一、小麦-黑麦远缘杂交后代储藏蛋白遗传变异分析（论文文献综述）
徐勤省[1]（2021）在《小黑麦和小滨麦新种质的筛选及遗传组成鉴定》文中研究表明黑麦、滨麦草等近缘植物在小麦遗传改良中具有重要的利用价值。利用黑麦和滨麦草与普通小麦杂交所培育的异源双二倍体材料,不仅具有亲本抗多种病害以及耐逆境胁迫等能力,而且能够克服小麦与近缘植物直接杂交的不亲和性、杂种不育等障碍,是将近缘植物优异基因导入普通小麦的重要桥梁,同时也是继续创制培育异附加系、异代换系、易位系的基础材料。明确这些异源双二倍体的性状特点和遗传组成,有利于促进其在小麦遗传改良中的进一步利用。本研究对实验室培育的六倍体和八倍体小黑麦、八倍体小滨麦等材料的抗病性、耐盐性及农艺性状特点进行了鉴定,同时结合基因组原位杂交和荧光原位杂交技术对其遗传组成和染色体结构变异进行了分析。获得结果如下:1、抗病性鉴定结果表明,六倍体、八倍体小黑麦材料普遍高抗条锈病、白粉病,八倍体小滨麦及其后代材料均高抗条锈病,但高感白粉病。耐盐性鉴定结果表明不同六倍体小黑麦材料对高盐胁迫反应不同,筛选鉴定出L20190109等耐盐能力较好的材料;高盐胁迫时对八倍体小滨麦幼苗植株的地上部影响较大,中度盐胁迫对其根系有一定促进作用。2、以黑麦基因组DNA为探针,对实验室创制的36份六倍体小黑麦材料进行基因组原位杂交,结果表明,所鉴定的35份材料含有来自黑麦的14条外源染色体,1份材料含有12条外源黑麦染色体;同时利用寡核苷酸探针套和黑麦为混合探针,对36份六倍体小黑麦材料进行鉴定,构建其FISH核型,比较发现,4份材料染色体组成有较大变异,如2D染色体代换2R染色体、6D染色体取代6A染色体,此外小黑麦材料的A基组的2A、5A、6A和7A染色体,B基组2B和7B染色体发生较大程度的结构变异。3、利用华山新麦草基因组DNA为探针,对18份八倍体小滨麦自交后代材料进行基因组原位杂交鉴定,发现材料中2n=56条染色体的材料有6份,9份材料含有14条外源染色体,14份材料染色体组成变化较大;结合寡核苷酸探针的荧光原位杂交结果,发现八倍体小滨麦后代材料染色体组成较为复杂,9份材料相比八倍体材料丢失2-11条数量不等的外源染色体。小滨麦材料遗传组成的鉴定,为其进一步的利用奠定了基础。
李明珠[2]（2021）在《抗白粉病、叶锈病小偃麦衍生系的分子细胞遗传学鉴定》文中研究表明小麦白粉病和叶锈病分别是由小麦白粉病菌（Blumeria graminis f.sp.Tritici）和叶锈病菌（Puccinia triticina）引起的小麦病害,该病的大发生会严重影响小麦产量,危害国家粮食安全。选育和推广抗病品种是控制小麦白粉病和叶锈病最为经济、安全、有效的措施,而抗病基因挖掘、种质创新与利用是其得以顺利实施的基础。十倍体长穗偃麦草（Thinopyrum ponticum,2n=10x=70,St St St St EeEeEbEbExEx或JJJJJJJSJSJSJS）对小麦白粉病、三锈、黄矮病、根腐病和赤霉病等多种病害表现免疫或高抗,还具有高蛋白、多花多实等多种优良性状,是小麦遗传改良的宝贵基因库。本实验室通过长穗偃麦草与普通小麦杂交,创制了一批性状各异、特点突出的小偃麦新种质。本研究在抗病性评价的基础上,通过形态学、细胞遗传学、分子生物学等方法技术,对小偃麦衍生系进行综合鉴定,获得了如下主要结果:1、获得了抗白粉病、叶锈病的小偃麦代换系SN19647。抗病性鉴定表明,SN19647兼抗小麦白粉病和叶锈病。GISH-FISH结果表明,SN19647的1对1B染色体被长穗偃麦草1对JS染色体所代换。与亲本FISH带型比较,发现SN19647的2A、5A、6B和7B染色体发生了结构变异。通过分子标记分析,获得了CINAU851、CINAU857等19个长穗偃麦草特异标记,其中17个位于第一同源群,说明SN19647中的长穗偃麦草染色体源于第一部分同源群（1JS）;与CH10A5比较分析,发现SN19647为新的小麦-长穗偃麦草1JS（1B）双体代换系,其染色体组成为14A+12B+14D+2（1JS）。2、在八倍体小偃麦SNTE20与普通小麦复合杂交后代中,选育出10个综合性状优良的抗白粉病小偃麦渐渗系。它们均含有抗白粉病基因Pm2和Pm52,同时还可能携带源于长穗偃麦草的抗白粉病新基因,在苗期和成株期均对小麦白粉病具有良好抗性。GISH结果表明,SN0293-1等5个材料为1BL·1RS纯合易位系,SN0293-3等3个材料为1BL·1RS杂合易位系,SN0293-7、SN0293-8不含1BL·1RS;同时,在上述10个材料中均未检测到长穗偃麦草杂交信号。进一步利用寡核苷酸探针套对各材料及其亲本进行FISH鉴定,并与亲本染色体带型对比发现,SN0293-2和SN0293-7的1D、2D、3B、5A、6B、7A等染色体发生了结构变异;在1D、2A、2D、4A、4B、6B、7B染色体附近SN0293系列材料间FISH带型出现差异。通过Wheat 660K基因芯片分析发现,SN0293含有157个长穗偃麦草特异SNP位点,其中134个位于6A染色体;结合重测序数据,开发了CAPS421、Indel753等7个特异标记,可以在SN0293各材料扩增出长穗偃麦草特异带。SN0293含有多个抗白粉病基因,综合性状优良,在小麦遗传改良中具有重要的利用价值。3、在长穗偃麦草与普通小麦烟农15杂交、回交后代中,选育出了抗白粉病、叶锈病的小偃麦渐渗系SN19578。抗病性鉴定表明,SN19578在苗期和成株期分别对小麦白粉病、叶锈病表现免疫和近免疫。以十倍体长穗偃麦草基因组DNA作探针进行GISH鉴定,未检测出杂交信号。进一步进行FISH鉴定,并与其亲本进行对比,发现1D、2A、2D、3B、5A等染色体发生了结构变异。筛选出2个IT标记（CINAU988、CINAU1066）和3个SSR标记（Xgwm359、Xbarc220、Xgwm497）,可以在SN19578中扩增出长穗偃麦草特异带,可作为SN19578中长穗偃麦草遗传物质的特异标记,说明SN19578是含有长穗偃麦草第二部分同源群遗传物质的小偃麦渐渗系。
