一、中医药治疗特殊精子形态的病例分析（论文文献综述）
张继伟[1]（2021）在《金龟毓麟方治疗特发性弱精子症（肾虚肝郁型）临床观察及机制研究》文中研究说明背景:全球约有7240万人受生育问题的困扰,特发性弱精子症占24%～30%。目前现代医学治疗特发性弱精子症存在一定局限性,缺乏针对病因的治疗,而中医药在治疗特发性弱精子症方面有一定优势。金龟毓麟方为中国中医科学院西苑医院男科经验方,具补肾填精,疏肝通络功效,对特发性弱精子症（肾虚肝郁型）具有一定疗效,但未对其有效性与安全性进行系统评价,其作用机制亦尚未明确。故设计本课题以验证其有效性与安全性及可能作用机制。本研究分为以下3个部分:研究1金龟毓麟方治疗特发性弱精子症（肾虚肝郁型）的有效性与安全性临床研究目的:评价中药复方金龟毓麟方治疗特发性弱精子症（肾虚肝郁型）的有效性与安全性。方法:本研究为随机、对照试验,共纳入患者124例,均于2019年12月-2020男12月就诊于中国中医科学院西苑医院男科门诊,均符合特发性弱精子症（肾虚肝郁型）的纳排标准。采用SAS软件产生随机编码,按1:1随机分为试验组（62例）和对照组（62例）。试验组给予金龟毓麟方（制龟甲15g、郁金12g、柴胡12g,熟地黄15g、鹿角胶6g、菟丝子10g、覆盆子10g、生麦芽12g、鸡血藤10g、炙甘草6g）。服用方法:每日2次,一次1袋。对照组给予左卡尼汀口服液（国药准字:H19990372）,服用方法:每次10ml,每日3次。两组用药12周,随访4周。主要疗效指标包括前向运动精子（PR）、精子总活力（PR+NP）;次要疗效指标包括中医证候评分、精子浓度、精液量、受孕率。安全性指标包括血常规、尿常规、肝肾功能（ALT、AST、BUN、CREA）、心电图,入组前和观察完成后各检查一次。结果:本研究共入组患者124例,共脱落11例,其中试验组脱落4例,对照组脱落7例,总脱落率为8.87%。本研究有效性分析只针对符合方案集（PPS）数据进行统计分析。1.主要疗效指标:（1）PR级精子:①组内比较:与治疗前比较,对照组治疗4周后PR级精子活力改变无统计学差异（P>0.05）:治疗8周、12周后可提高PR级精子活力（P<0.05）。与治疗前比较,试验组在治疗4周、8周、12周后均可显着提高PR级精子活力（P<0.05）。②同时期组间比较:与对照组比较,试验组治疗4周后在提高PR级精子活力方面无统计学差异（P>0.05）;治疗8周、12周后,在提高PR级精子活力方面优于对照组（P<0.05）。（2）PR+NP级精子:①组内比较:与治疗前比较,对照组治疗4周后在提高PR+NP级精子方面无统计学差异（P>0.05）;治疗8周、12周后可提高PR+NP级精子活力（P<0.05）。与治疗前比较,试验组治疗4周、8周、12周后均可提高PR+NP级精子活力（P<0.05）。②同时期组间比较:与对照组比较,治疗4周后试验组在提高PR+NP级精子方面无统计学差异（P>0.05）;治疗8周、12周后试验组在提高PR+NP级精子方面均优于对照组（P<0.05）。2.次要疗效指标:（1）中医证候评分:①组内比较:与治疗前比较,对照组治疗4周、8周、12周后,在降低中医证候评分方面均无统计学差异（P>0.05）;与治疗前比较,试验组治疗4周、8周、12周后可显着降低中医证候评分（P<0.05）。②同时期组间比较:试验组治疗4周、8周、12周后在降低中医证候评分方面均优于对照组（P<0.05）。（2）精液量:①组内比较:与治疗前比较,对照组与试验组分别在治疗4周、8周、12周后,在改善精液量方面均无统计学差异（P>0.05）;②同时期组间比较:与对照组比较,试验组分别治疗4周、8周、12周后在改善精液量方面无统计学差异（P>0.05）。（3）精子浓度:①组内比较:与治疗前比较,对照组与试验组分别在治疗4周、8周、12周后,在改善精子浓度方面均无统计学差异（P>0.05）;②同时期组间比较:与对照组比较,试验组分别治疗4周、8周、12周后在改善精子浓度方面无统计学差异（P>0.05）。（4）受孕率:①组内比较:与治疗前比较,对照组与试验组分别在治疗4周、8周、12周后,在受孕率方面均无统计学差异（P>0.05）;②同时期组间比较:与对照组比较,试验组分别治疗4周、8周、12周后在受孕率方面无统计学差异（P>0.05）。3.安全性评价:本研究共发生7例轻度不良事件,其中试验组发生4例,对照组3例,以上不良事件均为轻度,不适症状在给予指导服用方法后自行缓解,未见不良反应。两组血常规、尿常规、肝肾功能（ALT、AST、BUN、CREA）、心电图均未见明显异常。结论:金龟毓麟方在提高特发性弱精子症PR级和PR+NP级精子活力及降低中医证候评分方面均优于左卡尼汀口服液,且未见明显不良反应,表明金龟毓麟方在治疗肾虚肝郁型特发性弱精子症方面安全有效。研究2金龟毓麟方对奥硝唑诱导弱精子症模型大鼠的药效学研究目的:观察金龟毓麟方对奥硝唑（Omidazole,ORN）诱导的弱精子症模型大鼠精液质量、睾丸和附睾重量及病理形态、性激素、肝肾功能的影响。方法:将60只雄性SPF级SD大鼠进行编号,采用随机数字表法将其随机分为空白组、模型组、金龟毓麟方组（低剂量组、中剂量组、高剂量组）、左卡尼汀组每组各10只。空白组给予1mL/100g 0.5%的CMC-Na溶液;模型组;400mg/（kg·d）ORN;金龟毓麟方低剂量组:4.9g 生药/kg·d+400 mg/（kg.d）ORN;金龟毓麟方中剂量组:9.7g生药/kg·d+400mg/（kg·d）ORN;金龟毓麟方高剂量组:19.4g 生药/kg.d+400mg/（kg.d）ORN;左卡尼汀组 100mg/（kg·d）+400mg/（kg·d）ORN。灌胃时间:实验组上午给予400mg/（kg.d）ORN,下午给予金龟毓麟方浓缩液,灌胃28天。末次给药断食24小时后,腹腔麻醉称体重,取睾丸及附睾称重,计算附睾、睾丸系数。左侧附睾尾部制备附睾匀浆,温浴评估精子活力。大鼠右侧附睾、睾丸固定染色。腹主动脉取血,采用酶联免疫吸附法及生化分析仪分别测定性激素（FSH、LH、T）、肝肾功（ALT、AST、UREA、BUN、CREA）。结果:1.大鼠一般情况:空白组大鼠饮食无明显改变,体毛浓密光泽,活动度良好,精神状态可,大小便无明显异常。模型组大鼠饮食减少、体毛疏松,光泽度下降,活动度方面部分可见少动、运动迟缓,精神倦怠、萎靡或见易怒,大便稀溏,小便色黄。左卡尼汀组大鼠饮食增加,精神状态较好,活动灵敏,小便颜色正常,大便偶有偏稀。金龟毓麟方组各大鼠饮食较模型组食量增加,体毛疏松但有光泽、活动度较模型组运动量增加,精神状态较模型组灵敏、部分可见易怒现象,大便质地好转,小便颜色恢复正常。中、高剂量组精神状态和饮食量较低剂量组改善明显。2.金龟毓麟方对大鼠精子质量的影响:（1）大鼠精子活力:与模型组比较,中剂量组、高剂量组、左卡尼汀组在提高PR级精子、PR+NP级精子活力方面均有统计学差异（P<0.05）。高剂量组在提高PR+NP级精子方面优于左卡尼汀组（P<0.05）。（2）大鼠精子浓度:各组与模型组比较大鼠精子浓度改变均无统计学差异（P>0.05）。3.大鼠睾丸、附睾重量及脏器指数变化:（1）大鼠睾丸变化情况:各组与模型组比较大鼠睾丸重量、睾丸系数改变均无统计学差异（P>0.05）。（2）大鼠附睾变化情况:与空白组比较,模型组附睾重量、附睾脏器系数下降（P<0.05）。与模型组比较,金龟毓麟方高剂量组可增加附睾重量与附睾系数（P<0.05）。4.金龟毓麟方对大鼠肝肾功的影响:各组与模型组比较大鼠肝肾功能（ALT、AST、UREA、BUN、CREA）改变均无统计学差异（P>0.05）。结论:1.400 mg/（kg·d）ORN灌胃28天,对大鼠体重、睾丸重量及脏器指数、精子浓度无明显影响,但可引起附睾损伤,造成大鼠精子活力下降。2.金龟毓麟方可改善ORN诱导的弱精子症大鼠附睾损伤,提高大鼠精子活力,对大鼠肝肾功能（ALT、AST、UREA、BUN、CREA）及性激素（FSH、LH、T）无明显影响,初步验证了金龟毓麟方治疗弱精子症的有效性与安全性。研究3 基于Pink1/Parkin信号通路研究金龟毓麟方调控线粒体自噬改善ORN诱导的弱精子症大鼠的作用机制目的:从Pink1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬角度探讨金龟毓麟方治疗弱精子症的机制,进一步揭示ORN所致弱精子症大鼠的机制以及金龟毓麟方的保护作用。方法:将40只大鼠随机分为空白组、模型组、金龟毓麟方组（低剂量组、高剂量组）,灌胃取材等同研究2。精子氧化应激检测采用SOD、MDA及GSH-Px活性检测试剂盒检测;精子线粒体功能检测采用JC-1线粒体膜电位检测试剂盒与流式细胞仪检测;采用ATP含量检测试剂盒检测精子线粒体ATP含量。精子线粒体自噬相关指标检测:采用Real-time PCR和Western Blot检测精子Pink1、Parkin、p62 和 LC3 Ⅱ/Ⅰ、TOM20、Beclin 1 mRNA 及蛋白表达水平。结果:1.精子氧化应激指标变化:与空白组比较,模型组大鼠附睾精子中MDA含量升高（P<0.01）,SOD与GSH-Px含量降低（P<0.01）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量组、高剂量组大鼠附睾精子中MDA含量均降低（P<0.05）,SOD与 GSH-Px 含量均升高（P<0.05,P<0.01）。2.大鼠精子线粒体功能指标变化:（1）线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential,MMP）:与空白组比较,模型组精子线粒体MMP下降明显,精子早期凋亡率增加（P<0.01,P<0.001）;与模型组比较,金龟毓麟方各组可升高MMP,降低精子早期凋亡率（P<0.05,P<0.01）。（2）线粒体ATP:与空白组比较,模型组精子线粒体ATP含量显着降低（P<0.001）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量组提高精子线粒体ATP方面无统计学差异（P>0.05）;高剂量组可提高精子线粒体ATP含量（P<0.01）。3.线粒体自噬相关指标变化:（1）与空白组比较,模型组大鼠Pink1 mRNA及蛋白表达增加（P<0.01）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量组、高剂量组可降低Pink1mRNA及蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。