一、乙型肝炎、性病和HIV-1感染人群中CCR5,CCR2和SDF1等位基因多态性的研究（论文文献综述）
方浩[1]（2021）在《CCR5定点突变对塞拉维诺体外抗HIV-1活性影响的研究》文中研究指明【目的】CCR5具有广泛的基因多态性,存在明显的人种差异。在中国汉族人群中发现CCR5编码区的单核苷酸多态性,这些突变位点可能导致蛋白构象变化,而使受体的结构和功能发生改变。塞拉维诺是国内首个批准进入临床试验的CCR5拮抗剂,对进行CCR5定点突变体对塞拉维诺的抗HIV-1病毒活性的影响研究,可以为个性化药物疗效提供依据。【方法】首先构建CCR5及其突变体的慢病毒表达载体,利用三质粒系统包装CCR5及其突变体的慢病毒粒子再感染HOS-CD4细胞;用抗生素G418筛选得到稳定表达CCR5及其突变体的细胞,利用有限稀释法继续筛选后,提取细胞膜蛋白进行western blot鉴定,获得单克隆细胞HOS-CD4-CCR5及其突变株。利用western blot实验和流式细胞术检测HOS-CD4-CCR5及其突变株细胞表面CCR5蛋白的表达量;用ELISA方法定量检测HOS-CD4-CCR5及其突变株细胞对R5嗜性病毒HIV-1SF162的感染力;用实时荧光定量PCR检测塞拉维诺（DC521022）抑制HIV-1SF162进入HOS-CD4-CCR5及其突变体细胞的作用;以ELISA方法捕捉HIV-1 p24抗原检测塞拉维诺（DC521022）抑制HIV-1SF162进入HOS-CD4-CCR5及其突变体细胞的作用。实验均以马拉维诺（MVC）作为阳性对照药物。【结果】（1）成功构建慢病毒表达载体Plvx-IRES-Neo-CCR5及其突变体,经验证均能够成功表达CCR5蛋白。（2）经抗生素的持续筛选和western blot鉴定后,分别获得单克隆细胞HOS-CD4-Plvx 7株、HOS-CD4-CCR5 5株、HOS-CD4-CCR5/503G/T 2株、HOS-CD4-CCR5/668G/A 1株、HOS-CD4-CCR5/Δ894C 7株、HOS-CD4-CCR5/999G/T 4株。（3）与野生型CCR5细胞相比,定点突变体细胞株的CCR5蛋白细胞表面表达量减少。（4）与野生型CCR5细胞相比,定点突变体的细胞株对HIV-1SF162病毒感染力降低。（5）在HIV-1病毒RNA水平,DC521022在100 n M浓度下能有效地抑制HIV-1SF162病毒进入HOS-CD4-CCR5及其突变体细胞;其中在HOS-CD4-CCR5和HOS-CD4-CCR5/668G/A细胞中,DC521022抑制HIV-1SF162病毒效果比相同浓度阳性对照药物MVC更好,而其余CCR5突变体细胞中两药抑制效果相当。（6）在HIV-1病毒p24蛋白水平,DC521022均能有效地抑制HIV-1SF162的进入HOS-CD4-CCR5及其突变体细胞,并且抑制效果与阳性对照药物MVC相当。DC521022和MVC的EC50值在HOS-CD4-CCR5细胞中分别为1.58±1.10 n M、1.85±0.54 n M;在HOS-CD4-CCR5/503G/T细胞中分别为3.23±0.88 n M、2.66±0.03 n M;在HOS-CD4-CCR5/668G/A细胞中分别为2.74±0.02 n M、2.34±0.40 n M;在HOS-CD4-CCR5/Δ894C细胞中分别为0.40±0.04 n M、0.46±0.03 n M;在HOS-CD4-CCR5/999G/T细胞中分别为1.43±0.27 n M、1.33±0.53 n M。【结论】通过构建CCR5及4种定点突变的质粒,筛选得到CCR5及其突变体的单克隆细胞株;检测到这些CCR5突变体能够引起细胞表面CCR5蛋白表达量减少,并使细胞对R5嗜性病毒HIV-1SF162感染力降低;而在CCR5拮抗剂的作用下,DC521022能有效的抑制病毒HIV-1SF162进入HOS-CD4-CCR5及其突变体细胞,抑制作用优于MVC或与之相当;并且CCR5定点突变对CCR5拮抗剂DC521022、MVC都没有产生明显的耐药性,而Δ894C突变体能显着提高DC521022、MVC的抗HIV-1作用。
陶玉芬,史磊,姚宇峰,史荔,刘舒媛[2]（2020）在《趋化因子受体5Δ32突变在中国20个民族群体中的分布》文中认为目的:探讨趋化因子受体5（CCR5）Δ32突变在中国20个民族群体中的扩散特征。方法:选取中国20个不同民族共计2 788例健康无关个体,抽取外周静脉血提取基因组DNA,采用PCR检测CCR5Δ32突变（结果进行测序验证）,分析CCR5Δ32突变在中国20个民族群体中的分布情况,了解CCR5Δ32突变在中国人群中的扩散特征。结果:鄂温克族、回族（宁夏）、塔吉克族中各检测到1例CCR5Δ32基因突变杂合子（rs333 wt/mt）,CCR5Δ32突变的频率分别为1. 25%、0. 68%及1. 11%;在云南汉族群体中检测到2例CCR5Δ32基因突变杂合子（rs333 wt/mt）,CCR5Δ32突变的频率为0. 04%;其余群体中均未检测到CCR5Δ32基因突变。结论:CCR5Δ32基因突变在北方群体分布较多,符合"北高南低"的趋势。