李家创[3]（2021）在《5份小麦-华山新麦草衍生后代的分子细胞遗传学鉴定及重要农艺性状评价》文中研究表明华山新麦草（Psathyrostachys huashanica Keng;2n=2x=14,Ns Ns）是来自禾本科（Poaceae）、新麦草属（Psathyrostachys Necski）的一种多年生二倍体异花授粉植物,因其具有早熟、抗多种小麦病害（锈病、白粉、赤霉、全蚀）、耐寒抗旱、耐盐碱、矮秆、分蘖多等优良特性,被认为是普通小麦（Triticum aestivum）改良的宝贵遗传资源。通过远缘杂交技术和染色体工程的方法创制而成的小麦—华山新麦草衍生系则是快速有效利用华山新麦草Ns基因组最重要的中间材料。本研究利用七倍体杂种H8911（2n=49,AABBDDNs）和硬粒小麦（Triticum durum）Trs-372（2n=28,AABB）杂交后产生的子代,经连续自交6-7代后从中筛选出5个衍生后代:DH5、DH88、DH66、TR77、DH109,综合采用细胞学观察、原位杂交技术（GISH和Mc-FISH）、分子标记技术（EST-STS、SSR、SCAR和SNP芯片）等方法,结合田间性状调查,对其进行了详细分析,主要研究结果如下:（1）华山新麦草染色体核型的初步分析:对研究材料的外源亲本—华山新麦草的染色体组进行了初步的核型分析,推测其核型公式为2n=2x=14=12m（4sat）+2sm,Stebbins核型为2A型,平均臂比为1.4,在属内居于较高的水平,但其在植物界进化水平偏低。（2）细胞学观察表明DH5的染色体组型为2n=42+Ti=21Ⅱ+Ti（Ti指小片段染色体）;GISH分析显示DH5含有一个小的华山新麦草染色体片段,该片段无法在减数分裂阶段与小麦染色体配对,只能从父本传递给子代,传递率约为1/2;FISH实验表明DH5是一个2A缺体2B四体;分子标记结果表明DH5中附加的外源小片段来自华山新麦草5Ns染色体的短臂;利用标记转化法开发了8对可以用于检测华山新麦草5Ns染色体的SCAR标记。农艺性状调查表明DH5株高较低,对条锈病有较高抗性,外源染色体小片段的有无对农艺性状影响不大。（3）细胞学观察表明DH88的染色体组型为2n=44=22Ⅱ;GISH分析显示其含有一对华山新麦草的染色体片段,这对外源染色体片段可以正常配对并传递给子代。EST-STS分子标记表明DH88所附加的一对染色体片段来自华山新麦草6Ns染色体。DH88对条锈病表现为高抗,可能是由于华山新麦草6Ns染色体的抗病基因进入导致。（4）细胞学观察DH66的染色体组型为2n=42=21Ⅱ;GISH实验显示DH66中有一对小麦染色体被华山新麦草染色体所替代,这对外源染色体可以正常联会配对并传递到子代中;Mc-FISH实验结果表明DH66缺失了其一对5D染色体。分子标记表明DH66获得了华山新麦草5Ns染色体而失去了小麦5D染色体;DH66的小麦15K SNP芯片结果也在5D染色体的位置上出现了和华山新麦草相似度高和小麦亲本7182相似度低的交叉峰,综合分子标记的结果可以得知DH66中一对5D染色体被华山新麦草5Ns染色体所代换。DH66株高较低,在成株期对条锈病表现为高抗,籽粒品质较好,可以作为抗条锈病和优质小麦育种的重要材料。（5）有丝分裂分析表明TR77的染色体组型为2n=42=21Ⅱ,其中有一对染色体超过1/2的部分被外源染色体所替代。减数分裂过程中外源染色体可以正常配对并传递给子代,表明TR77是一个细胞遗传学稳定的小麦—华山新麦草易位系。分子标记和Mc-FISH分析显示在TR77中形成了5DL-3DS·3DL染色体和3DS-Ns L·Ns S染色体,因此TR77是一个包含了双重易位的小麦—华山新麦草衍生材料。对TR77的小麦15K SNP芯片分析推断出易位发生在5D染色体物理位置的202.3Mb和213.1Mb处,靠近着丝粒。TR77具有圆锥状的穗型且无芒,其穗子较长,穗粒数多,株高较高,在全生育期对白粉病表现高抗,可作为研究小麦和其近缘属种间多重易位和抗白粉病育种的优异种质资源。（6）衍生系DH109和衍生系DM131的异同性分析:DH109从小麦—华山新麦草衍生后代中筛选而来,DM131从小麦—滨麦衍生后代中筛选获得。通过分子细胞遗传鉴定确认两个衍生系都为3Ns（3D）二体异代换系材料,但是DH109为小麦—华山新麦草3Ns（3D）二体异代换系,DM131为小麦—滨麦3Ns（3D）二体异代换系。两个材料的细胞学观察和GISH结果较为相似,均是稳定的衍生系材料。但是,两者的STS和SCAR标记共用性不高,外源染色体的FISH核型图完全不同。农艺性状上,两者都轻微感条锈病,苗期都高抗白粉病;对于赤霉病,DH109表现为高抗而DM131表现为高感。形态学特征上,DH109的籽粒较大,而DM131的穗子更长、穗粒数和分蘖数较多;两个材料的籽粒品质特征介于两个小麦亲本之间。综上,华山新麦草3Ns染色体和滨麦3Ns染色体对小麦的性状改变差异明显。这两个衍生系可以用于小麦抗白粉、抗赤霉病育种以及新麦草属和赖草属中Ns染色体的差异化比较。华山新麦草核型图的绘制为进一步了解这一外缘种提供了理论基础;五个衍生后代的鉴定丰富了小麦的遗传种质库,对于抗病、高产和优质小麦育种具有重要的利用价值;不同属Ns染色体在小麦背景中的差异比较对研究小麦近缘属种的亲缘和进化关系提供了依据。
