一、硫双二氯酚对鸭的气管吸虫病疗效用量比较(论文文献综述)
高俊峰[1](2019)在《东方次睾吸虫转录组学和蛋白质组学分析及免疫相关基因鉴定》文中研究说明东方次睾吸虫(Metorchis orientalis)寄生于鸡、鸭等禽类、野生鸟类及犬、猫、人等哺乳动物的胆囊和胆管内,造成肝胆损伤及功能障碍,严重者可引起死亡。由于东方次睾吸虫与华支睾吸虫的囊蚴形态相似,流行区域和中间宿主相同,寄生部位和临床症状亦相似,容易被误判为华支睾吸虫病。因此,东方次睾吸虫很可能是一种被忽视的重要人兽共患病原。东方次睾吸虫主要分布于亚洲,在我国多省有报道,福建、安徽和黑龙江等省为主要流行区。近几年东方次睾吸虫病的感染率逐年增高,对畜牧业和社会公共安全造成了极大的威胁。目前对东方次睾吸虫的研究工作主要集中在形态学、生活史、试验动物感染、流行病学调查、治疗和分子分类等方面,国内外关于东方次睾吸虫转录组和蛋白质组以及免疫诊断的相关研究还未见报道,影响了对东方次睾吸虫致病机制的深入研究和防治工作。因此,本研究拟对东方次睾吸虫的成虫、囊蚴和虫卵三个发育阶段进行转录组和蛋白质组学分析,通过对三个发育阶段东方次睾吸虫在转录水平和蛋白水平上的差异分析,揭示东方次睾吸虫不同发育阶段的生物学特征和代谢特征。根据组学分析结果筛选出东方次睾吸虫的诊断候选基因进行重组表达和免疫原性鉴定,建立东方次睾吸虫病间接ELISA诊断方法。主要研究结果如下:1.通过对东方次睾吸虫成虫、囊蚴和虫卵三个发育时期的转录组学测序,拼接获得不同发育期东方次睾吸虫Unigenes共199,723个,平均长度1,012核苷酸,N50值为1,396。共有91,398个Unigenes与已知数据库匹配,其中包括Nr(76,247,38.17%)、Nt(34,046,17.04%)、KOG(23,640,11.83%)、KEGG(19,141,9.58%)、Swiss-Prot(35,633,17.84%)、GO(50,577,25.32%)和Pfam(50,449,25.25%)数据库。三个发育时期共鉴定到23,071个差异表达基因,在成虫和囊蚴之间共有13,823个,在成虫和虫卵之间共有10,343个,在虫卵和囊蚴之间共有18,348个。对差异表达基因进行GO分析,发现除了基础代谢过程外,成虫阶段差异表达基因主要富集在微管合成、蛋白代谢和生殖行为等过程;囊蚴阶段差异表达基因主要富集在幼虫发育、胚胎发育和核分裂等过程;虫卵阶段差异表达基因主要富集在大分子复合物组装、神经元发育和细胞骨架等过程。KEGG分析发现了与肝脏纤维化相关的TGF-β信号通路。利用qPCR方法对三个发育阶段的差异表达基因进行了验证,结果各基因的表达趋势均与转录组测序结果一致。2.通过对东方次睾吸虫成虫、囊蚴和虫卵的蛋白质组学研究,共鉴定到3,616个蛋白质,三个发育时期共鉴定到2,571个差异表达蛋白,成虫和囊蚴之间共有1,445个差异蛋白,成虫和虫卵之间共有1,728个差异蛋白,囊蚴和虫卵之间共有1,936个差异蛋白,对三个发育阶段的差异蛋白进行GO和KEGG分析,结果表明在成虫阶段差异蛋白显着富集在蛋白质折叠、肌肉收缩的调节和糖酵解等功能,主要参与内质网中的蛋白质处理、核糖体和间隙连接等信号通路。在虫卵阶段差异蛋白显着富集在微管运动活化、三磷酸腺苷酶活化和螺旋酶活化等功能,主要参与剪接体、RNA转运和DNA复制等信号通路。在囊蚴阶段差异蛋白显着富集在磷酸转移酶活化、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活化和乌头酸水合酶活化等功能,主要参与缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸降解、脂肪酸降解和甘油酯代谢等信号通路。利用PRM对三个发育阶段中的差异表达蛋白进行验证,表明PRM结果与蛋白质组测序趋势一致。在对东方次睾吸虫转录组和蛋白质组分析的基础上,对两种组学分析中的差异表达基因和差异表达蛋白进行数量、表达量、功能分类和代谢通路的比较关联分析,结果显示两组学的差异基因和差异蛋白在转录和蛋白水平上具有较好的一致性。