陈珺,刘舒媛,聂磊,朱永玉,李传印,刘楠楠,周紫云,史荔,张淑琼[3]（2019）在《云南汉族人群CCR5基因启动子多态性与HCV慢性感染的关系》文中指出目的:研究云南汉族人群CCR5基因启动子单核苷酸多态性位点（SNPs）与丙型肝炎病毒（HCV）慢性感染的关系。方法:选取356例云南汉族HCV慢性感染者作为病例组,353例健康体检者作为对照组,采用PCR法扩增受检者CCR5基因启动子区基因序列;然后采用Sanger法对扩增序列进行测序并与Gen Bank（NC000003.12）序列比较获得与云南省汉族人群具有多态性的SNPs位点,对获得的SNPs位点进行基因分型,计算这些SNPs位点的等位基因频率和基因型频率;构建单倍型并分析遗传模式进行,比较两组间的分布差异。结果:在CCR5基因启动子区域有9个SNPs位点,其中rs2227010（A>G）、rs2734648（T>G）、rs1799987 （G>A）、rs1799988 （T>C）、rs1800023 （G>A）及1800024 （C>T） 6个位点在云南省汉族人群中具有多态性;这6个SNPs位点的基因型频率、等位基因频率及单倍型频率在病例组与对照组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:CCR5基因启动子中的rs2227010（A>G）、rs2734648（T>G）、rs1799987 （G>A）、rs1799988 （T>C）、rs1800023 （G>A）及1800024 （C>T） SNPs位点与云南汉族人群HCV慢性感染无关。
刘洁[4]（2016）在《运用转录组测序技术从HEPS者中筛查艾滋病不易感的关键基因》文中认为目的:筛查人类免疫缺陷病毒1型（human immunodeficiency virus -1,HIV-1）高暴露持续血清阴性（highly exposed and persistently seronegative,HEPS）者不易感的关键基因,揭示HEPS者HIV-1不易感的遗传背景。方法:通过疾病预防控制中心（Center for Disease Prevention and Control,CDC）艾滋病信息上报系统,在广西南宁、柳州、钦州所辖市区县的美沙酮门诊、艾滋病自愿咨询检测门诊,严格按照标准筛选HIV-1感染者的配偶及固定性伴作为研究对象,同时以年龄、性别、民族与HEPS组匹配筛选正常人群为对照组。通过问卷调查收集研究对象的人口学特征、性行为特征等,并采集研究对象的外周静脉血。分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）,提取样品RNA后,委托华大基因公司（Beijing Genomics Institute, BGI）进行 Hi-Seq 2000 高通量测序,筛选出关键差异表达基因,进而筛查HIV-1 HEPS者不易感的关键基因。结果:1.测序质检结果:（1）碱基组成分析:碱基组成图显示两样品A、T曲线重合,且G、C曲线也重合;（2）碱基质量分析:碱基质量图显示两样品低质量（<20）的碱基比例均较低;（3）片段打断随机性分析:reads在基因上的分布图显示两样品的reads在基因各部位分布都较均匀;（4）基因覆盖度分析:C01 （对照样品）总基因数为16963,覆盖度为90%～100%的基因有8313个（约占49%）,覆盖度为0%～10%的基因有1451个（约占9%）;GH01（HEPS样品）总基因数为17125,覆盖度为90%～100%的基因有8775个（约占51%）,覆盖度为0%～10%的基因有1427个（约占8%）。质检结果显示:样品碱基组成均衡质量高、片段打断随机性好、基因覆盖度高,测序结果质检合格。2.比对结果:与人类参考基因序列比对,样品C0I共有reads数47191584,其中比对上的reads数为33577371 （71.15%）;样品GH01共有reads数47062392,其中比对上的reads数为31811486 （67.59%）。两样品clean reads 中 unique match reads 达到 65%以上,perfect match reads 达到50%左右。3.差异表达基因统计:样品GH01与样品C0I比较,差异基因共1906个,其中1139个基因表达上调,767个基因表达下调（FDR≤0.001且｜log2 Ratio｜>1）。差异表达的基因中包含了 15个与之前报道和HIV-1不易感相关的基因:CCL2、KIR2DL1、KIR2DS2、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR2DL2、CCL4、CCL3L1、CCL20、KIR2DL3、CCL3、KIR2DS1、KIR3DS1、KIR2DS4和CCR9。此外,筛选了一批与HIV-1感染复制有关,但未见报道和HIV-1不易感相关的基因。