杨军丽[4]（2020）在《小黑麦与冬黑麦杂交后代的细胞遗传学及SSR研究》文中指出黑麦（Secale cereale L.）是小麦（Triticum aeistvum L.）的近缘物种之一,具有丰富的遗传多样性,在小麦遗传育种改良方面具有重要贡献。小黑麦（Triticale）由小麦属（Triticum）与黑麦属（Secale）植物经属间杂交及染色体加倍形成的双二倍体新物种,遗传了双亲的抗逆性、适应性及蛋白质含量高等优良性状,为粮饲兼用型的新作物。本研究以中饲232（AABBRR,2n=6x=42）、鉴3（AABBRR,2n=6x=42）等5种六倍体小黑麦品种分别与俄罗斯冬黑麦（R0R0,2n=2x=14）进行杂交,对杂种F1F2代进行田间农艺性状调查、细胞遗传学分析及分子标记检测等,观察杂交后代的染色体数目变化及构成情况,鉴定外源遗传物质的导入,旨在选育出能够在哈尔滨地区顺利越冬的冬性小黑麦中间材料。主要研究结果如下:20182019连续两年,利用5种六倍体小黑麦品种分别与俄罗斯冬黑麦共杂交406穗,获得F1杂交种1100粒,平均杂交结实率在8.31%25.51%范围之间,籽粒饱满度低。杂种F1、F2和F3经田间种植,共获得可在哈尔滨地区顺利越冬的材料12份;杂种农艺性状较亲本相比类型丰富,表现为田间长势茂盛、抗逆性强、多分蘖（最多有效分蘖36个）、大穗（最长17.23cm）且穗底部多花等特点。杂种F1体细胞染色体数目在2542条范围内,21份为42条染色体;花粉母细胞减数分裂观察,普遍存在69个二价体,单价体数目616个之间。杂种F2体细胞染色体数目在2942条范围之间。基因组原位杂交（GISH）鉴定结果表明,4份杂种F2中含有14条冬黑麦染色体。利用96对黑麦SSR引物对冬黑麦基因组进行扩增,共筛选出4对冬黑麦特异性SSR引物,分别为引物SCM120、SCM102、SCM9和SCM69,可用于检测杂种后代中的R0R0染色体遗传成分。本研究为丰富和改良黑龙江省麦类作物资源提供了材料基础,为发掘黑麦中优异的抗寒基因提供了理论依据。
徐云芳[5]（2020）在《小麦背景中黑麦染色体1R的精准鉴定与遗传多样性研究》文中指出黑麦（Secale cereale L,2n=2x=14,RR）是普通小麦的自然异花授粉近缘种,具有显着的遗传多样性和丰富的有价值的基因,在小麦改良中可以发挥重要作用。准确、方便地鉴定小麦背景中的黑麦染色质,将有利于黑麦优良基因在小麦育种中的转移和利用。为了发掘新的细胞学和分子标记,鉴定不同来源的黑麦遗传物质,本研究主要包括以下几方面的内容:不同的小黑麦和黑麦染色体特异性重复序列原位杂交探针的挖掘与应用,黑麦1R染色体分子标记的筛选与遗传多样性分析,小麦-黑麦的杂交后代1R染色体变异的传递及农艺性状分析。结果如下:1.黑麦染色体特异性重复序列的挖掘:使用非变性荧光原位杂交（ND-FISH）的方法,利用实验室合成的11个寡核苷酸探针对9种小黑麦和3种黑麦中的1R-7R染色体进行鉴定,筛选得到4个重复性较好的探针,其中Oligo-3A1对黑麦的5RL具有较好的特异性,Oligo-1RS-6和Oligo-K566对黑麦的1R,4R和7R具有好的特异性,Oligo-1RS-4探针为黑麦端部特异重复序列,杂交信号只出现在R组染色体端部,1R-7R染色体都有信号分布,这有助于快速高效地识别小黑麦中的R组染色体及其相应区段。同时,通过对不同的小黑麦和黑麦染色体杂交信号的对比,发现Oligo-pSc119.2信号分布较为相似,但是Oligo-1RS-4在12种小黑麦和黑麦之间信号分布差异较大,这说明该新型ND-FISH探针可以揭示不同的黑麦材料在染色体水平上具有较高的多态性变异,为后续的遗传多样性分析奠定了基础。2.新的黑麦染色体特异分子标记的筛选与应用:（1）利用164对不同标记的第一同源群引物筛选黑麦染色体特异分子标记,包括73对CINAU引物,黑麦第一同源群的72对ssrR引物和19对glk引物。最后获得了51对PLUG引物,64对ssrR引物和17对glk引物,利用这些引物在不同的黑麦1R中进行PCR验证,100对引物具有多态性,89对为黑麦染色体1R的特异性引物。根据多态性标记对13个供试材料进行遗传多样性分析并聚类,结果表明1R附加系的黑麦遗传差异较大,1RS.1BL易位系材料遗传差异较小,说明了栽培材料单一的遗传基础,因此将不同黑麦的多样性导入小麦,是进一步扩大黑麦种质资源的有效方法。3.利用染色体工程技术,结合细胞学鉴定方法,本研究获得并鉴定了六种小麦-黑麦新型染色体导入系材料,对1R染色体导入系的传递情况进行分析,发现其具有较高的传递率,本研究获得了1R染色质的附加系和代换系,以及涉及1RS和1RL的附加和易位系材料,它们的后代有望携带更高频率的小片段易位系。对不同来源1R异染色体系材料进行农艺性状调查,发现这批材料表现出了优良的农艺性状和抗病性,在小麦育种中具有潜在的应用价值。本研究开发的黑麦染色体特异性细胞和分子标记,可用于研究小麦品种的多样性和鉴定小麦背景中的黑麦染色质,染色体区段特异性标记可辅助黑麦染色体上优良基因导入小麦背景的育种进程。此外,获得的小麦-黑麦新型染色体附加系、代换系和片段导入系具有丰富的遗传变异,可作为后续育种的优异种质。
李建波[6]（2020）在《小麦-茸毛偃麦草新型渐渗系的分子细胞遗传学解析》文中提出中间偃麦草（Thinopyrum intermedium,2n=6x=42,JJJsJsStSt）属于小麦野生近缘植物,多年生、异花授粉,具有耐盐、耐旱、抗寒等抗逆性以及抗白粉病、条锈病、叶锈病、秆锈病、赤霉病等抗病性,是小麦远缘杂交和染色体工程育种的重要基因资源。茸毛偃麦草（Th.intermedium ssp.trichophorum,2n=6x=42,JJJsJs StSt）是中间偃麦草的一个亚种,与中间偃麦草一样具有抗逆、抗病等优良特性,区别在于其穗部和叶片上覆盖有茸毛,是小麦抗性改良的重要供体之一。TE1508是本实验室选育的小麦-茸毛偃麦草部分双二倍体,成株期免疫或高抗白粉病、条锈病、叶锈病、纹枯病等;小麦-中间偃麦草7J异体代换系源于八倍体小偃麦TAF46与普通小麦Vilmorin27杂交、回交后代,具有抗秆锈病（Ug99）与紫色胚芽鞘等性状。为了将TE1508与TAF46携带的优异农艺性状导入栽培小麦,本文实施了以下研究工作:（1）分别利用六倍体小黑麦和普通小麦与TE1508进行杂交、回交,在后代中选育了一批新型小偃麦衍生系,采用非变性荧光原位杂交（non-denaturing fluorescence in situ hybridization,ND-FISH）、基因组原位杂交（genomic in situ hybridization,GISH）、分子标记、抗性鉴定、田间农艺性状调查等方法,评估了这些材料在小麦遗传多样性改良方面的潜在价值,并初步定位了一些源于偃麦草的优异基因;（2）利用ND-FISH、分子标记等分子细胞遗传学方法,鉴定了多份小麦-中间偃麦草7J染色体易位系,并初步定位了一个苗期胚芽鞘紫色基因。