（2）与空白组比较,模型组大鼠Parkin mRNA及蛋白表达均增加（P<0.01）。与模型组比较,金龟毓麟方低、高剂量组可降低Parkin mRNA及蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。（3）与空白组比较,模型组大鼠p62 mRNA及蛋白表达降低（P<0.01,P<0.001）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量、高剂量组可增加p62 mRNA及蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。（4）与空白组比较,模型组大鼠LC3 mRNA及LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达增加（P<0.001）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量、高剂量组LC3 mRNA及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达降低（P<0.05,P<0.001）。（5）与空白组比较,模型组大鼠TOM20 mRNA及蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量组、高剂量组TOM20 mRNA表达增加（P<0.05,P<0.01）;低剂量组TOM20蛋白表达增高（P<0.05）。（6）与空白组比较,模型组大鼠Beclin 1mRNA及蛋白表达增加（P<0.05,P<0.001）。与模型组比较,金龟毓麟方低剂量、高剂量组BeclinlmRNA及蛋白表达降低（P<0.05,P<0.001）。结论:1.400mg/（kg·d）ORN诱导的弱精子症大鼠可能通过氧化应激损伤,引起线粒体 MMP 与 ATP 下降,导致 Pink1、Parkin、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、BeclinlmRNA 及蛋白表达上调,p62、TOM20mRNA及蛋白表达下调,提示ORN通过氧化应激损伤引起线粒体功能障碍,导致精子线粒体自噬激活。2.金龟毓麟方可减轻弱精子症大鼠精子氧化应激损伤,提高精子线粒体MMP 与 ATP 水平,下调 Pink1、Parkin、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1mRNA 及蛋白表达,上调p62、TOM20mRNA及蛋白表达,提示金龟毓麟方通过抑制Pink1/Parkin线粒体自噬通路改善精子活力。
邓学易[2]（2021）在《柴橘强精煎联合硫辛酸治疗精子DNA损伤的临床观察》文中研究表明目的:精子DNA是遗传信息的携带者,精子DNA损伤会使精子DNA单双链断裂,基因片段裂解以及异位等损伤,使得精子染色体出现减数分裂异常以及配对错误等问题,从而破坏精子DNA完整性,导致男方不育,故精子DNA损伤是导致男性不育症的重要原因之一。本课题研究目的有三个:1.基于前期“强精煎”的一系列试验和临床研究结果,明确柴橘强精煎联合硫辛酸治疗精子DNA损伤的临床疗效,构建柴橘强精煎联合硫辛酸与精子DNA损伤之间的诊疗体系;2.通过对比研究柴橘强精煎联合硫辛酸（治疗组）和硫辛酸（对照组）的临床疗效,评判中西药联合组和单纯西药组对治疗精子DNA损伤的影响,优化精子DNA损伤的治疗方案;3.探讨柴橘强精煎联合硫辛酸治疗精子DNA损伤的协同作用,为中西药联合运用于治疗精子DNA损伤拓宽临床诊疗思路。方法:在2020年03月～2020年11月期间,纳入研究病例64例全部来源于广西中医药大学第一附属医院男科就诊的合并精子DNA损伤的男性不育症患者,随机分为2组,每组32例,即治疗组柴橘强精煎联合硫辛酸组32例和对照组硫辛酸组32例。观察治疗前、治疗三个月后的精子DNA碎片指数（DFI）、精液常规分析的参数指标（包括精子浓度、前向运动百分比、总活力、正常形态率）、中医临床症状改善情况,并进行统计学分析。结果:本课题最终有效病例数为60例,柴橘强精煎联合硫辛酸组30例,其中显效13例,有效11例,无效6例,总有效率80.0%;硫辛酸组30例,其中显效6例,有效11例,无效13例,总有效率56.7%。1.两组治疗后精子DNA碎片指数均较前改善,治疗组作用更显着（P<0.05）。2.两组治疗后,均能改善精子浓度、前向运动百分比、总活力、正常形态率,且治疗组较对照组在前向运动百分比、总活力、正常形态率方面改善更显着（P<0.05）。3.治疗后的两组中医症状积分均较治疗前均有降低,治疗组更明显（P<0.05）。结论:1.柴橘强精煎联合硫辛酸能有效改善精子DNA损伤,降低精子DNA碎片指数,中西药联合组较单纯西药组作用更显着。2.柴橘强精煎联合硫辛酸能有效改善精子浓度、前向运动百分比、总活力及正常形态率,且中西药联合组较单纯西药组在改善前向运动百分比、总活力及正常形态率方面作用更显着。3.柴橘强精煎联合硫辛酸可显着降低脾肾两虚兼湿热瘀阻证男性不育症患者中医症状积分,改善相关临床症状,中西药联合组较单纯西药组改善更明显。
黄益辉[3]（2021）在《萆薢强精煎治疗合并慢性前列腺炎的弱精子症临床研究》文中进行了进一步梳理目的:拟通过萆薢强精煎治疗合并慢性前列腺炎的弱精子症患者的临床研究,观察治疗效果、对比治疗前后患者各项指标变化,初步探讨并阐释萆薢强精煎从脾肾两虚兼湿热瘀滞论治合并慢性前列腺炎的弱精子症理论依据,为中医药运用于治疗男性不育症拓宽临床诊疗思路。方法:本研究采用随机对照的方法,从本院男科门诊选取符合纳入标准的70例患者作为研究对象,按随机数字表法随机分为两组,治疗组35例,予萆薢强精煎治疗;对照组35例,予左卡尼汀口服溶液联合前列平胶囊治疗。疗程均为3个月。记录治疗前后精液质量、NIH-CPSI评分、中医证候评分、PSEP,对数据进行统计学分析,评定疗效。结果:本次研究治疗组、对照组分别纳入35例患者,治疗组最后完成观察31例,对照组最后完成观察32例。（1）不育症疗效:两组患者精子总数、PR、PR+NP无统计学差异。（2）慢性前列腺炎症状临床疗效:通过NIH-CPSI症状评分判断患者,治疗组治愈4例,显效4例,有效21例,无效3例,总有效率为90.63%;对照组治愈0例,显效3例,有效18例,无效10例,总有效率为67.74%,经Ridit分析,P=0.027<0.05两组间疗效有统计学差异,认为治疗组疗效更佳。（3）中医证候评分疗效:治疗后两组患者中医证候临床症状积分无统计学差异。结论:萆薢强精煎能提高患者精子活力减轻患者临床症状,明显提高PR及降低NIH-CPSI总评分及中医证候评分,经治疗患者PSEP得到下降,可以用于治疗合并CP的弱精子症。此外患者精子活力与临床症状相关,治疗后的PR增长程度与NIH-CPSI症状评分下降程度呈正相关。从“脾肾两虚兼湿热瘀毒”论治可在改善患者精子质量提高患者生育能力,同时可以减轻慢性前列腺炎引起的临床症,缓解不适,减轻心理负担,提高生活质量。
邓超[4]（2021）在《“标本配穴”针刺对反复移植失败患者妊娠结局的影响及调控胚胎着床障碍大鼠细胞因子表达的研究》文中认为第一章 针刺治疗改善体外受精-胚胎移植妊娠结局的meta分析目的:探讨针刺治疗作为体外受精-胚胎移植的辅助手段改善患者妊娠结局的有效性及目前研究得出不同结论的原因。方法:对2020年02月以前发表的针刺治疗作为体外受精-胚胎移植辅助手段改善患者妊娠结局的临床随机对照研究（RCTs）进行系统评价和meta分析。结局指标包括临床妊娠率（CPR）与活产率（LBR）。文献形式包括中文文献与英文文献,采用PubMed、Web of science、Cochrane等英文数据库检索英文文献,采用中国知网、万方、维普等中文数据库检索中文文献,采用Cochrane手册评估纳入文献的质量,采用Revman软件对纳入的文献进行数据合并与分析,meta分析结果以森林图的形式展示,采用亚组分析评估结果产生异质性的原因,采用漏斗图与Egger’s test评估文献的发表偏倚。结果:共筛选出34项符合条件的临床研究,包含5817名女性纳入到这项meta分析。针刺治疗与对照组在CPR方面存在明显的统计学差异（N/n=34/5817,RR= 1.21,95%可信区间（95%CI）[1.09,1.35],Z=3.48,P=0.0005）,而在活产率方面未表现出明显的统计学差异（N/n=13/3211,RR=1.18,95%CI[0.96,1.46],Z=0.38,P=0.12）。但是,临床妊娠率（I2=55%）与活产率（I2=59%）均存在较大的异质性。临床妊娠率的亚组分析显示产生异质性的原因与选穴方案、针刺次数、针刺时长、针刺时机、针刺形式、对照组CPR、已行周期数等因素有关。活产率的亚组分析显示产生异质性的原因与针刺次数与针刺时机有关。结论:针刺治疗能显着提高接受IVF-ET患者的临床妊娠率,不能显着提高活产率,但两项结果均存在较大异质性,其中,包括选穴方案、针刺时机在内的干预措施因素对结果的异质性具有重大影响,因此,在未来有必要进一步制定更合理、规范、有效的干预措施,并进行更多RCTs与循证医学研究去揭示这一问题的真相。第二章“标本配穴”针刺治疗对反复移植失败患者妊娠结局的影响目的:探讨“标本配穴”针刺治疗对体外受精-胚胎移植反复移植失败（RIF）患者的临床疗效、安全性及可能的作用机制。方法:将2018年12月～2019年12月于武汉艾德华兹妇科门诊部就诊的100例反复移植失败患者随机分为对照组与试验组。对照组给予常规激素替代治疗,试验组加用“标本配穴”针刺治疗。采用临床妊娠率（CPR）、活产率（LBR）评估“标本配穴”针刺改善RIF患者的临床疗效。采用不良反应发生率评估“标本配穴”针刺治疗的安全性。采用血清白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等细胞因子含量,子宫内膜厚度、形态,以及患者焦虑、抑郁自评量表等情绪状态指标探讨“标本配穴”针刺治疗可能的作用机制。结果:治疗后,试验组的临床妊娠率、活产率明显高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者治疗期间的不良反应发生率无显着差异（P>0.05）。两组患者治疗前血清IL-10、TNF-α等细胞因子含量,子宫内膜厚度、形态及焦虑、抑郁自评量表得分等情绪状态两组间比较无差异,两组之间具有可比性。两组患者经过治疗后上述指标均较治疗前明显改善（P<0.05）,且试验组治疗后上述指标较对照组改善更明显,两组间有显着差异（P<0.05）。