综合差异表达倍数结果与相关文献报道,重点关注的基因主要包括 30 个:CCL2、CCL3、CCL3L1、CCL3L3、CCL4、CCL20、CXCL9、CXCL10、CCR4、CCR9、SIGLECI、SIGLEC14、CH25H、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR2DS1、KIR2DS2、KIR2DS4、KIR3DS1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA2、HLA-DQB2、HLA-G、APOBEC3A、APOBEC3B。4.差异表达基因的GO功能富集分析:以correctedp-value≤0.05为阈值,GH01、C01差异表达基因富集到47个功能组上,其中细胞成分5类,分子功能5种和生物过程37种。本研究细胞成分显示主要定位在膜上和细胞表面;分子功能包括细胞因子活化、受体结合、分子转导活性;参与的生物过程中可能与艾滋病不易感相关且差异表达基因富集比例>10%的主要有:刺激应答及其调节、生物过程及细胞过程的调节、信号转导、细胞表面受体信号通路、免疫系统过程及其调节等。5.差异表达基因的KEGGpathway分析:两样品间可能与HIV-1不易感相关的显着差异表达的通路主要有7条（按Qvalue<0.05）,包括:细胞因子及其受体信号通路、抗原加工提呈通路、粘附分子信号通路、NK细胞调节的细胞毒性通路、吞噬体信号通路、补体系统信号通路和B细胞受体信号通路。结论:1.运用转录组测序技术筛选了一批可能与HIV-1不易感性相关的基因,主要包括趋化因子及其受体家族（Chemokines）、杀伤细胞免疫球蛋白样受体成员（KIRs）、人类白细胞抗原分子（HLA）、载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3家族（APOBEC3）、唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素（SIGLECs）及干扰素刺激基因（ISGs）等,为下一步研究HIV-1不易感的具体机制奠定了基础。2. GO功能富集及KEGG pathway富集分析结果均有力地支持了本研究中所筛选的差异表达基因在HIV-1不易感中的重要性,同时表明了免疫相关生物过程及信号通路在王HIV-1不易感中的重要作用。3.本研究通过运用转录组测序技术成功从HEPS者中筛选了一批可能影响HIV-1不易感的关键基因。由此可见转录组测序技术已然发展成为了筛选差异表达基因的有力工具,可用于更多生物学机制方面的研究。
吴君荣[5]（2014）在《混合抗原检测HIV抗体方法及CD4 C868T单核苷酸多态性与HIV-Ⅰ型易感性的研究》文中研究说明目的1.以四种特异性多肽抗原HIV Gp41、Gp120、Gp36和p24蛋白为主要原料，调整各多肽抗原比例合适比例，以ELISA原理为基础，制备成检测HIV抗体试剂盒。2.对自制试剂盒进行相关的性能验证。3.研究CD4C868T单核苷酸多态性在广西HIV‐Ⅰ型感染人群中的分布状况，并分析广西人群CD4C868T单核苷酸多态性与HIV‐Ⅰ型易感性的相关性，为预防广西HIV‐Ⅰ型感染以及治疗提供理论基础。方法采用改良过碘酸钠氧化法制备酶标抗原，用包被缓冲液配制不同浓度的混合多肽抗原液，包被聚苯乙烯板孔，采用棋盘滴定法选择合适的抗原包被浓度及酶标抗原工作浓度，对检测系统进行固相抗原与抗体结合时间，酶结合物作用时间及显色时间进行优化，用优化后的方案对试剂盒进行相关的性能验证。选取HIV高发区广西的101例HIV‐Ⅰ型患者（艾滋病组）和102例健康体检者（对照组），采用聚合酶链反应（PCR）方法及DNA测序法，检测CD4基因C868T位点（rs28919570C/T）多态性，用χ2检验比较基因型和等位基因型分布频率在艾滋病组和对照组间的差异，logstic回归分析计算比值比（Oddsratios，OR）和95%可信区间（Confidence Intervals，CI），并以性别和年龄进行校正，对rs28919570C/T基因多态性和HIV‐Ⅰ患者的易感性进行关联分析。以上统计均采用SPSS16.0软件进行分析。基金项目：广西科学研究与技术开发计划项目（桂科攻1140003A‐1）结果1.经过棋盘滴定法选择，混合抗原的包被浓度为5ug/ml，酶标抗原最佳工作浓度为1:160。2.经过对检测系统进行优化，得出固相抗原与抗体结合作用时间为60min，酶结合物作用时间为45min，显色时间为15min；试剂盒的敏感性为97.2%，特异性为98.6%；试剂盒的主要活性成分在25℃室温放置一周及4℃条件下放置一个月或者三个月之后，质量未发生明显改变，试剂盒的稳定性良好。3.艾滋病组和对照组在性别和年龄组成上的差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。