主要研究结果如下:1、利用Oligo-pSc119.2、Oligo-pTa535、Oligo-pSt122、Oligo-（GAA）7、Oligo-（CAA）7、Oligo-3A1、Oligo-5SrDNA、Oligo-6H-2-100、Oligo-pTa71九种寡聚核苷酸探针组成的连续多色荧光原位杂交（multicolor fluorescence in situ hybridization,mc-FISH）与拟鹅观草总基因组DNA为探针的GISH,详细鉴定了TE1508（2n=56）的体细胞染色体核型结构,其染色体组为40W+6St+4J+6Js,具体核型为:20对小麦染色体（缺失1对4B染色体）+3对St基因组染色体（1对1St、1对6St与1对7St）+3对Js基因组染色体（1对2Js、1对4Js与1对5Js）+2对J基因组染色体（1对3J与1对4J）。在TE1508与六倍体小黑麦Currency三属杂种自交后代,发现:（1）茸毛偃麦草染色体比黑麦染色体更容易在小麦背景中传递下去;（2）茸毛偃麦草Js基因组染色体比J、St基因组染色体传递率更高。2、利用Oligo-pSc119.2、Oligo-pTa535等探针组成的mc-FISH与中间偃麦草总基因组DNA为探针的GISH,分析了本研究选育的新型小偃麦衍生系体细胞染色体核型,得到以下结果:（1）品系X24C-10是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草4J（4B）代换系;（2）品系X24C-5是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草4Js（4B）代换系;（3）品系X24C-14是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草2Js附加系;（4）品系A1082是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草3J附加系;（5）品系X24C-1-1是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草T4BS·4JL易位系;（6）品系A5-5是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草T4BS·5JsL罗宾逊易位系。3、利用澳大利亚的条锈菌小种（239 E237 A-17+33+与108 E205 A+）、叶锈菌小种（104-1,3,5,7,9,10,12,13+Lr37）、秆锈菌小种（34-1,2,3,4,5,6,7与98-1,2,（3）,（5）,6）以及我国当下流行的CYR32、CYR33与CYR34（或v26）的混合小种,对本研究选育的小偃麦衍生系进行了抗性评估,得到以下结果:（1）X24C-10（4J/4B代换系）在苗期与成株期均高抗条锈病,苗期高抗秆锈病;（2）X24C-5（4Js/4B代换系）在苗期中抗秆锈病,成株期高抗条锈病;（3）X24C-14（2Js附加系）在苗期与成株期近免疫或高抗条锈病,苗期中抗叶锈病与秆锈病;（4）A1082（3J附加系）在苗期近免疫叶锈病与秆锈病,成株期近免疫条锈病;（5）X24C-1-1（T4BS·4JL易位系）在苗期与成株期均高抗条锈病;（6）A5-5（T4BS·5JsL罗宾逊易位系）在苗期对澳大利亚毒性极强的条锈菌小种239 E237 A-17+33+表现为免疫,而对毒性较低的条锈菌小种108 E205 A+表现为高感,成株期中抗条锈病。4、利用PCR-based landmark unique gene（PLUG）与intron targeting（IT）两种分子标记,对本研究选育的小偃麦衍生系进行分子标记检测,得到以下结果:（1）获得81个4J染色体特异标记,包括38个PLUG标记与43个IT标记;（2）筛选到97个4Js染色体特异标记,包括20个PLUG标记与77个IT标记;（3）筛选到174个2Js染色体特异标记,包括41个PLUG标记与133个IT标记;（4）筛选到71个3J染色体特异标记,包括29个PLUG标记与42个IT标记;（5）筛选到106个5JsL染色体特异标记,包括32个PLUG标记与74个IT标记。5、通过比较X24C-10（4J/4B代换系）与X24C-1-1（T4BS·4JL易位系）在抗性、田间农艺性状、染色体结构等方面的差异,在4JL染色体0.60-1.00区段初步定位了一个蓝粒基因与一个抗条锈病基因,在4JS染色体或4JL染色体0.00-0.60区段初步定位了一个苗期抗秆锈病基因;通过同源基因克隆测序、分析,在4JL染色体0.60-1.00区段克隆到一个R2R3-MYB类型转录因子ThMYB4J,推测与该区段的蓝粒基因有关。6、利用ND-FISH、分子标记分析等方法,明确了7J染色体的核型结构,筛选到88个7J染色体特异标记,详细鉴定出12种小麦-中间偃麦草7J染色体易位系的核型结构,构建了7J染色体的分子标记图谱,初步定位了一个苗期胚芽鞘紫色基因（位于7JS染色体0.35-0.62区段）,并开发设计出两个新的7J染色体特异EST-PCR标记。综上所述,本研究选育了一系列携带优异农艺性状的新型小偃麦衍生系,并初步定位了1个抗条锈病基因、1个抗秆锈病基因、1个蓝粒基因、1个苗期胚芽鞘紫色基因,并克隆了1个可能与蓝粒基因有关的R2R3-MYB-like转录因子,在一定程度上弥补了小麦优异基因数目少的问题,为小麦品种改良奠定了良好的基础。
