各中心收集病例的情况 |
| 4.3 基线分析 |
| 4.4 主要结局指标比较 |
| 4.5 次要结局指标 |
| 4.6 两组患者接受的治疗分析 |
| 4.7 感染发生情况 |
| 4.8 不良反应和安全性 |
| 第三部分 复苏合剂对ARDS大鼠肺泡细胞蛋白表达水平及炎性因子的影响 |
| 1 研究背景 |
| 2 研究内容 |
| 3 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 5.1 关于临床试验结果的讨论 |
| 5.2 关于动物实验结果的讨论 |
| 5.3 温肾潜阳法的理论依据及作用 |
| 5.4 复苏合剂方解 |
| 5.5 复苏合剂药物组成分析 |
| 5.6 现代医学对急性呼吸窘迫综合征的治疗及局限 |
| 6 结论 |
| 7 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 第四部分 文献研究 |
| 1.现代医学对急性呼吸窘迫综合征的认识 |
| 1.1 急性呼吸窘迫综合征的定义 |
| 1.2 急性呼吸窘迫综合征的流行病学 |
| 1.3 急性呼吸窘迫综合征的病因 |
| 1.4 急性呼吸窘迫综合征的病理生理 |
| 1.5 急性呼吸窘迫综合征的治疗策略 |
| 2.祖国医学对急性呼吸窘迫综合征的认识 |
| 2.1 病名溯源 |
| 2.2 病因病机 |
| 2.3 中药研究进展 |
| 2.4 辨证论治 |
| 3.总结 |
| 参考文献 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（10）清肺口服液类黄酮组分调控ALI小鼠AM能量代谢机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 急性肺损伤概述 |
| 1.1 急性肺损伤定义 |
| 1.2 急性肺损伤诊断标准 |
| 1.3 急性肺损伤流行病学及死亡率 |
| 1.4 ALI/ARDS的风险因素及影响 |
| 1.5 ALI的预防和治疗 |
| 1.6 急性肺损伤生理病理学机制 |
| 1.7 细胞内脂多糖的先天免疫 |
| 1.8 巨噬细胞在急性肺损伤机制中的研究进展 |
| 1.9 决定巨噬细胞功能的线粒体 |
| 1.10 干扰素与感染 |
| 1.11 黄酮类化合物的药理学研究 |
| 第二部分 基于数据挖掘探讨小儿细菌性肺炎用药规律 |
| 1 小儿肺炎的病因病机 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 文献来源 |
| 2.2 纳入标准 |
| 2.3 排除标准 |
| 2.4 方剂药物的名称规范 |
| 2.5 数据分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 中药频次统计 |
| 3.2 基于关联规则的组方规律分析 |
| 3.3 基于聚类规则的组方规律分析 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 清肺口服液中以类黄酮为主的化合物初步鉴定 |
| 1 仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 2 方法 |
| 2.1 清肺口服液进样前处理及混合标准品配制 |
| 2.2 分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 清肺口服液和混合标准品的正负离子总离子流图 |
| 3.2 清肺口服液和混合标准品的正负离子比对 |
| 4 讨论 |
| 第四部分 基于网络药理学方法研究清肺口服液类黄酮组分干预ALI作用机制 |
| 1 网络药理学概述 |
| 1.1 计算、实验、临床与中医药相结合的网络药理学 |
| 1.2 网络药理学的应用 |
| 1.3 网络药理学数据库的应用 |
| 1.4 网络药理学面临的挑战及发展方向 |
| 2 清肺口服液类黄酮组分干预ALI作用机制网络药理学研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 清肺口服液类黄酮组分潜在靶点预测、疾病靶点预测及共同靶点筛选 |
| 3.2 PPI网络分析及核心靶点筛选 |
| 3.3 GO和KEGG的基因富集分析 |
| 3.4 构建成分-靶点-通路-疾病网络 |
| 4 讨论 |
| 第五部分 清肺口服液类黄酮组分对ALI模型小鼠的干预作用 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 试剂 |
| 1.4 主要仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 小鼠ALI模型、给药及取材 |
| 2.2 肺W/D比值 |
| 2.3 肺组织病理 |
| 2.4 ELISA分析 |
| 2.5 肺组织组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量测定 |
| 2.6 细胞总数和差异计数 |
| 2.7 逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR) |
| 2.8 免疫印迹实验(Western blot实验) |
| 2.9 Label-free蛋白组学分析 |
| 2.10 Label-free气相色谱-质谱（GC-MS)代谢组学分析 |
| 2.11 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 清肺类黄酮组分有效改善肺组织病理损伤,改善肺组织水肿。 |
| 3.2 清肺类黄酮组分效改善肺组织氧化损伤情况 |
| 3.3 清肺类黄酮组分抑制ALI肺部炎症反应,减少炎症细胞的浸润。 |
| 3.4 无标记定量蛋白质组学分析 |
| 3.5 清肺类黄酮组分对ALI小鼠模型肺组织代谢特征研究 |
| 3.6 清肺类黄酮组分对于Ⅰ型干扰素的作用 |
| 4 讨论 |
| 第六部分 清肺口服液中类黄酮化合物对巨噬细胞能量代谢的干预作用 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 清肺类黄酮对RAW264.7细胞活力的影响 |
| 2.2 类黄酮组分低剂量改善巨噬细胞能量代谢 |
| 2.3 类黄酮组分高剂量过度激活的IFN-β损伤巨噬细胞能量代谢 |
| 2.4 代谢通路分析 |
| 3 讨论 |
| 第七部分 结语 |
| 1 结论 |
| 2 本研究创新之处 |
| 3 课题研究的不足与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、糖皮质激素改善ARDS缺氧与休克的实验研究（论文参考文献）
- [1]3种刺激性气体中毒临床治疗现状[J]. 张政,李倩. 锦州医科大学学报, 2021(05)
- [2]机械通气治疗新生儿重症胎粪吸入综合征预后的危险因素分析[D]. 徐倩倩. 蚌埠医学院, 2021(01)
- [3]冷诱导RNA结含蛋白在重症急性胰腺炎相关性肺损伤发病机制中的作用及大黄素干预的实验研究[D]. 徐秋实. 大连医科大学, 2021
- [4]分泌型磷脂酶A2阻断剂通过减少肺表面活性剂降解对脂多糖致新生大鼠ARDS肺损伤的保护作用[D]. 罗景华. 南方医科大学, 2020(06)
- [5]原花青素β2对百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制研究[D]. 江银玲. 安徽医科大学, 2020(04)
- [6]炎性细胞因子表达水平在创伤性ARDS及肺部感染和胸部手术患者的差异性分析及临床预后[D]. 郭敏. 青岛大学, 2020(01)
- [7]升陷汤加味对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）后期呼吸机依赖肺肾气虚患者的影响[D]. 张仕娜. 湖南中医药大学, 2020(03)
- [8]香兰素对LPS诱导急性肺损伤的预保护作用机制研究[D]. 郭婷婷. 吉林大学, 2020(08)
- [9]中西医综合方案治疗ARDS的多中心，前瞻性，随机对照及动物实验研究[D]. 张松. 成都中医药大学, 2020(01)
- [10]清肺口服液类黄酮组分调控ALI小鼠AM能量代谢机制研究[D]. 姜茗宸. 南京中医药大学, 2021(01)