艾滋病组和对照组rs28919570C/T位点基因型符合Hardy‐weinberg平衡，所检测的样本具有代表性和可比性。4.本研究观察到rs28919570C/T位点共有CC、CT、TT三种基因型，三个基因型在广西人群HIV‐1感染组和对照组中分布频率的差异无统计学意义（P＞0.05）。与CC基因型相比，CT基因型和HIV‐1感染风险无相关性（P＞0.05），TT基因型和HIV‐1感染风险无相关性（P＞0.05），尚不能认为CD4rs28919570C/T位点的基因多态性与广西人群HIV‐1感染易感性有关。5. rs28919570C/T位点三个基因频率在对照组中的分布与北京汉人、日本东京人和美国德克萨斯州休斯敦印第安人群的研究结果较类似，与美国西南部非洲人、尼日利亚伊巴丹的约鲁巴人的研究结果差异较大。6.无论是在男性人群中还是在女性人群中，CD4rs28919570C/T位点的基因多态性与HIV‐1感染风险无相关性（P＞0.05）。结论以人工合成多肽抗原混合包被聚苯乙烯板孔，检测HIV感染的方法具有可行性，对检测方案进行一系列优化后，试剂盒具有较高的检测敏感性和特异性。尚未发现CD4rs28919570C/T位点基因多态性与广西人群HIV‐1感染风险具有相关性。
王晓辉[6]（2011）在《HIV-1高暴露未感染人群淋巴细胞活化状态与HLA分型的关系》文中研究指明研究目的1.以中国汉族HIV-1暴露而血清阴性者（HIV-1-exposed seronegative subjects, ESNs人群）为研究对象,以健康对照人群和人类免疫缺陷病毒I型（Human Immunodeficiency Virus Type 1, HIV-1）携带者为对照,探讨三组人群DC-SIGN和DC-SIGNR基因多态性与HIV-1不易感性的关系。2.分析三组人群HIV-1感染相关受体的表达差异,从蛋白质表达水平上寻找与HIV-1不易感性相关的受体。3.从基因多态性的角度解释与HIV-1不易感性密切相关的受体差异表达原因。研究方法应用扩增片段长度多态性（PCR-ALFP）的方法进行DC-SIGN和DC-SIGNR基因多态性分析；应用流式细胞术分析HIV-1感染相关受体的表达差异；应用序列特异引物PCR （sequence-specific primers, PCR-SSP）分析HLA基因多态性；应用SPSS13.0统计软件分析三组人群之间受体表达和基因型分布的差异。主要研究结果1. DC-SIGN在三组人群中以7/7型为主,三组人群共检出9个非7/7基因型,但DC-SIGN各基因型分布差异无统计学意义（P=0.648）; DC-SIGNR具有高度多态性,7/5、5/5和6/7基因型的频率从ESN人群、健康对照人群和HIV-1携带者逐渐降低,同时5和6等位基因的频率也呈现均匀下降,但各基因型分布差异无统计学意义（P=0.782）；2. ESNs人群T淋巴细胞HLA-DR+CD4和HLA-DR+CD8均显着性低于健康对照人群（P=0.024,0.009）,这两项指标同时呈现显着性正相关（P<0.001,r=0.960）；利用HLA-DR+CD8的双峰分布特征可以将健康对照人群分为高低表达两群；3.确切概率法卡方检验结果显示,三个基因座的多态性位点中只有A*03和B*55在三组人群中的分布差异有显着性。健康对照人群HLA基因型的分析发现,A*02和A*24基因型在HLA-DR+CD8表达高低两组的分布有显着性差异（P=0.020,0.038）；等位基因分析也验证了这个多态性变异分布的差异（P=0.007,0.009）,DRB1*09等位基因分布也有显着性差异（P=0.028）；A*02多态性变异与HLA-DR在CD8阳性细胞表面的表达有显着性负相关（P=0.008）；A*24多态性变异与HLA-DR在CD8阳性细胞表而的表达有显着性正相关（P=0.045）。研究结论1.我国汉族人群DC-SIGN基因多态性变异很低,没有继续研究的意义；DC-SIGNR基因多态性对于HIV-1不易感性的意义需要大样本的验证或细胞生物学实验数据的支持；2.对于中国汉族人群,T淋巴细胞低活化状态与中国汉族人群HIV-1不易感性密切相关,从统计学分析和生物学意义上可以将中国汉族人群按照HLA-DR+CD8活化高低分为HIV-1易感人群和不易感人群；3. HLAA*02多态性变异可能是中国汉族人群HIV-1感染的保护性因素,而HLAA*24多态性变异可能是感染的危险因素。创新性1.首次在国内ESNs人群的研究中设定了定量的的入选标准；2.在国内首次报道HLA-DR的高低表达与中国汉族人群HIV-1不易感性密切相关；3.首次报道HLA-A*02多态性变异可能是中国汉族人群HIV-1感染的保护性因素,而HLA-A*24多态性变异可能是感染的危险因素。
谭奎,单可人,任锡麟[7]（2009）在《CCR5基因多态性与乙型肝炎病毒感染相关性的研究进展》文中提出趋化性细胞因子和趋化性细胞因子受体在抗病毒免疫中发挥了重要作用。乙型病毒性肝炎是由其表达的抗原系统及其抗体所介导的特异性免疫反应和非特异性的以细胞因子为主的炎症介质导致的肝细胞损伤。CCR5作为趋化性细胞因子受体在乙型病毒性肝炎的发生发展中起重要作用。本文主要讲述CCR5的结构和功能及该基因在编码区和启动子区的多态性与HBV感染的相关性研究。