结论:“标本配穴”针刺能显着改善RIF患者的临床妊娠率、活产率等妊娠结局指标,并且没有严重的不良反应。其作用机制可能与调节患者IL-10、TNF-α等血清细胞因子含量、改善子宫内膜厚度、形态等子宫内膜状态以及改善反复移植失败患者的焦虑抑郁状态,调适心理有关。第三章“标本配穴”针刺对胚胎着床障碍大鼠细胞因子表达的影响目的:探讨“标本配穴”针刺对胚胎着床障碍大鼠IL-10、TNF-α、IL-4和IFN-γ表达的影响。方法:将40只早孕大鼠随机分为正常组（Control,C）、模型组（Model,M）、黄体酮组（Progesterone,P）和“标本配穴”针刺组（Acupunture,A）,每组各10只。M组、P组和A组给予米非司酮麻油溶液皮下注射造模。自造模当天起,A组给予“标本配穴”针刺治疗,P组给予黄体酮麻油溶液皮下注射治疗。造模干预后第8d颈椎脱臼处死各组大鼠,观察各组大鼠胚胎着床数并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠血清IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α 的含量,采用蛋白印迹法（Western blot）检测各组大鼠子宫内膜IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α的蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Rt-PCR）检测各组大鼠子宫内膜IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α 的 mRNA 表达。结果:各组在上述指标的比较均具有显着差异（P<0.05）,两两比较结果显示,与C组相比,M组、A组及P组大鼠胚胎着床数均显着减少（P<0.05）,血清IL-4、IL-10的含量均显着降低（P<0.05）,子宫内膜IL-4、IL-10的蛋白与mRNA表达均显着降低（P<0.05）,而血清IFN-γ、TNF-α的含量均显着升高（P<0.05）,子宫内膜IFN-γ、TNF-α的蛋白与mRNA均显着升高（P<0.05）;与M组相比,A组与P组的胚胎着床数均明显增加（P<0.05）,血清IL-4、IL-10的含量均显着升高（P<0.05）,子宫内膜IL-4、IL-10的蛋白与mRNA表达均显着升高（P<0.05）,而血清IFN-γ、TNF-α的含量均显着降低（P<0.05）,子宫内膜IFN-γ、TNF-α的蛋白与mRNA均显着降低（P<0.05）;与P组相比,A组的胚胎着床数、血清IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α 的含量及子宫内膜 IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α的蛋白与mRNA表达均无显着差异（P>0.05）。结论:“标本配穴”针刺治疗能显着提高胚胎着床障碍大鼠的胚胎着床数,其作用机制可能与上调血清与子宫内膜的IL-4、IL-10及下调IFN-γ、TNF-α的表达,恢复Th1与Th2细胞因子的表达平衡有关。
王继升[5]（2021）在《补肾生精法治疗少弱精子症的数据挖掘及其调控生精细胞的机制研究》文中进行了进一步梳理少弱精子症已成为男科疾病研究热点。西医治疗存在一定的局限性,临床治疗无特效药物推荐,多以经验性治疗为主;补肾生精法作为治疗少弱精子症的常用中医治法,具有独特的疗效优势,能有效地弥补西医治疗少弱精子症的不足。广嗣育麟汤作为东直门医院男科治疗少弱精子症协定处方,取得了良好的临床疗效,本方以菟丝子-枸杞子为君药,是补肾生精法的临床经验方。目的1探讨补肾生精法源流及发展脉络2挖掘李海松教授及国家专利数据库中其他中医学者治疗少弱精子症用药经验及治法治则3探索广嗣育麟汤治疗少弱精子症的临床疗效4探讨菟丝子-枸杞子治疗少弱精子症的实验机制方法文献研究:基于中医文献及数据库,整理历代着作中关于补肾生精法及肾藏精理论在男性不育症治疗的文献,梳理补肾生精法的发展脉络及源流。数据挖掘:基于中医传承辅助平台,分别以李海松教授治疗少弱精子症438首处方以及国家专利库中74首治疗少弱精子症中医处方为挖掘对象,探索李海松教授及其他中医学者用药规律及治法治则。临床研究:基于数据挖掘结果中李海松教授治疗少弱精子症的处方——“广嗣育麟汤”,对其进行临床疗效评价,采用病例自身前后对照研究方法,纳入120例少弱精子症患者治疗12周,评价指标为精液质量及中医证候评分。实验研究:基于数据挖掘结果中补肾生精法代表药对——菟丝子、枸杞子（SC-FL）,进行实验机制验证,通过细胞实验和动物实验相结合,探索补肾生精代表药对的具体机制。细胞实验以精原细胞（GC-1spg）为研究对象,分为4组,正常组（NC组）、模型组（GTW组）、左卡尼汀治疗组（GTW+LEV组）、菟丝子-枸杞子治疗组（GTW+SC-FL组）。运用雷公藤多苷含药血清体外干预制备生精功能障碍细胞模型,治疗组分别以左卡尼汀（LEV）及SC-FL干预治疗;动物实验也同样分为4组,每组6只,运用GTW灌胃4周制备少弱精子症大鼠模型,治疗组分别以LEV和SC-FL灌胃治疗4周。观察各组大鼠的一般状况及血清激素水平;运用流式细胞技术,观察各组GC-1spg的细胞周期、线粒体膜电位、增殖凋亡;运用透射电镜观察GC-1spg细胞及大鼠睾丸组织中细胞器及超微结构;运用免疫荧光染色技术、WB及RT-qPCR技术检测GC-1spg细胞及大鼠睾丸组织中PI3K/AKT通路相关蛋白及mRNA的分布及含量。结果1文献研究:补肾生精法是从中医肾藏精理论发展而来。早在先秦时期的着作中就奠定补肾生精法基础,在魏晋隋时期的文献对补肾生精法有一定的继承与创新,经历了唐宋元时期补肾生精理论趋于完善、系统化,在明清时期的文献古籍记载中补肾生精理论得到了蓬勃发展,并最终形成完备体系流传至今。2通过对导师的处方及经验挖掘发现,导师认为少弱精子症病因常以肾精亏虚为主,涉及肝、肾、脾三脏,治疗以微调阴阳为纲,以补肾生精为目,整体论治。用药出现频率最高的是菟丝子、枸杞子两味药,其次是覆盆子、五味子、熟地黄、黄芪、车前子、牡蛎、当归,上述9味药同山药共同组成“广嗣育麟汤”,菟丝子、枸杞子为广嗣育麟汤君药。通过对国家专利数据库的处方的挖掘结果发现,出现频率最高的同样为菟丝子、枸杞子,说明此药对在临床中确有一定疗效,其机制有待于实验验证。3通过临床研究发现经过广嗣育麟汤治疗后患者的精液浓度及活动率明显升高,中医主要证候和次要证候也有显着改善（P<0.05或P<0.01）,广嗣育麟汤治疗少弱精子症临床有效率为92.7%。试验过程中患者未出现不良反应。4细胞实验研究结果表明,在细胞周期、线粒体膜电位及凋亡方面:与NC组相比,GTW组GC-1spg细胞的G0/G1和G2/M期的百分率显着降低、S期百分率明显升高（P<0.01）。与 GTW 组相比,GTW+LEV 组和 GTW+SC-FL 组 GC-1spg 细胞的 G0/G1 和 G2/M期的生精细胞百分率升高、S期百分率降低（P<0.05,P<0.01）。与GTW+LEV组相比,GTW+SC-FL组GC-1 spg细胞的G0/G1和G2/M期的百分率明显升高、S期百分率降低（P<0.01）。在细胞超微结构方面:与NC组相比,GTW组的GC-1spg细胞膜大面积破裂,细胞器游离,膜周围少量伪足与突起,细胞基质大面积密度减低,空泡变,整体呈崩解状态。细胞核形状变形严重,局部凹陷,多核仁,核膜清晰;线粒体数量丰富,大多重度肿胀变形,嵴断裂、消失,部分严重者,膜崩解、基质消失;粗面内质网明显扩张;自噬溶酶体数量较多,高尔基体肥大,高尔基体池明显扩张;脂滴少量存在。与GTW组相比,GTW+LEV和GTW+SC-FL组GC-1spg各细胞器的超微结构发生明显恢复,各个细胞器形态均有所恢复,但与NC组大鼠相比,其结构尚未完全恢复。在蛋白及mRNA表达方面:与NC组相比,GTW组GC-1spg细胞PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白及mRNA表达显着降低（P<0.01或P<0.05）;与GTW组相比,GTW+LEV组和GTW+SC-FL组GC-1spg细胞PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白及mRNA表达显着上升（P<0.01 或P<0.05）;与 GTW+LEV 组相比,GTW+SC-FL 组 GC-1spg 细胞 PI3K、Bcl-2蛋白及mRNA表达显着上升（P<0.01或P<0.05）,GTW+SC-FL组GC-1 spg细胞p-AKT蛋白及mRNA表达无显着差异（P>0.05）。与NC组相比,GTW组GC-1spg细胞中BAD、BAX蛋白及mRNA表达呈现显着增高的趋势（P<0.01或P＜0.05）;与GTW组相比,GTW+LEV组和GTW+SC-FL组GC-1spg细胞BAD、BAX蛋白及mRNA表达显着下降（P<0.01或P<0.05）;与GTW+LEV组相比,GTW+SC-FL组GC-1spg细胞BAD、BAX蛋白及mRNA表达显着下降（P<0.01或P<0.05）。动物实验研究结果表明,治疗后大鼠一般状况较模型组显着改善。精液常规方面:同NC组比较,GTW组大鼠的精子浓度、PR+NP显着降低（P<0.01）;同GTW组比较,GTW+SC-FL 和 GTW+LEV 组精子浓度、PR+NP 显着增加（P＜0.01）;与 GTW+LEV组比较,GTW+SC-FL组精子浓度显着升高（P<0.01）,GTW+SC-FL组的PR+NP无明显差异（P>0.05）。血清性激素水平方面:与GTW组进行对比发现,GTW+LEV和GTW+SC-FL组血清FSH、LH、T显着升高（P<0.01或P<0.05）;与GTW+LEV组进行对比发现,GTW+SC-FL 组的血清 FSH、LH、T 显着升高（P＜0.01）;在组织结构及超微结构方面:NC组精母细胞形态及结构规则。细胞核（N）丰满且结构形态正常呈圆形,内部含有丰富的常染色质;核仁形态结构明显（NU）;胞浆内内质网（ER）易见,也可见多少不等的溶酶体（AAS）和自噬小体（AP）。GTW组精母细胞形态及结构不规则。细胞膜破损,N结构及形态发生改变呈圆形或椭圆形,常染色质较丰富、少量异染色质凝集;胞浆内ER扩张,也可见多少不等的AAS和AP。经过SC-FL治疗后,被GTW损伤的细胞器有所恢复。在蛋白及mRNA表达方面:与GTW组相比,GTW+LEV组和GTW+SC-FL组PI3K、AKT、Bcl-2蛋白及mRNA表达显着上升（P<0.01或P<0.05）;与GTW+LEV组相比,GTW+SC-FL组PI3K、AKT、Bcl-2蛋白及mRNA表达显着上升（P<0.01或P<0.05）。结论1数据挖掘结果表明,菟丝子、枸杞子为补肾生精法治疗少弱精子症的代表药对;李海松教授治疗少弱精子症以微调阴阳为纲,以补肾生精为目,广嗣育麟汤为李海松教授治疗少弱精子症的经验方。2临床研究结果表明,广嗣育麟汤可以有效改善少弱精子症患者的精液质量,降低肾精亏虚证患者中医症状评分。3实验研究结果表明,SC-FL可以有效改善生精障碍模型大鼠一般状态,提高精液质量,参与下丘脑-垂体-性腺轴性激素的调控,修复GC-1spg和睾丸组织的超微结构;SC-FL可以通过PI3K/AKT信号通路促进生精细胞的增殖和抑制生精细胞的凋亡。综上所述,补肾生精法可以有效治疗肾精亏虚型少弱精子症,其调控PI3K/AKT信号通路蛋白和mRNA是作用机制之一。