朱泓静[7]（2019）在《人工合成六倍体小黑麦Ry亚基变异分子鉴定》文中指出远缘杂交及异源多倍化能产生大量的遗传变异,是新物种形成及物种进化的重要动力,同时遗传变异能迅速拓宽遗传多样性,对作物的遗传改良具有重要价值。小麦-黑麦远缘杂交是小麦遗传改良的重要途径,不仅能整合、转移黑麦的优良基因,还可能创制新变异,产生新性状,研究其分子机制,对小麦种质资源创新和利用具有重要意义。前期通过普通小麦Shinchunaga（Triticum aestivum L.cv.Shinchunaga,2n=42,AABBDD）与秦岭黑麦（Secale cereale L.cv.Qinling,2n=14,RR）杂交,得到人工合成六倍体小黑麦,经SDS-PAGE分析,鉴定出了高分子量谷蛋白亚基（Highmolecular-weight glutenin subunit,HMW-GS）Ry消失且稳定遗传的材料。本研究通过基因克隆及分子标记揭示了Ry消失可能与其编码基因的序列缺失有关;种子胚乳灌浆期的转录组分析发现,Ry消失材料无Glu-Ry的转录产物,进一步揭示了Glu-Ry编码区发生了缺失突变;比较基因组及分子克隆分析暗示,Ry消失材料在Glu-Ry的5‘-UTR区存在序列变异,变异断点位于起始密码上游约-4000bp处;通过Genome Walking扩增变异未知序列,获得长1485bp（-5080-3595bp）序列,该变异序列与参考序列对应区段比对,存在13个单碱基变异,一个单碱基T及一个三碱基TAC的插入。综上结果,本研究初步揭示了消失的Ry亚基可能与Glu-Ry的5‘-UTR区约-4000bp位置发生了序列变异有关,该研究结果为进一步探索Ry消失的分子机制奠定了基础。
何茂洁[8]（2019）在《利用寡聚核苷酸探针鉴定小麦-黑麦易位系及其在小麦染色体的多态性分析》文中认为小麦（Triticum aestivum L.,AABBDD,2n=42）属于世界重要的三大粮食作物之一,迄今已有8000年以上的栽培历史,在世界农业的生产与发展中占有举足轻重的地位。小麦的近缘物种蕴含着丰富的优良基因资源,适用于小麦基因组的遗传改良,其中应用最成功的当属小麦-黑麦1RS.1BL易位系。但是1RS.1BL易位系小麦在长期的定向选育过程中遗传基础狭窄,并且自1990年以来产生的新的病原生理小种类型使得大多数的1RS.1BL易位系抗性逐渐减弱甚至丧失,已经不能满足现代农业的需求。因此当1RS染色体失去抗性时,很快便会被小麦育种计划所淘汰,但是不可否认1RS.1BL易位系能使小麦产量潜力增加约5%,为人类做出了巨大贡献。将黑麦的多样性引入小麦,创制1RS.1BL易位系的多样性,从而再利用1RS.1BL易位系的多样性,解决目前在小麦遗传改良中遇到的困难,是进一步利用1RS染色体的可行方法,并且创制新的小麦-黑麦易位系也迫在眉睫。“川农”号系列小麦是我国西南地区自2000年以来最主要的栽培品种,具有抗病性好、高分蘖数、延绿性等优异的农艺性状,对它们的染色体结构的分析能够对我国西南麦区的小麦育种提供更多的信息。本实验主要采用非变性荧光原位杂交（ND-FISH）结合5种寡核苷酸探针（OligopSc119.2-1、Oligo-pTa535-1、Oligo-Ku、Oligo-pSc200、Oligo-pSc250）对21个“川农”号小麦品种（系）染色体信号多态性及来源进行分析,并且对3个性状优良的“川农”号小麦品种（川农23、川农25、川农27）与不同黑麦品种（智利黑麦、秦岭黑麦、威宁黑麦、荆州黑麦）自由组合杂交后代进行纯合子代的筛选。最终得到了以下的一些创新性结果:1.建立了“川农”号小麦品种（系）的标准核型,为西南地区小麦育种提供助力。2.寡核苷酸探针Oligo-pSc119.2-1和Oligo-pTa535-1在小麦染色体上具有高度的多态性。一共21个“川农”号小麦品种,部分染色体显示出与绵阳11标准信号不同的信号模式,一共79条染色体显示出88个变异信号模式（17.9%,79/441）,其中A组染色体有26例变异（17.6%,26/147）,B组染色体40例（27.2%,40/147,不包括1RS染色体）,D组染色体13例（8.9%,13/147）。变异信号模式中,寡核苷酸探针OligopSc119.2-1的变异信号为60例（68.2%,60/88）,Oligo-pTa535-1变异信号为24例（27.3%,24/88）,4例为这两个探针信号的相互替换（4.5%,4/88）。3.为了探究信号模式多态性的来源,对两组系谱清晰简单的“川农”小麦品种与亲本进行了比较,结果表明,大部分染色体信号变异来源于亲本,多态性来源是由于杂交过程中的产生的独立分类,子代选择性继承了亲本之一的信号模式。但是川农26和川农27的7BL染色体臂上表现出于与小麦亲本和绵阳11完全不同的信号模式,其亲本川农19是一个普通小麦,另一个亲本R3301是一个1RS.1BL易位系,杂交会产生杂合染色体,导致基因组不稳定,从而使后代产生有别于亲本的染色体信号变异;另一组为川农12和川农17的5D染色体着丝粒区域信号模式不同于亲本和绵阳11,其亲本均为1RS.1BL易位系,不会形成杂合染色体,这表明正常的小麦杂交也会可以形成DNA突变,从而引起后代寡核苷酸探针信号变异。4.对三个高产的“川农”号小麦品种（川农23、川农25、川农27）与不同黑麦品种（智利黑麦、秦岭黑麦、荆州黑面、威宁黑麦）自由组合杂交后代的细胞学鉴定,筛选出了33个含有不同黑麦1RS染色体臂和不同小麦亲本的1RS.1BL易位系,18个新型3RS.6AL易位系和1个1RL.4AS、3个1RS.5BL、3个3RL.2AS等少数新型易位系材料;3个2R二体附加系、5个5R二体附加系、3个1R（1A）二体代换系材料,以及3个包含1RS.1BL,3RS.6AL的纯合双重易位材料、1个包含一对3RS.6AL的3R（2A）二体代换材料;2个小麦间4B/6B相互易位、2个小麦间5A/3B相互易位材料、2个小麦间7B/3D相互易位材料和1个包含一对3RS.6AL的小麦间5A/3B,7B/3D三重易位材料。这些新型材料具有的农艺性状还需进行后续研究确定。本实验所使用的寡核苷酸探针能够很好地替代重复序列探针的作用,用于NDFISH鉴定:寡核苷酸探针Oligo-pTa535-1和寡核苷酸探针Oligo-pSc119.2-1组合可以区分小麦的42条染色体,寡核苷酸探针Oligo-Ku、寡核苷酸探针Oligo-pSc200和寡核苷酸探针Oligo-pSc250的组合可鉴定小麦基因组中的黑麦染色体。