谭奎,单可人,何燕,张婷,李毅,王婵娟,齐晓岚,赵艳,肖雁,谢渊,吴昌学,官志忠,任锡麟[8]（2009）在《CCR5Δ32等位基因多态性与贵州特殊人群HBV感染的相关性》文中研究说明目的:探讨CCR5Δ32等位基因在贵州世居少数民族（彝、瑶）与汉族人群的分布,并分析CCR5位点突变与HBV的关系.方法:采用PCR技术分别扩增贵州92份黔西彝族、101份威宁彝族、138份荔波瑶族以及165份毕节汉族CCR5编码区片段,通过琼脂糖凝胶电泳对CCR5Δ32多态性进行分析,最后抽取样本并进行DNA测序验证.结果:经过PCR特异性扩增,琼脂糖凝胶电泳后,496份样本均未发现CCR5Δ32突变型和杂合子.DNA测序验证所有样本CCR5基因未发生32碱基缺失的突变.结论:CCR5Δ32的分布有较明显的地域和种族差异,该位点与HBV感染的相关性有待于进一步深入研究.
王月云[9]（2009）在《HIV-1高暴露持续血清阴性人群分子流行病学研究》文中指出研究背景性传播途径已经成为全球人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（human immunodeficiency virusType 1，简称HIV-1）的主要传播途径，大约70％～80％感染者通过性接触感染HIV-1。HIV-1是一种具有高度变异性的逆转录病毒，其感染与疾病进展过程尚有很多问题需要阐明。在艾滋病的分子流行病学研究领域，有两类人群值得关注：一类是较高频率暴露于HIV-1但未感染，血清呈阴性反应，该类人群被称为暴露HIV-1后血清阴性者（HIV-1-exposed seronegative subjects，简称ESNs或ES人群）或HIV-1高暴露持续血清阴性者（higly exposed and persistently seronegative，简称HEPS人群）；另一类为感染HIV-1后长期不进展者（long-term no-progressors，LTNP）。目前，对HIV-1不易感性机理及其影响因素尚不明确，国内外关于HEPS人群不易感HIV-1的研究报道并不多见。因此，我们选择经性传播途径高暴露HIV-1持续血清阴性的人群作为研究对象，探讨其对HIV-1不易感性的影响因素。研究目的1．探讨经性传播途径高暴露HIV-1的HEPS人群HIV-1感染相关基因CCR5-Δ32、CCR2b-64I和SDF1-3’A多态性与HIV-1不易感性的关系。2．了解经性传播途径高暴露HIV-1的HEPS人群与HIV-1感染者、无HIV暴露史健康对照人群的淋巴细胞亚群分布差异，分析其与HIV-1不易感性的关系。3．了解经性传播途径高暴露HIV-1的HEPS人群淋巴细胞亚群表达及其免疫活化状态，探讨经性途径高暴露HIV-1不易感性的免疫学机制。研究方法本研究采用流行病学病例对照研究方法，在深圳市疾病预防与控制中心2006年01月1日～2007年12月31日的自愿咨询检测（voluntary counselling and test，简称VCT）人群中选择经性传播途径高暴露HIV-1的HEPS人群作为病例组，选择经性途径感染HIV-1者及无HIV暴露史的健康对照人群作对照组。按年龄相差小于5岁、性别和民族相同的匹配条件选取对照。采用统一的调查问卷对病例组和对照组进行调查，并收集生物样本。用PCR／RFLP技术分析基因多态性的基因型；采用流式细胞术分析淋巴细胞亚群及其表面活化标志的表达。主要研究结果1．CCR5-⊿32等位基因突变HEPS人群（n=52）、健康对照人群（n=104）和HIV-1感染者（n=104）三组人群（n=260）中均未检测到；CCR2b-64I等位基因突变频率在这三组人群中分别为21．57％、22．12％和22．12％，三者之间的差异没有统计学意义；SDF1-3’A等位基因突变频率在这三组人群中分别是20．19％、28．37％和29．33％。HEPS人群的SDF1-3’A等位基因突变频率显着低于健康对照人群和HIV-1感染人群，差异具有统计学意义（P=0．023，P=0．049）。2．HEPS人群与健康对照人群外周血淋巴细胞亚群差异没有统计学意义；HPES人群和健康对照人群的CD4+T淋巴细胞数量、CD4+／CD8+比值显着高于HIV-1感染者（P＜0．001），而该两类人群的CD8+T淋巴细胞数量则显着低于HIV-1感染者（P＜0．001）；HIV-1感染者外周血CD19+B淋巴细胞、CD16+CD56+NK细胞数量显着低于HEPS人群和健康对照人群。淋巴细胞亚群相关性分析结果显示，HIV-1感染者和健康对照人群的CD19+B淋巴细胞、CD16+ CD56+ NK细胞数量均与其CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量呈一定程度正相关，HEPS人群的CD19+ B淋巴细胞数量与CD4+、CD8+T淋巴细胞数量呈显着正相关，而CD16+ CD56+ NK细胞数量与其CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量无相关性。