赵赢[6]（2021）在《益肾化痰方治疗肾虚痰阻型男性不育症的临床观察》文中指出目的:观察并评估肾虚痰阻型肥胖男性不育症患者,使用益肾化痰方治疗12周的效果。并探究本方对精液常规参数、男性生殖激素及血脂的影响。优化肾虚痰阻型肥胖男性不育症患者的中医治疗方案。材料与方法:收集于2019年9月至2020年12月期间,来到辽宁中医药大学附属医院男科门诊就诊的初诊患者,将辨证为肾虚痰阻型的患者,按照纳入标准从中筛选出70例肥胖男性不育症患者,按照随机数表法分为观察组和对照组,两组均为35例。给予观察组服用益肾化痰方,给予对照组服用还少胶囊进行治疗,一个治疗疗程为12周,两组均治疗观察1个疗程。其中每4周复查一次实验室指标,包括正常精子形态和精液质量主要参数等,并于治疗12周前后增加血脂、生殖激素和精子DNA完整性检测,录入并分析其精液量、精子浓度、精子数量、精子活动性、正常精子形态、核蛋白组型转换、生殖激素水平、血脂和中医临床症状变化评分等观察指标。最后运用spss26软件对所搜集的数据进行统计学分析,根据结果评价其临床疗效,从而取得结论。结果:本临床研究分别有33例对照组和34例观察组,共67例完成了为期12周的临床研究。其后随访12周,随访率80.60%,统计结果,观察组配偶妊娠5人,妊娠率为14.71%,对照组配偶妊娠2人,妊娠率为6.06%。治疗前后对照:两组治疗12周前与12周后的精液主要参数、精子核蛋白组型转换及中医临床症状评分相比,均具有显着性差异（P<0.05）。两组治疗12周前与12周后的生殖激素（T、E2、PRL、LH、FSH）、血脂（血清甘油三酯、总胆固醇）水平比较,无显着性差异（P>0.05）。组间对照:两组治疗12周后的精液主要参数、精子核蛋白组型转换和中医临床症状评分相比,均观察到显着性统计学差异（P<0.05）,且观察组优于对照组。结论:益肾化痰方与还少胶囊治疗肾虚痰阻型肥胖男性不育症患者均具有一定的疗效,且益肾化痰方的起效时间早于还少胶囊,益肾化痰方的总疗效优于还少胶囊。在益肾化痰方的治疗下,肾虚痰阻型肥胖男性不育患者的精液质量参数显着提高,达到正常水平范围,并且临床症状明显好转。
袁晟[7]（2021）在《针挑治疗肾虚血瘀型男性不育畸形精子症的机制研究》文中进行了进一步梳理目的:当今男性不育症影响着世界上超过两千万例患者,已经成为影响男性生殖健康的主要问题之一。畸形精子症常常是男性不育症的一种主要症状,该种疾病的发病机制仍没有被证实,目前临床治疗主要方式是通过药物进行,受到多种因素的共同影响,因此,治疗效果并不显着,可通过辅助生殖技术来进行治疗,最终实现生育。世界上约有8%-12%的夫妇患有不孕不育症,而在这些夫妇当中,其中又有40%-50%是由“男性因素”造成的,并且精液异常是最为普遍的,异常精子至少占1/3左右。精子和卵子能否进行正常的判别主要取决于精子的形态,当精子形态正常时,两者才能够进行正常的相互作用;此外,精子是否能够受精成功也取决于其是否具备正常的形态。精子异常的发病机制十分复杂,影响因素众多,包括以下内容:染色体出现异常、基因发生突变以及缺失、机体的激素失调、免疫功能缺陷、炎症感染等,甚至周围环境也严重影响精子的发育,如在有辐射、有毒的情况下,精索发生了静脉曲张也会影响精子。研究表明,机体内部的氧化应激和精子DNA损伤主要和精子活力有关。相关的研究认为,诸多有害的因素导致精子表面蛋白受体受到了抑制,不能正常接收信号,信号通路的传导受到了阻碍,导致精子的结构出现了异常变化,使精子无法进行正常的运动。其中,如今的研究热门课题大多集中在活性氧过剩、氧化应激和精子DNA损伤等方面。然而,对于流程信息传输的信号路径还没有统一的认识。作为经典的核转录信号转导通路,JAK/STAT信号转导通路能够对细胞的正常生长进行调整,目前,国内外有许多研究表明,JAK2/STAT3信号通路可以基于线粒体介导的氧化损伤活动,以此实现调节细胞凋亡的生命活动;同时,通过激活以及控制JAK2/STAT3信号通路可以调整损伤反应以及细胞凋亡的整个过程。此外,体外实验表明,实验中如果加入了STAT3抑制剂,观察发现精子的活力降低,最终会影响精子的受精过程,使其受精能力降低。但该种信号通路现阶段和精子的形态与对应的功能,以及JAK2/STAT3信号通路的改变是否会造成精子的形态以及功能发生改变,现在还是一个未知数。因此,对于JAK2/STAT3信号通路同精子形态和功能联系的深入研究,极大程度上来说促进了研究精子出现病理改变过程中的发病机制,能够更好的应用在临床上治疗男性不育。中医治疗不育症在中国已有2000多年的悠久历史,从古时候开始就有男性患有不育或精子出现异常,这种患者被称为“无子”,该种疾病的发病机制较复杂,在一定程度上与肾虚和血瘀有紧密的联系。各种因素会导致肾阳不足、下焦虚寒,缺乏温煦,精子出现损伤病变;或肾阴虚,阴虚火旺,煎灼精液,精子灼伤或精气不足,不能促进血液循环,阳虚血管呈现寒凝且血流速度缓慢,甚至出现淤堵现象都会导致出现病态变化。精子不能生存在适宜的环境中,产生畸形精子的可能性增大,精子功能异常,引起不育。对于临床治疗方面来说,针挑疗法可以改善精子存活的微环境,同时能够增加血流量,抵抗缺血、缺氧和氧化应激,从而保护精子免受损伤,治疗异常精子不育。本文采用针挑疗法治疗肾虚血瘀型男性不育症,主要使用精液分析（CASA）的方法,辅助用电脑进行分析,将精子进行染色,并运用流式细胞术（FCM）来检测精子的常规参数、形态以及精子的DNA是否缺失,还要对患者配偶进行跟踪。目的就是探讨针挑治疗对不育症患者的精液参数3、精子形态、精子DFI及妊娠效果等诸多方面治疗效果的分析。除此之外,该研究也使用了蛋白质印迹技术（WB）,通过观察、比较正常与畸形精子的JAK2和STAT3蛋白的表达,从而探究这两种蛋白和精子形态的关联。为了解针挑治疗对精液参数、精子形态及JAK2/STAT3蛋白表达水平的影响,选取CASA、精子形态染色及WB检测治疗前后的精液参数、精子形态及JAK2、STAT3蛋白表达水平的变化。将不同浓度的这两种蛋白的抑制剂（AG490）加入到正常的精子中,此外,分别基于精子形态染色、流式细胞术检测精子的形态和其DFI状况,探究在精子形态改变过程中,JAK2/STAT3信号通路的作用机制,发掘这两种信号通路对精子DFI的作用,有助于研究精子出现畸形的病理机制,并为临床治疗男性不育症提供理论依据。方法:本研究包括临床研究和实验研究两方面:一、临床研究方法:选择2017年3月30日～2018年9月30日在暨南大学附属第一医院（广州华侨医院）新医针挑科因西医维生素E抗氧化等治疗完成后的病患总计80例,但这些病患的临床治疗效果都欠佳,他们的年龄范围都在23～45岁,同时他们都被诊断为男性不育症和精子异常,除此之外要求中医辨证证型为“肾虚血瘀证”的患者。配偶均正常,可受孕。按照随机抽样的原则,受试者分为针挑组（A组）和抗氧化治疗组（B组）。A组（共计40例）:接受针挑治疗（使用国家专利挑针ZL98243187.2,这项专利是由暨南大学第一附属医院的陈栋教授所发明）,治疗的全过程共计12周;B组（共计40例）:每日给患者提供天然维生素E,口服,剂量为100mg,一日2次,治疗的全过程为12周。治疗前及治疗后12周分析比较两组的精液情况,通过对精子的数量、浓度、总活力以及相关参数等方面进行分析。基于Diff-Quik法进行检测精子的形态。同时要计算出正常精子百分占比、异常精子的百分率、异常精子指数（TZI）、精子畸形的指数（SDI）、头缺损率、颈段以及中部的缺损率、尾段的主段缺损率和残余细胞质率;基于密度梯度离心的方法来进行提取精子,以及基于流式细胞仪检测精子形态DFI。经过12周后的全过程的追踪后,及时观察两组患者配偶的妊娠结局,同时观察临床妊娠率、流产率和活产率等方面。二、实验研究方法:（一）使用随机抽样法收集2017年3月30日～2018年9月30日在暨南大学附属第一医院（广州华侨医院）新医针挑科因西医维生素E抗氧化等治疗完成后的病患总计40例,但这些病患的临床治疗效果都欠佳,他们的年龄范围都在23～45岁,同时他们都被诊断为男性不育症和精子异常,除此之外要求中医辨证证型为“肾虚血瘀证”的患者。研究对象为男性不育和精子畸形患者（精子异常组）,同时选择40例健康男性和正常精液作为对照组（正常精子组）,这些健康男性都是同期同年龄范围在暨南大学附属第一医院男性专科诊断为健康的男性。用CASA来对这两组患者的精液情况进行分析,主要比较精子的总数、浓度、活力以及运动有关参数;对精子的形态展开检测,并通过计算得到正常精子和异常精子分别所占的比例,此外,并计算出异常精子指数（TZI）以及精子畸形的指数（SDI）、头缺损率、颈段以及中部的缺损率、尾段的主段缺损率和残余细胞质过剩率;基于密度梯度离心的方法来进行提取精子,同时采用WB法检测JAK2和STAT3的蛋白表达水平。（二）方法:将40例精子异常患者随机分为A组和B组。A组（20例）采用针挑（使用国家专利挑针ZL98243187.2,这项专利是由暨南大学第一附属医院的陈栋教授所发明）,治疗的全过程为12周;B组（20例）为空白组,未进行任何药物治疗;治疗前后12周内,基于CASA分析两组患者的精液常规参数,得出总精子数和精子活力浓度,测定精子总活力和精子运动等诸多参数;基于Diff-Quik法进行检测精子的形态。同时要计算出正常精子百分占比、异常精子的百分率、异常精子指数（TZI）、精子畸形的指数（SDI）、头缺损率、颈段以及中部的缺损率、尾段的主段缺损率和残余细胞质过剩率;基于密度梯度离心的方法来进行提取精子,同时采用WB法检测JAK2和STAT3的蛋白表达水平。