李小雨[9]（2019）在《携带特异HMW-GS小麦-沙融山羊草1Ssh代换系的创制》文中研究说明高分子量谷蛋白亚基（High-molecular-weight glutenin subunits,HMW-GSs）是影响小麦面粉加工品质的重要因素。沙融山羊草(Aegilops sharonensis,SshSsh,2n=2x=14)中的1Ssh染色体上具有分子量特别大的新型Glu-1Ssh。本研究在前期的工作基础上进一步进行深入观察农艺性状、分析HMW-GS和染色体组成、开发分子标记等,利用Ph突变基因和60Co-γ射线诱导衍生材料,从中创制1Ssh代换系。主要研究结果如下:1.农艺性状调查发现,这些材料农艺性状整体上倾向于良麦3号（LM3）,但在部分性状上还有一定差异。如66株系的株高普遍比LM3矮;108株系的旗叶比LM3更长更宽,茎秆更粗壮;64株系虽然结实率及千粒重和LM3较为接近,但是64株系的穗部在成熟期表现为硬粒小麦Z636和沙融山羊草一致,更容易发生自然脱落。2.将18份材料进行ND-FISH分析。结果显示染色体总数在40-45之间,携带外源Ssh染色体数目在2-8条之间。其中外源Ssh染色体均表现为完整的染色体,仅有少部分发生了断裂变异。染色体缺失主要集中在B组及D组染色体上。3.利用山羊草和CS的差异序列,从中设计出能够特异于1Ssh染色体的分子标记4对。其中2对能够特异识别1SshL,2对能够特异识别1SshS。这4对分子标记能够从分子水平上追踪及检测1Ssh染色体变化情况的。4.将66-9-17进行60Co-γ射线处理。本次诱变未能成功,推测是由于射线剂量偏大及亲本材料选择影响,使得获得的M1种子严重皱缩,未能发芽。5.选取66-9-17、66-17-52与CS ph1b进行杂交,利用Ph突变体诱导1Ssh染色体代换系等。从杂交后代F2中成功鉴定到2份1Ssh（5D）的染色体代换系。这两份代换系对于后续创制携带外源HMW-GS基因1Ssh易位系提供了材料基础。
王真真[10]（2018）在《野生二粒小麦y-型HMW-GS基因渗入普通小麦的遗传特性及其对品质改良的潜在价值》文中研究说明高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）作为小麦籽粒贮藏蛋白的重要组分,其质量和数量能直接影响到小麦面粉的加工品质。野生二粒小麦（Triticum turgitum ssp.dicoccoides,AABB,2n=4x=28）作为普通小麦的二级基因源,拥有丰富的HMW-GS等位变异。对其特异HMW-GS基因的鉴定和利用既能丰富普通小麦中HMW-GS基因的遗传多样性,又能为普通小麦品质改良提供有利的基因资源。针对普通小麦高分子量谷蛋白亚基的Glu-A1和Glu-B1位点中,1Ax和1By常不表达,1Ay基本不表达的问题,在我们前期对野生二粒小麦Glu-B1位点的沉默型1Bx和表达型1By基因,以及Glu-A1位点的1Ax基因进行分子鉴定的基础上,本研究进一步对野生二粒小麦Glu-A1位点的1Ay基因进行挖掘和利用价值研究。在对野生二粒小麦1Ay基因进行分子鉴定的基础上,用携带活性y-型HMW-GS基因的野生二粒小麦D97作父本与高产弱筋小麦品种川农16（CN16）作母本进行远缘杂交,得到异源五倍体F1（AABBD）,并通过连续多年套袋自交并逐年选育获得了一个农艺和产量性状理想的杂种高代稳定的六倍体普通小麦品系TaAy7-40,并分析后代的y-型HMW-GS基因1Ay和1By的传递、表达特性及其对普通小麦品质的遗传改良潜能。在此基础上,借助创制的携带野生二粒小麦活性1Ay基因的普通小麦基因资源,进一步探讨在普通小麦背景下的外源活性1Ay基因在普通小麦间的传递与表达特性,及其对普通小麦Glu-A1位点的丰富性能和对品质改良的利用价值。主要研究结果如下:1.本研究对野生二粒小麦D97的1Ay基因进行了克隆和原核表达,分析了该基因的结构特征以及与其它已知1Ay基因的系统进化关系,确定了该基因为一个活性1Ay基因。随后,通过SDS-PAGE分析发现,TaAy7-40品系中含有包括1Ay亚基在内的所有6条HMW-GS条带。继而对该品系以及亲本中的1Ay基因进行分子鉴定。分子克隆和序列分析显示,父本D97和后代TaAy7-40的1Ay基因的开放阅读框（ORF）长度均为1,830bp,编码608个氨基酸残基,两条序列相似度达99.2%。其编码功能也通过原核表达系统进一步确认。母本CN16的1Ay基因的ORF只有1791bp,并在其1000-1002位置存在一个提前终止密码子（TGA）,表明该基因是一个不表达蛋白的假基因。进一步对三条核苷酸序列比对发现,TaAy7-40与D97相比存在14个单核苷酸多态性（SNP）,包括13个转换和1个颠换。而在TaAy7-40和CN16之间鉴定了30个SNPs,包括25个转换和5个颠换。通过对推导的氨基酸一级结构进行分析,结果表明,与父本D97和后代TaAy7-40相比,普通小麦母本CN16中出现三处缺失和一个提前终止密码子。通过与GenBank数据库中已有的1Ay等位基因序列进行比较分析发现,TaAy7-40的1Ay基因和父本D97的紧密聚为一支,而与母本CN16的1Ay核苷酸序列距离疏远。显然,TaAy7-40的活性1Ay基因应该是来源于父本D97的。由此可见,野生二粒小麦的活性1Ay基因通过远缘杂交成功地导入到普通小麦中,并从低世代相对稳定地传递到高世代,有效地在普通小麦背景中开拓出Glu-A1位点蕴含活性1Ay基因的普通小麦遗传资源。2.对杂交双亲及后代品系中的1By基因进行了分子鉴定。核酸序列比对分析显示,父本D97和后代品系TaAy7-40的1By基因的ORF长度均为2166 bp,编码720个氨基酸残基,两条序列相似度高达99.2%,而母本CN16的1By基因的ORF只有2157bp。