3．HEPS人群和健康对照人群的CD38+／CD4+、HLA-DR+ CD38+／CD4+百分比显着低于HIV-1感染者（P＜0．001），同时HEPS人群的HLA-DR+ CD38+／CD4+百分比显着低于健康对照人群（P＜0．05）；HEPS人群的HLA-DR+／CD4+百分比显着低于HIV-1感染者和健康对照人群（P＜0．001）。研究结论1．CCR5-Δ32和CCR2b-64I等位基因突变与中国汉族人群通过性传播途径感染HIV-1的关系不大，SDF1-3’A等位基因突变可能增加经性传播途径感染HIV-1危险性。2．经性传播途径高暴露HEPS人群淋巴细胞亚群和健康对照人群比较差异无统计学意义，HIV-1感染可明显降低单位体积CD4+ T淋巴细胞、CD19+ B淋巴细胞和CD16+ CD56+ NK细胞数量。3．HEPS人群对HIV-1的不易感性可能与其T淋巴细胞表面标志活化抗原表达水平处于较低水平状态有关。
徐维国,杨丽,刘小菁,强鸥[10]（2009）在《CC族趋化因子受体基因多态性在乙型肝炎肝硬化中的作用》文中进行了进一步梳理目的研究CC族趋化因子受体基因多态性与乙型肝炎肝硬化之间的关联及其在乙型肝炎肝硬化发生、发展中的作用。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测技术,对121例乙型肝炎肝硬化患者和138例正常人群中CCR5△32、CCR2-64I、CCR5-promoter-59029 G/A的基因多态性分布差异进行检测。结果CCR5△32等位基因突变在肝硬化和正常人群中均很少发生,在121例肝硬化和138例正常人群中均未发现CCR5△32等位基因突变个体。CCR5-promoter-59029 A/A基因型的比例在肝硬化人群中较正常人群高（22.3%vs14.5%,P<0.05）,而对照组中,CCR5-promoter-59029 G/G基因型的比例较肝硬化组高（42.0%vs31.4%,P<0.05）。在肝硬化组中CCR5-promoter-59029 G/A基因型的分布在丙氨酸转氨酶（ALT）正常和异常组间的差别具有统计学意义:正常组CCR5-promoter-59029 G/G基因型的比例高于酶学异常组（40.4%vs23.4%,P<0.05）,CCR5-promoter-59029 A/A基因型的比例较酶学异常组低（15.8%vs28.1%,P<0.05）。CCR2-64I基因多态性在肝硬化和正常人群中的差异无统计学意义。结论CCR5-promoter-59029 A/A基因型对于肝硬化是不利因素,它增强细胞免疫反应并导致肝细胞炎症加重（ALT升高）从而促进肝硬化的发展。
二、乙型肝炎、性病和HIV-1感染人群中CCR5,CCR2和SDF1等位基因多态性的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、乙型肝炎、性病和HIV-1感染人群中CCR5,CCR2和SDF1等位基因多态性的研究（论文提纲范文）
（1）CCR5定点突变对塞拉维诺体外抗HIV-1活性影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1 HIV-1进入细胞的过程 |
| 2 几种主要的小分子 CCR5 拮抗剂的研究进展 |
| 3 CCR5多态性对多种疾病的影响 |
| 4 本研究拟解决的科学问题及研究目的 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞和病毒 |
| 1.2 质粒 |
| 1.3 样品和阳性药物 |
| 1.4 主要试剂及试剂盒 |
| 1.5 实验仪器 |
| 1.6 常用试剂配方 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞培养的基本实验方法与操作 |
| 2.1.1 细胞的复苏 |
| 2.1.2 细胞的冻存 |
| 2.1.3 细胞的培养及传代 |
| 2.1.4 细胞计数方法 |
| 2.2 HIV-1病毒株滴度的测定 |
| 2.3 CCR5突变体表达载体的构建 |
| 2.3.1 CCR5目的基因的扩增 |
| 2.3.2 克隆载体T-CCR5的构建 |
| 2.3.3 表达载体Plvx-IRES-Neo-CCR5及其突变体的构建 |
| 2.3.4 表达载体Plvx-IRES-Neo-CCR5及其突变体的验证 |
| 2.4 CCR5及其突变体的慢病毒包装 |
| 2.5 单克隆细胞HOS-CD4-CCR5突变株的构建 |
| 2.5.1 筛选抗生素浓度的确定 |
| 2.5.2 稳定表达细胞株HOS-CD4-CCR5及其突变体的筛选与鉴定 |
| 2.5.3 单克隆细胞HOS-CD4-CCR5突变株的筛选与鉴定 |