（三）使用随机抽样法收集2017年3月30日～2018年9月30日在暨南大学附属第一医院（广州华侨医院）男性专科就诊的健康体检男性40例,正常男性的精子年龄为23-45岁范围,当为诊断为健康后选为研究目标;密度梯度离心后,把不同浓度（0、25、50、100μmol/L）的JAK2/STAT3抑制剂AG490和精子放到体外,然后孵育3小时,再基于Diff-Quik法来进行检测精子的形态,并计算正常精子的百分比。同时,采用流式细胞术来测得精子的DFI。结果:一、临床研究结果:针挑组患者使用针挑进行治疗后,结果发现正常精子的数量、活动率以及向前运动情况（PR）都比治疗前高,精子的DFI、头端缺陷率、尾段缺陷率和残余细胞质过剩率低于治疗前,差异具有统计学意义（P<0.05）;针挑组治疗后精子畸形指数（TZI）、精子异常指数（SDI）、颈段及中部的缺失率均低于治疗前,而且其精液量、浓度、精子总数也明显高于治疗前的表现,但比较差异无统计学意义（P>0.05）。维生素E组精子形态正常率高于治疗前,尾部缺损率较治疗前低,差异均有统计学意义（P<0.05）。此外,结果发现在治疗后,精子的畸形指数TZI、异常指数SDI均降低,头端和缺陷率、残余细胞质超额速率也分别有所降低;与治疗前相比,精液的总量、精子的总数、精子活力和精子前向运动（PR）显着的增加,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）;正常形态精子的比例,精子数量、精子的运动性,头端缺陷率和颈段及中部的缺陷率增加,但对比治疗前后,发现精子的畸形指数（TZI）和异常指数（SDI）、精子浓度、精子总数无统计学差异（P>0.05）。二、实验研究结果:（一）对于正常精子组和异常精子症组来说,JAK2和STAT3蛋白在正常组中的表达水平更高,且发现这两种蛋白在异常精子症组的表达水平明显的下降,异常精子组JAK2、STAT3蛋白表达水平明显低于正常精子组,表明正常精子组和异常精子症组的差异具有统计学意义（P<0.05）。正常精子组和异常精子组中正常精子百分比与JAK2、STAT3蛋白表达呈正相关,差异均表现为统计学意义（P<0.05）;异常精子百分比、TZI、SDI均与这两种蛋白表达呈负相关关系,且差异有统计学意义（P<0.05）;头、颈、中段缺损率与JAK2蛋白、STAT3蛋白表达呈非线性关系;残余细胞质过剩率同STAT3、JAK2蛋白表达不呈相关,表明差异不具有统计学意义（P>0.05）。（二）比较针挑组和非治疗组中JAK2蛋白和STAT3蛋白的表达情况,发现这两种蛋白在针挑组中的表达高于非针挑组,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。经过对二者的对比发现,针挑组治疗后,正常精子形态百分比、精子活力、PR、以及两种蛋白的水平均明显增高,与治疗前相比,具有统计学差异（P<0.05）。此外,结果发现精液体积、以及精子浓度较治疗前高,TZI、SDI均低于治疗前,差异表现为无统计学意义（P>0.05）;正常精子形态的比例、精液量、精子浓度、精子的快速前向运动性、精子的慢速前向运动性、精子的运动性、精子活力明显高于治疗前,TZI和JAK2蛋白质在非治疗组高于治疗前,SDI和STAT3高于治疗前,同时蛋白质表达低于治疗前,表现的差异具有明显的统计学意义（P<0.05）。（三）对比使用AG490孵育和未使用AG490孵育的正常形态精子百分比和精子DFI结果显示,正常形态精子百分比随AG490浓度的增加而降低,精子DFI随AG490浓度的增加而增加,表现的差异具有明显的统计学意义（P<0.05）,但是两者之间不存在相关性（r=0.24,P=0.14）。结论:1.针挑治疗可以提高精子形态正常率,降低精子DFI,降低精子头尾缺损率,提高配偶妊娠率。2.对于正常精子组和异常精子症组来说,正常精子组JAK2和STAT3蛋白表达高于异常精子组,同时JAK2和STAT3蛋白在异常精子症组的表达水平明显的下降,异常精子组JAK2、STAT3蛋白表达水平明显低于正常精子组。针挑可提高精子形态正常率,可能与JAK2、STAT3蛋白表达增加及JAK2/STAT3信号通路激活有关。3.AG490是一种JAK2/STAT3抑制剂,可降低正常精子形态百分比,增加精子DFI。正常精子百分比的下降和精子DFI的增加可能与JAK2/STAT3信号转导通路的抑制有关。
郑凌琦[8]（2021）在《卵巢储备功能下降中医证素分析及乌萸汤对小鼠线粒体能量代谢影响》文中提出近些年来,随着生殖医学的发展,对卵巢储备功能下降（Decreased ovarian reserve,DOR）的研究逐渐深入。DOR患者的卵母细胞数量减少、质量下降,明确影响了女性生殖功能。线粒体能量代谢决定卵细胞质量,AMPK是细胞内调节能量代谢的关键。本研究包括临床研究和实验研究两个部分。临床研究DOR患者的中医证候特点及证素辨证规律,为临床探讨该病的病因病机及治则治法提供依据。实验研究通过线粒体能量代谢、氧化应激和AMPK/PGC-1α通路,探讨补肾调肝法之乌萸汤改善DOR小鼠卵母细胞质量的作用机制。临床部分目的:初步研究DOR患者的中医证候特征及证素辨证规律,并为探讨该病的病因病机及治则治法提供依据。方法:本研究通过问卷调查及病例回顾,制定《DOR患者信息采集表》,对DOR患者患病情况、发病诱因、病程病史、症状体征、舌脉、实验室检查、辅助检查结果等信息进行采集,并据《DOR证候统计表》、《DOR证素统计表》和《DOR证素统计权值表》对患者进行证候、证素的统计判定及相关性分析。结果:1、有64.79%的患者存在情志因素,以压力大、工作紧张为主。不孕/不育、月经不调是患者就诊的主要诉求,分别占50.70%、35.21%。74.65%的患者病程大于1年以上,56.34%患者不孕,46.48%患者有流产/手术史。2、患者月经改变主要是月经夹块（43.66%）、月经量少（39.44%）、经色暗红（29.58%）、痛经（26.76%）、月经推迟（15.49%）、月经提前（11.27%）、月经量多（11.27%）、月经错乱（9.86%）、闭经（5.63%）。其他相关症状还包括睡眠不实（23.94%）、经常便溏（22.54%）、腰膝酸软（21.13%）、倦怠乏力（19.72%）、失眠（16.90%）、经前乳胀（16.90%）、经常便秘（14.08%）、小腹痛（14.08%）、腰痛（12.68%）、四末凉（11.27%）。舌象主要是舌暗红（74.65%）、舌淡（15.49%）、舌赤（15.49%）,苔薄白（70.42%）,脉象有脉细（98.59%）、脉滑（78.87%）、脉沉（12.68%）、脉弦（8.45%）等。3、DOR患者病位证素主要为胞宫（55.43%）、肝（17.39%）、肾（14.13%）,病性证素主要为血瘀（20.81%）、气滞（18.50%）、血虚（15.03%）、阴虚（15.03%）、阳虚（12.72%）、气虚（11.56%）。同类证素常常兼夹致病,病位证素兼夹占46.55%,主要有胞宫与肝同病（19.71%）、胞宫与肾同病（14.08%）;病性证素兼夹占66.18%,主要有血瘀兼气滞（35.21%）、血瘀兼阳虚（19.71%）、气滞兼阴虚（19.71%）、血虚兼气虚（18.31%）、气虚兼阳虚（18.31%）。4、患者证素与年龄、血清b-FSH、AMH、AFC之间无统计学相关性;病位在肾的证素分布积分有随年龄增加而增大的相关趋势,但无统计学差异。结论:1、情志因素是DOR的主要病因,不孕/不育、月经不调是患者就诊的主要诉求,该病主要影响了患者的生殖功能并引起月经改变;2、DOR病位主要在胞宫、肝、肾,出现了血瘀、气滞、血虚、阴虚、阳虚、气虚等病理变化,且同类证素常常兼夹致病;3、证素与年龄、血清b-FSH、AMH、AFC之间无统计学相关性。实验部分目的:对以补肾调肝法立法组方的乌萸汤含药血清进行活性成分分析;探讨线粒体能量代谢、氧化应激和AMPK/PGC-1α通路对DOR小鼠卵巢功能的影响,并据此分析乌萸汤的疗效机制;采用未成熟卵母细胞体外成熟培养（In vitro maturation,IVM）技术,探讨乌萸汤促进体外培养卵母细胞成熟的作用机制,进而证实乌萸汤改善小鼠卵巢储备功能、增加卵巢反应性,促进卵母细胞成熟、改善卵母细胞质量的作用。方法:1、采用飞行时间质谱对SD大鼠乌萸汤含药血清进行药物代谢后活性成分及药效物质分析;2、动物实验以DOR小鼠为研究对象,经乌萸汤干预后促排卵,检测小鼠动情周期、卵巢储备功能（血清AMH及卵巢组织形态）、卵巢反应性及生殖功能（卵母细胞形态、获卵率、卵母细胞成熟率及受精率）、能量代谢及细胞增殖能力（卵母细胞ATP、线粒体含量形态、ROS含量、α-tubulin及Ki67表达量）,通过RT-PCR及Western Blot法检测 AMPK/PGC-1α通路（AMPKα、PGC-1α、NRF1、NRF2）的 mRNA 和蛋白表达;3、细胞实验采用IVM技术,对DOR小鼠卵母细胞进行乌萸汤体外干预,检测卵母细胞第一极体排出率、线粒体能量代谢（ATP含量、线粒体含量、线粒体膜电位变化）、氧化应激水平（ROS含量、SOD酶活力）及AMPK/PGC-1α通路（AMPKα、p-AMPKα、PGC-1α、NRF1、NRF2）的蛋白表达。结果:1、乌萸汤含药血清飞行时间质谱分析显示,按质谱响应强度排序,前20种活性成分依次为:亚油酸、（2S）-2-氨基-3-苯基丙酸、亮氨酸、邻苯二甲酸双（6-甲基庚基）酯、柠檬酸、亚麻酸、十六酸乙酯、棕桐油酸、3,5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛、L-蛋氨酸-35S、2-单棕榈酸甘油、苯甲酸、芥酸酰胺、香豆素、亚油酸乙酯、杜松醇、肉豆蔻酸、硬脂酰胺、十六碳酰胺、芳-姜黄烯。2、动物实验发现DOR小鼠较正常组小鼠动情周期延长、血清AMH降低（P<0.05）,促排后获卵数、卵母细胞成熟率和受精率均降低（P<0.05）,卵母细胞线粒体含量减少、ATP含量降低、ROS含量明显升高（P<0.05）,卵巢组织α-tubulin和Ki67阳性表达率降低（P<0.05）,且卵母细胞、线粒体形态欠佳,AMPK、PGC-1α、NRF1及NRF2的mRNA含量及蛋白含量均表达下降（P<0.05）。乌萸汤可以提高DOR小鼠卵母细胞成熟率,升高血清AMH、卵母细胞ATP、线粒体和ROS含量（P<0.05）,改善卵母细胞和线粒体形态,提高卵巢组织α-tubulin和Ki67阳性表达率（P<0.05）,提高AMPK、PGC-1α、NRF1 及 NRF2 的 mRNA 含量及蛋白含量（P<0.05）。3、细胞实验发现DOR小鼠卵母细胞第一极体排出率下降,线粒体数目减少、膜电位变化减弱（P<0.05）,产生的ATP减少、ROS增加、SOD酶活性降低（P<0.05）,AMPKα、p-AMPKα、PGC-1α、NRF1蛋白表达降低（P<0.05）;乌萸汤干预后的DOR小鼠卵母细胞第一极体排出率、线粒体数量、产生的ATP含量、SOD酶活性均有明显升高（P<0.05）,AMPKα、PGC-1α、NRF1蛋白表达量有所升高（P<0.05）,但卵母细胞线粒体膜电位、ROS含量没有得到改善（P>0.05）。结论:1、乌萸汤含药血清内有效活性成分中脂肪酸类物质质量占比最高,提示乌萸汤含药血清中活性成分主要用来提供能量来源,促进能量代谢。2、动物实验证实乌萸汤能改善DOR小鼠卵巢储备功能及卵巢反应性,提高卵母细胞质量、增强小鼠生殖能力。3、细胞实验证实乌萸汤能促进DOR小鼠卵母细胞的体外成熟、改善卵细胞质量。4、乌萸汤对DOR小鼠的治疗机制之一是通过改善线粒体能量代谢及氧化应激、调控AMPK/PGC-1 α通路实现的。