TaAy7-40与父本D97相比存在18个SNPs,包括11个转换和7个颠换,而在后代TaAy7-40和母本CN16之间鉴定出32个SNPs,包括27个转换和5个颠换。同样,对三者预测的氨基酸一级结构分析也表明,与父本D97和后代TaAy7-40相比,在母本CN16中出现一处缺失和一处插入。通过与GenBank数据库中已有的1By等位基因序列进行比较分析,TaAy7-40的1By基因和父本D97的1By基因以高达99的自展值聚为一支,而远离母本CN16的1By序列。显然,后代TaAy7-40的活性1By基因应该是来自于父本D97的。由此可见,野生二粒小麦的活性1By基因通过远缘杂交成功地导入到普通小麦中,并从低世代相对稳定地传递到高世代,有效地拓宽了普通小麦Glu-B1位点1By基因的遗传多样性。3.稳定品系TaAy7-40根尖染色体数目为42条,处于六倍体背景,同时含有来自野生二粒小麦Glu-A1和Glu-B1位点的活性1Ay和1By基因在内的全部6个HMW-GSs。通过生物学和农艺学分析表明,该后代品系TaAy7-40株形紧凑,其开花期、植株高度、穗长、穗形、小穗数、叶形等形态学特征趋同于母本普通小麦CN16,但与其父本D97存在明显差异。TaAy7-40的籽粒长度、宽度、厚度、千粒重和单株粒重和父本D97的存在显着差异,而和CN16之间略有差异,据此认为,渐渗系材料TaAy7-40已经拥有普通小麦相应的农艺产量性状,有利地规避了品质研究籽粒浓度效应的影响。在此基础上,对TaAy7-40与母本CN16以及推广的中筋小麦品种绵麦37和内麦9号为对照的主要加工品质参数蛋白质含量、沉降值和湿面筋含量进行了测试分析,结果表明,含有野生二粒小麦活性y-型HMW-GS基因的TaAy7-40具有比其母本CN16更好的面粉加工特性,甚至超过了中筋小麦品种绵麦37和内麦9号。据此认为,野生二粒小麦y-型亚基基因可在一定程度上提高普通小麦品质,是小麦品质改良的重要基因资源。4.在上述研究的基础上,以TaAy7-40作为母本,推广中筋小麦品种内麦9号作为父本进行品种间常规杂交。利用SDS-PAGE的方法对F2-F5后代进行1Ay亚基的追踪筛选。从F4代中挑选含有和没有1Ay亚基的姊妹系,其中Q1-F4-2-5-1和Q1-F4-2-5-5在HMW-GSs组成上仅在Glu-A1位点存在差异,前者包含1Ay亚基而后者缺失1Ay亚基。提取双亲和后代的DNA,对这些后代品系和亲本的1Ay基因进行分子鉴定,结果发现,父本内麦9号（MF429890）的序列长度为1812bp,比TaAy7-40少了18bp,并且还存在38个SNPs。氨基酸分析发现在父本内麦9号的340和355处出现了两个提前终止密码子,所以鉴定其为沉默的假基因。三个供试后代Q1-F4-1-6-1、Q1-F4-2-5-1、Q1-F4-2-5-5和的1Ay基因（MF429891、MF429892和MF429893）的序列长度和TaAy7-40的长度一致,均为1830bp,只是存在一些SNPs。氨基酸序列分析发现,MF429891和MF429892与母本TaAy7-40氨基酸数相同,均为608个,且中间没有出现提前终止密码子;而MF429893的氨基酸序列在148、151、286和355四处出现了提前终止密码子,确定该基因与父本的1Ay基因都是不表达蛋白的假基因。对收获的亲本和F5代株系进行面粉加工品质参数测定,结果发现,TaAy7-40的蛋白质含量、湿面筋含量和沉降值均显着高于父本内麦9号,表明含有野生二粒小麦HMW-GS基因的TaAy7-40具有较中筋小麦品种内麦9号更好的加工品质性状,拥有更强的面筋特性。进一步比较后代与双亲之间的品质参数发现,含有活性1Ay基因的完整6个HMW-GSs基因的后代Q1-F5-2-5-1较其双亲都具有更高的蛋白质含量和面团稳定时间,而且也显着高于其姊妹系Q1-F5-2-5-5。这些结果表明,来自野生二粒小麦的活性1Ay基因对普通小麦品质具有潜在的正向作用,同时也证明,创制的含有活性1Ay亚基基因的普通小麦中间材料TaAy7-40可以作为普通小麦品质改良的种质资源被利用。
二、小麦-黑麦远缘杂交后代储藏蛋白遗传变异分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、小麦-黑麦远缘杂交后代储藏蛋白遗传变异分析（论文提纲范文）
（1）小黑麦和小滨麦新种质的筛选及遗传组成鉴定（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 远缘杂交与小麦遗传改良 |
| 1.1.1 小麦近缘植物的优异基因 |
| 1.1.2 双二倍体在小麦遗传改良中的作用 |
| 1.1.3 异染色体系在小麦遗传改良中的作用 |
| 1.1.3.1 异附加系 |
| 1.1.3.2 异代换系 |
| 1.1.3.3 易位系 |
| 1.1.4 远缘杂交后代材料的鉴定 |
| 1.1.4.1 细胞学鉴定 |
| 1.1.4.2 原位杂交鉴定 |
| 1.1.4.3 分子标记鉴定 |
| 1.2 黑麦在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.2.1 黑麦的植物学分类及生物学特征 |
| 1.2.2 黑麦的地理分布 |
| 1.2.3 小黑麦的研究进展 |
| 1.2.4 小麦-黑麦1BL/1RS易位系 |
| 1.3 滨麦草在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.3.1 滨麦草的植物学分类及生物学特征 |
| 1.3.2 滨麦草地理分布 |
| 1.3.3 小滨麦的创制及利用 |
| 1.4 本研究的目的意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 技术路线 |
| 2.3 实验地点 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 农艺性状调查 |