3.对东方次睾吸虫的排泄分泌蛋白进行质谱分析,共鉴定到392个排泄分泌蛋白,全部关联到转录组和蛋白质数据库。依据排泄分泌蛋白质谱结果结合两组学数据分析结果和前期相关研究文献,筛选出7个免疫相关候选基因,成功地构建了候选基因的原核表达载体,并通过western blot对免疫原性进行鉴定。以重组蛋白rMoENO1和r MoCTSF作为抗原,成功建立了东方次睾吸虫病间接ELISA诊断方法。重组蛋白rMoENO1与rMoCTSF的ELISA诊断方法的敏感性分别为1:1600和1:800,且与鸭球虫、鸭对体吸虫、日本棘隙吸虫、舟形嗜气管吸虫和卷棘口吸虫阳性血清无交叉反应。通过对临床样品检测,发现建立的重组蛋白rMoENO1与rMoCTSF的间接ELISA检测方法在阳性检出率上无显着差异(P>0.05),均可用于东方次睾吸虫病的血清学诊断。本研究对东方次睾吸虫三个发育阶段进行转录组和蛋白质组学进行测序分析,并建立了东方次睾吸虫病的ELISA诊断方法,研究结果可深入了解东方次睾吸虫不同发育阶段的生命活动特征和调控机制,为东方次睾吸虫的致病机制及免疫防治研究提供了重要基础数据。
刘丽萍,王守君,单艳君,朱永信,张玲,张谦[2](2011)在《猪高热病的诊断与防治》文中认为猪高热病是由高致病性蓝耳病等病毒和细菌、寄生虫等多种病原混合或继发感染引起的急性、热性、高致病性和致死性的传染性疾病。近年来,猪高热病在不少地方经常发生,尤其是高温高湿夏季。
苏东平,蒲金友[3](2001)在《硫双二氯酚对鸭的气管吸虫病疗效用量比较》文中进行了进一步梳理
甘肃省兽医研究所[4](1975)在《国内兽用驱虫药概述》文中研究说明 家畜寄生虫,尤其是蠕虫,分布极广,为害极巨,可以毫不夸张地说:世界上没有一种家畜不被几种、几十种,乃至几百种寄生虫所侵袭,如马体寄生虫就有二百余种,羊体少说也有百余种,并且很多种寄生虫在一个宿主体内的寄生数目常以千万计算,引起家畜的严重疾患和产生不良后果。这些寄生虫,有的可导致大批家畜的急性死亡,如马蠕虫性疝痛、胃蝇蛆病,牛羊肝片吸虫病、莫尼茨绦虫病、网尾线虫病、血孢子虫病,鸡兔球虫病,猪后圆
二、硫双二氯酚对鸭的气管吸虫病疗效用量比较(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、硫双二氯酚对鸭的气管吸虫病疗效用量比较(论文提纲范文)
(1)东方次睾吸虫转录组学和蛋白质组学分析及免疫相关基因鉴定(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 东方次睾吸虫和东方次睾吸虫病 |
1.1.1 东方次睾吸虫的分类 |
1.1.2 东方次睾吸虫的发育过程 |
1.1.3 东方次睾吸虫病的流行病学情况 |
1.1.4 东方次睾吸虫的诊断和防控 |
1.2 转录组与转录组学 |
1.2.1 转录组学概述 |
1.2.2 转录组测序的研究方法 |
1.2.3 转录组学在寄生虫领域的研究进展 |
1.3 蛋白质组与蛋白质组学 |
1.3.1 蛋白质组学概述 |
1.3.2 蛋白质组学研究方法 |
1.3.3 蛋白质组学在寄生虫领域的应用 |
1.4 寄生虫排泄分泌抗原的研究进展 |
1.4.1 排泄分泌抗原的概述 |
1.4.2 排泄分泌抗原在寄生虫领域的应用 |
1.5 寄生虫的免疫诊断抗原研究 |
1.5.1 寄生虫免疫诊断的意义 |
1.5.2 寄生虫免疫诊断抗原的研究进展 |
1.6 本研究的目的意义 |
第二章 东方次睾吸虫不同发育阶段转录组分析 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料 |
2.2.1 试验动物 |
2.2.2 主要仪器 |
2.2.3 主要试剂 |
2.2.4 溶液的配制 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 三个发育阶段虫体的收集 |