卢桂林[9]（2021）在《补肾祛湿法对肾虚湿热型不育患者精子氧化应激水平及DFI影响的临床研究》文中研究表明目的:从补肾祛湿角度出发治疗男性不育症,观察其临床疗效,对比分析其对精液参数、精子DNA碎片率（DFI）、精子氧化应激水平及中医证候积分的影响。探讨补肾祛湿法对降低精子氧化应激水平、精子DNA碎片率（DFI）的相关作用机制,为中医药临床治疗男性不育症提供新思路。方法:本次研究所有病例选取南京中医药大学常州附院男科门诊2020年2月至2020年11月男性不育症就诊患者,符合诊断标准及纳入标准,且不符合排除标准,共计80例,年龄在22-50岁,选用随机数字表法将80例患者分为2组,治疗过程中治疗组脱落3例患者,对照组脱落5例患者,最终72例（治疗组共计37例,对照组共计35例）数据进入统计与分析。治疗组予内服中药方加减聚精汤,对照组予维生素E软胶囊口服治疗,两组患者遵医嘱治疗1个疗程3个月。治疗前后分别检测精液参数（精液量、液化时间、精子浓度、总活力（PR+NP）、前向运动精子比率（PR）、正常形态精子比率）、精子氧化应激水平、精子DNA碎片率（DFI）,记录与观察治疗后中医证候积分、配偶怀孕例数等相关数据。最后对所得数据采用SPSS进行统计学分析,判断临床疗效,通过比较治疗后组间精子氧化应激水平及精子DNA碎片率,评估中医药对其疗效及探讨相关机制。结果:疗效指标方面:治疗组与对照组通过治疗前后数值的对比发现均可增加精液量,降低液化时间,疗效显着,存在统计学差异（P<0.05）,但治疗后组间疗效对比不存在统计学差异（P>0.05）;治疗组与对照组均可提高精子浓度、向前运动精子比率（PR）、总活力（PR+NP）、正常形态精子比率,降低精子DNA碎片率（DFI）、精子氧化应激水平,改善中医证候积分,存在统计学差异（P<0.05）,且治疗组（中药组）优于对照组,统计学存在显着差异（P<0.05）。西医疗效评价方面:治疗组37例:痊愈3人,显效11人,有效18人,无效5人,总有效率86.49%;对照组35例:痊愈2人,显效9人,有效15人,无效9人,总有效率74.29%。中医疗效评价方面:治疗组37例:痊愈6人,显效12人,有效16人,无效3人,总有效率91.89%;对照组35例:痊愈3人,显效7人,有效19人,无效6人,总有效率82.86%。结论:1.补肾祛湿法治疗男性不育症效果显着,可明显提高患者配偶受孕几率。2.补肾祛湿法可明显增加精子密度,提高精子总活力及精子向前运动速度,降低精子畸形率及精子氧化应激水平,保护与修复精子DNA完整性。3.补肾祛湿法对改善精子氧化应激及DNA受损作用明确,其相关机制可能为通过调节下丘脑-垂体-性腺轴功能,增强男性体内激素水平,使生精细胞功能得以重新调节,改善男性精液质量参数;同时提升机体抗氧化酶活性,抑制活性氧生成,增强抗氧化能力,使精子免遭氧化应激所致损伤,有效保护细胞核及线粒体DNA,避免细胞结构遭到破坏,使精子DNA的完整性得以保障,保障精子DNA免于受损的同时可起到相关修复作用,从而降低氧化应激水平及精子DNA碎片率。
梅自芳[10]（2021）在《针刺联合左卡尼汀口服液治疗肾阳不足型弱精子症的临床疗效观察》文中研究表明1目的观察针刺与左卡尼汀口服液联用对肾阳不足型弱精子症患者的临床疗效。2方法依据研究要求挑选70例肾阳不足型弱精子症患者,随机分成实验组和对照组,每组各为35人。对照组服用左卡尼汀口服液,每次1支,早晚与餐同服。治疗组在对照组的基础上另加上针刺治疗,在充分得气后留针20分钟,中间行针1次,每周2次。经过12周治疗后,比较治疗前后两组患者精液体积、精子浓度、前向运动精子（PR）百分比、精子总活力（PR+NP）、精浆锌、精浆中性-α葡萄糖苷酶、精浆果糖、中医证候积分的变化。3结果（1）总有效率方面:经过为期12周的连续治疗后,治疗组总有效率为91.43%;对照组总有效率为71.42%,两组整体疗效相比照具有统计学意义（P<0.05）。（2）中医证候积分方面:两组患者治疗后的中医症候积分均较治疗前降低（P<0.05）,但治疗组较对照组症状改善更明显（P<0.01）,治疗组与对照组的有效率分别为88.57%、65.71%,在显效率上治疗组更优于对照组。（3）精液质量方面:两组经过治疗后,精液中PR+NP、PR均较前提高（P<0.01）,治疗组的PR+NP、PR提高更显着（P<0.01）。两组治疗后的精液体积、精子浓度均较治疗前增加,但组间比较无统计学意义（P>0.05）,治疗效果无明显差异。（4）精浆生化方面:与治疗前相比,治疗后两组精浆锌、中性-α葡萄糖苷酶、果糖水平较前改善（P<0.01）,治疗组改善程度更明显（P<0.01）。4结论针刺联合左卡尼汀口服液治疗肾阳不足型弱精子症患者具有明显的临床疗效,与对照组相比能够更好提高精液中前向运动精子百分比、精子总活力、精浆锌、精浆中性-α葡萄糖苷酶、精浆果糖的水平,同时可改善肾阳不足的临床症状。
二、中医药治疗特殊精子形态的病例分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、中医药治疗特殊精子形态的病例分析（论文提纲范文）
（1）金龟毓麟方治疗特发性弱精子症（肾虚肝郁型）临床观察及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 男性不育症中医药诊疗研究进展 |
| 1. 男性不育症中医病名认识 |
| 2. 男性不育症病因病机 |
| 3. 补肾法为主的男性不育症中医药治疗 |
| 4. 补肾法为主治疗男性不育症的相关机制 |
| 参考文献 |
| 综述二 特发性弱精子症现代医学诊治研究进展 |
| 1. 特发性弱精子症流行病学 |
| 2. 特发性弱精子症诊断 |
| 3. 特发性弱精子症可能病因及机制 |
| 3.1 氧化应激损伤 |
| 3.2 线粒体功能障碍 |
| 3.3 表观遗传学作用 |
| 3.4 基因异常 |
| 3.5 精子蛋白组差异 |
| 3.6 翻译后修饰 |
| 3.7 环境因素 |
| 3.8 不良生活方式 |
| 3.9 精神心理因素 |
| 4. 特发性弱精子症的治疗 |
| 4.1 一般治疗 |
| 4.2 药物治疗 |
| 4.3 辅助生殖技术 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 金龟毓麟方治疗特发性弱精子症(肾虚肝郁型)的有效性及安全性临床研究 |
| 前言 |
| 1. 研究伦理 |
| 2. 研究对象 |
| 2.1 病例来源 |
| 2.2 诊断标准 |
| 2.3 纳入标准 |
| 2.4 排除标准 |
| 2.5 中止/退出标准 |
| 2.6 中止/退出病例的处理 |
| 3. 研究方法 |
| 3.1 分组及样本量计算 |
| 3.2 研究用药及疗程 |
| 3.3 观察指标及观察时点 |
| 3.4 精液采集及精液分析 |
| 4. 统计学分析 |
| 5. 研究结果 |
| 5.1 试验入组及完成情况 |
| 5.2 一般资料分析 |
| 5.3 有效性分析 |
| 5.4 安全性分析 |
| 6. 讨论 |
| 7. 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 金龟毓麟方对奥硝唑诱导弱精子症模型的药效学研究 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 动物伦理 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 主要实验试剂与药品 |
| 1.5 实验方法 |
| 1.6 实验检测指标 |
| 1.7 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 大鼠一般情况变化 |
| 2.2 大鼠体重、睾丸、附睾重量变化 |
| 2.3 大鼠睾丸、附睾脏器指数变化 |
| 2.4 大鼠精子浓度变化 |
| 2.5 大鼠精子活力变化 |
| 2.6 大鼠性激素水平变化 |
| 2.7 大鼠睾丸、附睾HE染色变化 |
| 2.8 大鼠肝肾功指标变化 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 ORN诱导的弱精子症大鼠模型的构建 |
| 3.2 金龟毓麟方对改善大鼠弱精子症的有效性分析 |
| 3.3 金龟毓麟方对改善大鼠弱精子症的安全性分析 |
| 4. 小结 |
| 实验二 基于Pink1/Parkin信号通路研究金龟毓麟方调控线粒体自噬改善ORN诱导的弱精子症大鼠的作用机制 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 实验检测指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 大鼠精子GSH-Px、SOD及MDA及变化 |
| 2.2 大鼠精子MMP及早期凋亡率变化 |
| 2.3 大鼠精子线粒体ATP变化 |
| 2.4 大鼠Pink1、Parkin、p62和LC3Ⅱ/Ⅰ、TOM20、Beclin 1mRNA及蛋白表达变化 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
| 附件1 |
| 附件2 |
| 中医药科技查新报告书 |
（2）柴橘强精煎联合硫辛酸治疗精子DNA损伤的临床观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 临床研究 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 病例诊断标准 |