| 2.6 定点突变对CCR5蛋白表达量影响 |
| 2.6.1 Western Blot |
| 2.6.2 流式细胞术(表面染色法) |
| 2.7 CCR5突变体对HIV-1感染力的影响 |
| 2.7.1 感染实验 |
| 2.7.2 ELISA方法检测培养上清中HIV-1 p24抗原含量 |
| 2.8 CCR5突变体对塞拉维诺抗HIV-1活性的影响 |
| 2.8.1 实时荧光定量PCR检测塞拉维诺对实验株HIV-1_(SF162)进入HOS-CD4-CCR5 及其突变细胞株的抑制作用 |
| 2.8.2 ELISA检测塞拉维诺对实验株HIV-1_(SF162)进入HOS-CD4-CCR5及其突变细胞株的抑制作用 |
| 2.9 计算公式 |
| 结果 |
| 1 表达载体Plvx-IRES-Neo-CCR5及其突变体的构建 |
| 1.1 目的基因CCR5的扩增 |
| 1.2 表达载体Plvx-IRES-Neo-CCR5及其突变体的构建和测序结果 |
| 1.3 表达载体Plvx-IRES-Neo-CCR5及其突变体的验证 |
| 2 单克隆细胞HOS-CD4-CCR5及其突变株的筛选与鉴定 |
| 2.1 筛选抗生素浓度的确定 |
| 2.2 稳定表达细胞株HOS-CD4-CCR5及其突变体的筛选与鉴定 |
| 2.3 单克隆细胞HOS-CD4-CCR5 及其突变株的筛选与鉴定 |
| 3 CCR5突变对CCR5蛋白表达的影响 |
| 3.1 Western blot定量 |
| 3.2 流式细胞术分析 |
| 4 CCR5 突变体能够影响HIV-1_(SF162)感染力 |
| 5 塞拉维诺(DC521022)有效抑制实验株HIV-1_(SF162)进入HOS-CD4-CCR5及其突变体细胞并且CCR5突变体对药物没有产生明显耐药性 |
| 5.1 实时荧光定量PCR检测CCR5 突变体的耐药 |
| 5.2 ELISA检测CCR5 突变体的耐药 |
| 结论与讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 CCR5拮抗剂的药理作用及应用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（2）趋化因子受体5Δ32突变在中国20个民族群体中的分布（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 DNA提取 |
| 1.2.2 CCR5Δ32等位基因检测 |
| 1.2.3 CCR5Δ32等位基因的测序验证 |
| 2 结果 |
| 2.1 CCR5Δ32等位基因的PCR产物电泳 |
| 2.2 CCR5Δ32等位基因的测序验证 |
| 2.3 中国20个不同民族CCR5Δ32基因突变 |
| 3 讨论 |
（3）云南汉族人群CCR5基因启动子多态性与HCV慢性感染的关系（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 对象 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 样本DNA提取 |
| 1.2.2 CCR5基因启动子SNPs检测 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 年龄、性别及血清ALT、AST水平 |
| 2.2 测序发现的CCR5基因启动子区域9个SNPs位点 |
| 2.3 等位基因与基因型分析 |
| 2.4 6个SNPs位点间的连锁不平衡分析 |
| 2.5 单倍型分析 |
| 2.6 遗传模式分析 |
| 3 讨论 |
（4）运用转录组测序技术从HEPS者中筛查艾滋病不易感的关键基因（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 全文总结 |
| 一、研究结论 |
| 二、研究的创新点 |
| 三、研究的局限性 |
| 四、下一步研究计划 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 中英文缩略对照表 |
| 健康调查问卷 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的论文及参与的课题 |
（5）混合抗原检测HIV抗体方法及CD4 C868T单核苷酸多态性与HIV-Ⅰ型易感性的研究（论文提纲范文）
| 英文缩写索引 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 混合多肽抗原检测HIV试剂盒的研究 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结 果 |
| 讨 论 |