2.3.2 分子生物学鉴定 |
2.3.3 总RNA提取及质量检测 |
2.3.4 文库构建及测序 |
2.3.5 测序数据分析 |
2.3.6 三个发育阶段差异表达基因分析 |
2.3.7 qPCR验证 |
2.4 结果 |
2.4.1 三个发育阶段虫体的收集 |
2.4.2 分子生物学鉴定 |
2.4.3 总RNA质量检测结果 |
2.4.4 测序数据情况及质量评估 |
2.4.5 转录组组装情况 |
2.4.6 基因功能注释 |
2.4.7 三个发育阶段差异表达基因分析 |
2.4.8 qPCR验证结果 |
2.5 讨论 |
2.6 小结 |
第三章 东方次睾吸不同发育阶段虫蛋白质组分析 |
3.1 引言 |
3.2 实验材料 |
3.2.1 虫体及试验动物 |
3.2.2 主要试验仪器 |
3.2.3 主要试剂 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 蛋白提取及质量检测 |
3.3.2 Label-free蛋白组学定量分析 |
3.3.3 差异表达蛋白定量分析 |
3.3.4 蛋白水平验证分析 |
3.3.5 转录组和蛋白质组数据关联分析 |
3.4 结果 |
3.4.1 蛋白提取及质量检测 |
3.4.2 蛋白质质谱鉴定 |
3.4.3 三个发育阶段差异蛋白分析 |
3.4.4 蛋白水平验证结果 |
3.4.5 转录组和蛋白质组数据关联分析 |
3.5 讨论 |
3.6 小结 |
第四章 东方次睾吸虫病诊断抗原的筛选及ELISA方法的建立 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料 |
4.2.1 虫体样本 |
4.2.2 实验血清 |
4.2.3 主要仪器 |
4.2.4 主要试剂及配方 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 东方次睾吸虫ESPs的收集 |
4.3.2 东方次睾吸虫ESPs的质谱分析 |
4.3.3 免疫相关基因的筛选 |
4.3.4 目的基因的原核表达及鉴定 |
4.3.5 重组蛋白的诱导表达及纯化 |
4.3.6 蛋白反应原性分析 |
4.3.7 间接ELISA棋盘滴定法筛选最适诊断抗原 |
4.3.8 ELISA反应条件的优化 |
4.3.9 阴阳性临界值的确定 |
4.3.10 间接ELISA方法的效果评价 |
4.3.11 临床样品的检测 |
4.4 结果 |
4.4.1 东方次睾吸虫ESPs的检测 |
4.4.2 东方次睾吸虫ESPs的质谱分析 |
4.4.3 免疫相关候选基因的筛选 |
4.4.4 目的基因的原核表达及鉴定 |
4.4.5 重组蛋白的诱导表达及纯化 |
4.4.6 重组蛋白Western-blot检测 |
4.4.7 诊断抗原的筛选 |
4.4.8 ELISA反应条件优化结果 |
4.4.9 阴阳性临界值的确定 |
4.4.10 间接ELISA方法的效果评价 |
4.4.11 临床样品的检测 |
4.5 讨论 |
4.6 小结 |
第五章 结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简介 |
(2)猪高热病的诊断与防治(论文提纲范文)
1 流行特点 |
2 临床症状 |
3 剖检变化 |
4 预防措施 |
5 治疗方案 |
四、硫双二氯酚对鸭的气管吸虫病疗效用量比较(论文参考文献)
- [1]东方次睾吸虫转录组学和蛋白质组学分析及免疫相关基因鉴定[D]. 高俊峰. 黑龙江八一农垦大学, 2019(08)
- [2]猪高热病的诊断与防治[J]. 刘丽萍,王守君,单艳君,朱永信,张玲,张谦. 养殖技术顾问, 2011(04)
- [3]硫双二氯酚对鸭的气管吸虫病疗效用量比较[J]. 苏东平,蒲金友. 贵州畜牧兽医, 2001(06)
- [4]国内兽用驱虫药概述[J]. 甘肃省兽医研究所. 兽医科技资料, 1975(Z1)