| 1.3 病例选择标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 分组方法 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.3 标本采集及检测方法 |
| 3 疗效观察指标 |
| 4 疗效判定标准 |
| 5 统计学方法 |
| 6 观察结果 |
| 6.1 一般信息比较 |
| 6.2 临床疗效比较 |
| 6.3 精子DFI比较 |
| 6.4 精液参数比较 |
| 6.5 中医症状积分比较 |
| 6.6 药物安全性评价 |
| 第二部分 讨论 |
| 1 男性不育症 |
| 2 精子DNA损伤 |
| 3 硫辛酸 |
| 4 中医对男性不育症的认识 |
| 5 方药分析 |
| 6 小结 |
| 7 本次观察存在的不足和展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 精子DNA损伤研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间科研经历 |
（3）萆薢强精煎治疗合并慢性前列腺炎的弱精子症临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分:资料与方法 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 脱落标准 |
| 2 研究方案及方法 |
| 2.1 随机分组方法 |
| 2.2 干预措施 |
| 2.3 疗程 |
| 2.4 疗效评价 |
| 2.5 疗效观察判断 |
| 2.6 评价时点 |
| 2.7 不良事件(随时记录) |
| 2.8 统计方法 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 观察完成情况 |
| 3.2 治疗前比较 |
| 3.3 疗效对比 |
| 3.4 组内治疗前后精液结果、临床疗效、PSEP对比 |
| 3.5 相关性分析 |
| 3.6 观察指标治疗前后对比 |
| 3.7 小结 |
| 第二部分:讨论 |
| 1 不育症与精液质量关系 |
| 2 现代医学对精液质量低下的认识 |
| 2.1 少精子症发病机理 |
| 2.2 弱精子症发病机理 |
| 2.3 畸形精子症发病机理 |
| 3 中医学对精液质量低下的认识 |
| 4 少弱精子症的现代医学治疗 |
| 5 少弱精子症的中医治疗 |
| 6 慢性前列腺炎概述 |
| 6.1 现代医学对慢性前列腺炎的认识 |
| 6.2 中医学对慢性前列腺炎的认识 |
| 6.3 PSEP与慢性前列腺炎 |
| 6.4 慢性前列腺炎的治疗 |
| 7 慢性前列腺炎与精子质量低下的关系 |
| 8 左卡尼汀 |
| 9 前列平胶囊 |
| 10 萆薢强精煎方药分析 |
| 11 现象讨论与分析 |
| 12 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 缩略词表或索引 |
| 综述 精液质量异常的中西医研究状况 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（4）“标本配穴”针刺对反复移植失败患者妊娠结局的影响及调控胚胎着床障碍大鼠细胞因子表达的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表(Abbreviation) |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 针刺治疗改善体外受精-胚胎移植妊娠结局的meta分析 |
| 1. 研究方法 |
| 1.1. 文献检索方法 |
| 1.2. 文献的筛选与纳入方法 |
| 1.3. 纳入文献的质量评价方法 |
| 1.4. 文献数据合并与分析方法 |
| 1.5. 亚组分析方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 文献检索结果 |
| 2.2. 纳入研究的特征 |
| 2.3. 文献的出版形式 |
| 2.4. 文献质量评价结果 |
| 2.5. 妊娠结局指标的meta分析结果 |
| 2.6. 亚组分析结果 |
| 2.7. 发表偏倚 |
| 3. 讨论 |
| 3.1. 结果分析 |
| 3.2. 本次meta分析研究的意义 |
| 3.3. 本次meta分析的局限性 |
| 3.4. 未来研究的展望 |
| 4. 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章 “标本配穴”针刺治疗对反复移植失败患者妊娠结局的影响 |
| 1.资料与方法 |
| 1.1.病例资料 |
| 1.2.治疗方法 |
| 1.3.观察指标 |
| 1.4.统计学方法 |
| 2.结果 |
| 2.1.两组患者治疗后临床妊娠率比较 |
| 2.2.两组患者治疗后活产率比较 |
| 2.3.两组患者血清 IL-10、TNF-α含量及 TNF-α/IL-10 比较 |
| 2.4.两组患者治疗前后子宫内膜厚度与形态的比较 |
| 2.5.两组患者治疗前后 SAS、SDS 得分比较 |
| 2.6.两组患者治疗后不良反应发生率比较 |
| 2.7.“标本配穴”针刺治疗 RIF 患者典型病例 |
| 3.讨论 |
| 3.1.结果分析 |
| 3.2.中医对反复移植失败的认识 |
| 3.3.选穴依据 |
| 3.4.“标本配穴”理论在各疾病中的应用进展与优势 |
| 3.5.针灸应用于辅助生殖临床研究的问题与展望 |
| 3.6.本章研究的不足 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 第三章 “标本配穴”针刺对胚胎着床障碍大鼠细胞因子表达的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1.实验动物 |
| 1.2.主要试剂与仪器 |
| 1.3.主要溶液的配制方法 |
| 1.4.分组与造模 |
| 1.5.干预方法 |
| 1.6.取材方法 |
| 1.7.观察指标及检测方法 |
| 1.8.统计学方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 大鼠胚胎着床数比较 |
| 2.2. 大鼠血清IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量比较 |
| 2.3. 大鼠子宫内膜IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α的蛋白表达比较 |
| 2.4. 大鼠子宫内膜 IL-10、IL-4、IFN-γ、TNF-α的 mRNA 表达比较 |
| 3. 讨论 |
| 3.1. 胚胎着床障碍大鼠模型 |
| 3.2. IL-4、IL-10与妊娠的关系 |
| 3.3. IFN-γ、TNF-α与妊娠的关系 |
| 3.4. Th1/Th2平衡与妊娠的关系 |
| 3.5. 本章研究的不足与展望 |
| 4. 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录一 综述体外受精-胚胎移植反复移植失败的诊断标准与致病因素研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录二 第一章亚组分析结果(森林图) |
| 1. 临床妊娠率的亚组分析结果(森林图) |
| 2. 活产率的亚组分析结果(森林图) |
| 附录三 攻读博士学位期间发表论文 |
| 致谢 |
（5）补肾生精法治疗少弱精子症的数据挖掘及其调控生精细胞的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 肾藏精理论及补肾生精法源流探讨 |
| 1 春秋战国秦汉——奠定补肾生精法基础 |
| 2 魏晋隋时期——对补肾生精法的继承创新 |
| 3 唐宋元时期——补肾生精理论趋于完善、系统化 |
| 4 明清时期——补肾生精理论蓬勃发展 |
| 5 总结 |
| 参考文献 |
| 综述二 补肾生精法治疗少弱精子症相关动物实验及细胞实验研究述评 |
| 1 对于少弱精子症动物模型构建 |
| 2 补肾生精法治疗少弱精子症相关体内实验研究 |
| 3 补肾生精法治疗少弱精子症相关体外实验 |
| 4 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 数据挖掘研究 |
| 研究一 基于数据挖掘的李海松教授治疗少弱精子症用药特点与规律 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 研究二 基于中国专利数据库的少弱精子症用药规律挖掘 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 网络药理学研究 |
| 网药研究 基于网络药理学探讨菟丝子枸杞子治疗少弱精子症的作用机制 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 临床研究 |
| 临床研究 广嗣育麟汤治疗肾精亏虚型少弱精子症的临床研究 |
| 前言 |
| 临床资料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五部分 实验研究 |
| 实验研究一 体外实验——菟丝子-枸杞子对GTW诱导精原细胞生精障碍模型的影响及机制探讨 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验研究二 体内实验——菟丝子-枸杞子对GTW诱导少弱精子症模型大鼠生精功能的影响及机制探讨 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 在读期间主要研究成果 |
（6）益肾化痰方治疗肾虚痰阻型男性不育症的临床观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 肥胖与男性不育症的中西医研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）针挑治疗肾虚血瘀型男性不育畸形精子症的机制研究（论文提纲范文）
| 广州中医药大学研究生学位(毕业)论文答辩委员会名单及评定意见 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1.1.男性不育症、畸形精子症的研究概况 |