| 结 论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 第二部分 CD4 C868T单核苷酸多态性与广西人群HIV-Ⅰ型易感性的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（6）HIV-1高暴露未感染人群淋巴细胞活化状态与HLA分型的关系（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 绪论 |
| 1.1 研究背景与意义 |
| 1.2 研究目标 |
| 1.3 研究设计 |
| 1.4 拟解决的关键问题分析 |
| 1.5 本研究的创新点 |
| 1.6 本研究的局限性和后续研究展望 |
| 1.7 核心概念 |
| 1.8 参考文献 |
| 第二部分 三组人群DC-SIGN和DC-SIGNR基因多态性分布差异分析 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 研究对象与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 参考文献 |
| 第三部分 三组人群T淋巴细胞表而受体表达差异分析 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 参考文献 |
| 第四部分 HLA-A、B、DR基因多态性分布在三组人群 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 HLA基因分型的主要方法和原理 |
| 4.3 研究对象与方法 |
| 4.4 研究结果 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 附录3 |
| 致谢 |
（9）HIV-1高暴露持续血清阴性人群分子流行病学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 绪论 |
| 1 研究背景 |
| 2 研究意义 |
| 3 核心概念 |
| 参考文献 |
| 第二部分 研究框架与技术路线 |
| 1 研究框架 |
| 2 技术路线 |
| 3 本研究的创新点和局限性 |
| 4 后续深入研究方向 |
| 第三部分 性途径高暴露HIV-1持续血清阴性人群基因多态性研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 性途径高暴露HIV-1持续血清阴性人群免疫学研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 附录1 (论文缩写词汇中英文对照表) |
| 附录2 (攻读博士学位期间科研活动与成果) |
| 附录3 (流行病学调查表) |
| 附录4 (研究对象知情同意书) |
| 致谢 |
（10）CC族趋化因子受体基因多态性在乙型肝炎肝硬化中的作用（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 标本处理 |
| 1.2.2 基因多态性测定 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 基因型检测 |
| 2.2 基因型的分布 |
| 3 讨论 |
四、乙型肝炎、性病和HIV-1感染人群中CCR5,CCR2和SDF1等位基因多态性的研究（论文参考文献）
- [1]CCR5定点突变对塞拉维诺体外抗HIV-1活性影响的研究[D]. 方浩. 云南中医药大学, 2021
- [2]趋化因子受体5Δ32突变在中国20个民族群体中的分布[J]. 陶玉芬,史磊,姚宇峰,史荔,刘舒媛. 贵州医科大学学报, 2020(05)
- [3]云南汉族人群CCR5基因启动子多态性与HCV慢性感染的关系[J]. 陈珺,刘舒媛,聂磊,朱永玉,李传印,刘楠楠,周紫云,史荔,张淑琼. 贵州医科大学学报, 2019(01)
- [4]运用转录组测序技术从HEPS者中筛查艾滋病不易感的关键基因[D]. 刘洁. 广西医科大学, 2016(03)
- [5]混合抗原检测HIV抗体方法及CD4 C868T单核苷酸多态性与HIV-Ⅰ型易感性的研究[D]. 吴君荣. 广西医科大学, 2014(11)
- [6]HIV-1高暴露未感染人群淋巴细胞活化状态与HLA分型的关系[D]. 王晓辉. 华中科技大学, 2011(09)
- [7]CCR5基因多态性与乙型肝炎病毒感染相关性的研究进展[J]. 谭奎,单可人,任锡麟. 国际遗传学杂志, 2009(04)
- [8]CCR5Δ32等位基因多态性与贵州特殊人群HBV感染的相关性[J]. 谭奎,单可人,何燕,张婷,李毅,王婵娟,齐晓岚,赵艳,肖雁,谢渊,吴昌学,官志忠,任锡麟. 世界华人消化杂志, 2009(22)
- [9]HIV-1高暴露持续血清阴性人群分子流行病学研究[D]. 王月云. 华中科技大学, 2009(11)
- [10]CC族趋化因子受体基因多态性在乙型肝炎肝硬化中的作用[J]. 徐维国,杨丽,刘小菁,强鸥. 临床荟萃, 2009(03)