| 1.2.JAK2/STAT3信号通路与抑制剂的调节作用 |
| 1.3.中医对男性不育以及异常精子症的相关研究 |
| 1.4.针挑治疗对精子影响 |
| 第二章 临床研究 |
| 2.1.针挑治疗男性不育畸形精子症的临床研究 |
| 2.1.1.材料 |
| 2.1.2.方法 |
| 2.1.3.结果 |
| 2.1.4.讨论 |
| 2.1.5.结论 |
| 第三章 实验研究 |
| 3.1 针挑治疗对JAK2/STAT3信号通路的作用 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.1.3 结果 |
| 3.1.4 讨论 |
| 3.1.5 结论 |
| 3.2 抑制剂AG490体外对DNA碎片化指数的作用分析 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 方法 |
| 3.2.3 结果 |
| 3.2.4 讨论 |
| 3.2.5 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 研究生在学期间科研和发表论着情况 |
| 致谢 |
| 统计学审核证明 |
（8）卵巢储备功能下降中医证素分析及乌萸汤对小鼠线粒体能量代谢影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 研究进展 |
| 第一节 现代医学关于卵巢储备功能下降的研究进展 |
| 1 卵巢储备及卵巢储备功能 |
| 2 病因及致病机制 |
| 3 诊断标准 |
| 4 治疗方法 |
| 5 能量代谢与卵细胞质量 |
| 参考文献 |
| 第二节 中医学对卵巢储备功能下降的认识及研究进展 |
| 1 病因病机认识 |
| 2 证型分布 |
| 3 治法用方 |
| 4 总结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二章 卵巢储备功能下降中医证素研究 |
| 第一节 研究内容及方法 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究对象 |
| 3 研究方法 |
| 第二节 研究结果 |
| 1 患者一般情况 |
| 2 就诊情况 |
| 3 辅助检查 |
| 4 证候分布情况 |
| 5 证素分布情况 |
| 6 证素及其相关影响因素 |
| 第三节 讨论 |
| 1 疾病特点 |
| 2 病因病机分析 |
| 3 中医治则治法 |
| 4 能量代谢与肝、肾、气血 |
| 第四节 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 实验研究 |
| 实验一 乌萸汤含药血清制备及活性成分分析 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 乌萸汤对DOR小鼠卵巢储备功能及能量代谢的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 实验三 乌萸汤对DOR小鼠卵母细胞体外培养的能量代谢相关影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 创新点与展望 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（9）补肾祛湿法对肾虚湿热型不育患者精子氧化应激水平及DFI影响的临床研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 理论研究 |
| 1、男性不育症的西医研究 |
| 1.1 定义 |
| 1.2 病因及病理 |
| 1.2.1 病因 |
| 1.2.2 危险因素 |
| 1.2.3 病理 |
| 1.3 男性不育症的西医治疗 |
| 1.3.1 常规治疗 |
| 1.3.2 药物治疗 |
| 1.3.3 手术治疗 |
| 1.3.4 辅助生殖技术 |
| 2、男性不育症的中医药研究 |
| 2.1 起源与发展 |
| 2.2 病因病机 |
| 2.2.1 古代中医对男性不育症的病因病机认识 |
| 2.2.2 现代中医对男性不育症的病因病机认识 |
| 2.3 中医治疗 |
| 2.3.1 中药治疗 |
| 2.3.2 针灸治疗 |
| 2.3.3 其他疗法 |
| 3、精子氧化应激及精子DNA碎片率 |
| 3.1 相关定义 |
| 3.2 精子氧化应激及精子DNA碎片率与男性不育症的关系 |
| 3.3 精子氧化应激及精子DNA碎片率的治疗现状 |
| 3.3.1 西药治疗 |
| 3.3.2 手术治疗 |
| 3.3.3 中医药治疗 |
| 第二章 临床研究 |
| 1、临床资料 |
| 1.1 研究内容 |
| 1.2 一般资料 |
| 1.3 诊断标准 |
| 1.3.1 男性不育症西医诊断标准 |
| 1.3.2 肾虚湿热证中医辨证标准 |
| 1.3.3 精液质量正常诊断标准 |
| 1.3.4 精子氧化应激水平诊断标准 |
| 1.3.5 精子DNA碎片率异常诊断标准 |
| 1.4 病例观察标准 |
| 1.4.1 纳入标准 |
| 1.4.2 排除标准 |
| 1.4.3 剔除标准 |
| 1.4.4 脱落标准及处理 |
| 2、研究方法 |
| 2.1 治疗方法 |
| 2.1.1 基础治疗 |
| 2.1.2 药物治疗 |
| 2.1.3 疗程及终点 |
| 2.1.4 注意事项 |
| 2.2 观察内容 |
| 2.2.1 一般观察内容 |
| 2.2.2 疗效性观察 |
| 2.2.3 观察节点 |
| 2.3 疗效判断标准 |
| 2.3.1 现代医学疗效评价标准 |
| 2.3.2 中医证侯疗效评价标准 |
| 2.4 统计方法 |
| 3、研究结果 |
| 3.1 治疗前两组间一般资料统计分析 |
| 3.2 治疗前后两组相关疗效指标对比分析 |
| 3.3 治疗后两组间总体疗效统计分析 |
| 3.3.1 西医总体疗效比较 |
| 3.3.2 中医证候总体疗效比较 |
| 第三章 讨论 |
| 1、补肾祛湿法治疗男性不育症的立论依据 |
| 1.1 西医对男性不育症治疗的局限性 |
| 1.2 中医对男性不育症治疗的优势 |
| 2、加减聚精汤的选药依据 |
| 3、本研究的治疗结果分析 |
| 4、补肾祛湿法治疗不育患者精子氧化应激及DNA损伤的探讨 |
| 5、总结 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 本实验的不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（10）针刺联合左卡尼汀口服液治疗肾阳不足型弱精子症的临床疗效观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 理论研究 |
| 1 中医对弱精子症的认识 |
| 1.1 历史源流 |
| 1.2 病因 |
| 1.3 病机 |
| 1.4 辩证分型及论治 |
| 2 现代医学对弱精子症的认识 |
| 2.1 弱精子症的主要发病机制 |
| 2.2 弱精子症的主要病因 |
| 2.3 治疗方法 |
| 临床研究 |
| 1 对象和方法 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 一般资料 |
| 2 诊断、纳入及排除标准 |
| 2.1 诊断标准 |
| 2.2 纳入标准 |
| 2.3 排除标准 |
| 2.4 中止、脱落标准 |
| 3 研究方案 |
| 3.1 病例分组 |
| 3.2 治疗方案 |
| 3.3 主要仪器、试剂及检测方法 |
| 3.4 观察指标 |
| 3.5 不良事件处理 |
| 3.6 临床疗效判定及标准 |
| 3.7 统计学处理方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 治疗前后中医证候变化 |
| 4.2 中医疗效 |
| 4.3 治疗前后精液体积变化 |
| 4.4 治疗前后精子浓度变化 |
| 4.5 治疗前后PR+NP、PR变化 |
| 4.6 治疗前后精浆锌、中性-α葡萄糖苷酶、果糖变化 |
| 4.7 临床综合疗效 |
| 4.8 两组病例脱落和副作用发生情况 |
| 讨论 |
| 1 左卡尼汀与弱精子症 |
| 2 针刺疗法与弱精子症 |
| 2.1 调护生殖轴 |
| 2.2 抗氧化作用 |
| 2.3 针刺选穴意义 |
| 3 针药联合与弱精子症 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 肾阳不足型患者中医症状评分表 |
| 综述 中医药治疗男性不育症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
四、中医药治疗特殊精子形态的病例分析（论文参考文献）
- [1]金龟毓麟方治疗特发性弱精子症（肾虚肝郁型）临床观察及机制研究[D]. 张继伟. 中国中医科学院, 2021(02)
- [2]柴橘强精煎联合硫辛酸治疗精子DNA损伤的临床观察[D]. 邓学易. 广西中医药大学, 2021(02)
- [3]萆薢强精煎治疗合并慢性前列腺炎的弱精子症临床研究[D]. 黄益辉. 广西中医药大学, 2021(02)
- [4]“标本配穴”针刺对反复移植失败患者妊娠结局的影响及调控胚胎着床障碍大鼠细胞因子表达的研究[D]. 邓超. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [5]补肾生精法治疗少弱精子症的数据挖掘及其调控生精细胞的机制研究[D]. 王继升. 北京中医药大学, 2021(01)
- [6]益肾化痰方治疗肾虚痰阻型男性不育症的临床观察[D]. 赵赢. 辽宁中医药大学, 2021(02)
- [7]针挑治疗肾虚血瘀型男性不育畸形精子症的机制研究[D]. 袁晟. 广州中医药大学, 2021
- [8]卵巢储备功能下降中医证素分析及乌萸汤对小鼠线粒体能量代谢影响[D]. 郑凌琦. 北京中医药大学, 2021(01)
- [9]补肾祛湿法对肾虚湿热型不育患者精子氧化应激水平及DFI影响的临床研究[D]. 卢桂林. 南京中医药大学, 2021(01)
- [10]针刺联合左卡尼汀口服液治疗肾阳不足型弱精子症的临床疗效观察[D]. 梅自芳. 安徽中医药大学, 2021(01)