| 2.4.2 白粉病抗性鉴定 |
| 2.4.3 耐盐性鉴定 |
| 2.4.4 根尖细胞学(RTC)鉴定 |
| 2.4.5 DNA提取 |
| 2.4.5.1 小麦基因组DNA提取 |
| 2.4.5.2 DNA提取相关试剂的配制 |
| 2.4.6 基因组原位杂交 |
| 2.4.6.1 染色体制片 |
| 2.4.6.2 探针配制 |
| 2.4.6.3 杂交 |
| 2.4.6.4 信号检测 |
| 2.4.7 荧光原位杂交 |
| 2.4.7.1 染色体制片 |
| 2.4.7.2 探针标记 |
| 2.4.7.3 杂交及信号检测 |
| 2.4.8 原位杂交相关试剂的配制 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 小黑麦种质系的筛选和鉴定 |
| 3.1.1 小黑麦的性状表现 |
| 3.1.2 小黑麦条锈病和白粉病抗性鉴定 |
| 3.1.3 小黑麦的耐盐性鉴定 |
| 3.1.4 小黑麦的细胞学鉴定 |
| 3.1.4.1 六倍体小黑麦的细胞学鉴定 |
| 3.1.4.2 八倍体小黑麦的细胞学鉴定 |
| 3.2 小滨麦种质系的鉴定 |
| 3.2.1 小滨麦的性状表现 |
| 3.2.2 小滨麦白粉病鉴定 |
| 3.2.3 小滨麦苗期耐盐性鉴定 |
| 3.2.4 小滨麦种质系的细胞学鉴定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 异源双二倍体的利用价值 |
| 4.2 异源双二倍体中外源物质的检测技术 |
| 4.3 小黑麦的染色体组组成及变异 |
| 4.4 小滨麦的染色体组组成及变异 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）抗白粉病、叶锈病小偃麦衍生系的分子细胞遗传学鉴定（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 小麦白粉病 |
| 1.1.1 小麦白粉病危害 |
| 1.1.2 小麦白粉病防治 |
| 1.1.3 小麦抗白粉病基因发掘 |
| 1.2 小麦叶锈病 |
| 1.2.1 小麦叶锈病危害与防治 |
| 1.2.2 小麦抗叶锈病基因发掘 |
| 1.3 近缘物种在小麦遗传改良中的应用途径 |
| 1.3.1 部分双二倍体 |
| 1.3.2 异附加系 |
| 1.3.3 异代换系 |
| 1.3.4 易位系 |
| 1.4 长穗偃麦草在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.4.1 长穗偃麦草染色体组成研究 |
| 1.4.2 长穗偃麦草抗病基因挖掘 |
| 1.4.3 普通小麦-长穗偃麦草种质创新与育种利用 |
| 1.5 外源遗传物质的检测 |
| 1.5.1 形态学鉴定 |
| 1.5.2 细胞学鉴定 |
| 1.5.3 生物化学鉴定 |
| 1.5.4 原位杂交鉴定 |
| 1.5.5 分子标记鉴定 |
| 1.6 本研究目的意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 供试材料 |
| 2.2 技术路线 |
| 2.3 试验地点 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 农艺性状调查 |
| 2.4.2 抗病性鉴定 |
| 2.4.3 小麦基因组DNA提取 |
| 2.4.4 细胞学鉴定 |
| 2.4.4.1 根尖细胞(RTC)染色体观察 |
| 2.4.4.2 基因组原位杂交 |
| 2.4.4.3 荧光原位杂交 |
| 2.4.5 分子标记分析 |
| 2.4.5.1 标记开发 |
| 2.4.5.2 DNA提取 |
| 2.4.5.3 PCR扩增 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 小偃麦双体异代换系SN19647 的鉴定 |
| 3.1.1 农艺性状调查 |
| 3.1.2 抗病性鉴定 |
| 3.1.3 GISH-FISH鉴定 |
| 3.1.4 分子标记分析 |
| 3.2 小偃麦渐渗系SN0293 系列材料的鉴定 |
| 3.2.1 农艺性状调查 |
| 3.2.2 白粉病抗性鉴定 |
| 3.2.3 GISH-FISH鉴定 |
| 3.2.4 分子标记鉴定 |
| 3.3 小偃麦渐渗系SN19578 的鉴定 |
| 3.3.1 农艺性状调查 |
| 3.3.2 抗病性鉴定 |
| 3.3.3 GISH-FISH鉴定 |
| 3.3.4 分子标记鉴定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 小偃麦衍生系应用价值 |
| 4.2 小偃麦代换系1J~S染色体的异同性 |
| 4.3 小麦近缘野生种属中第一部分同源群优异基因 |
| 4.4 本研究中鉴定方法的应用 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）5份小麦-华山新麦草衍生后代的分子细胞遗传学鉴定及重要农艺性状评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 中国的小麦育种 |
| 1.1.1 小麦育种历程 |
| 1.1.2 育种取得的主要进展 |
| 1.1.3 我国小麦育种面临的问题 |
| 1.2 小麦远缘杂交进展 |
| 1.2.1 小麦的近缘属种 |
| 1.2.2 小麦远缘杂交的亲和性 |
| 1.2.3 外源物质向小麦中的转移方式 |
| 1.2.4 小麦中外源物质的检测 |
| 1.2.5 远缘杂交在小麦改良中的作用 |
| 1.3 华山新麦草研究进展 |
| 1.3.1 新麦草属介绍 |
| 1.3.2 华山新麦草的利用价值 |
| 1.3.3 华山新麦草的远缘杂交研究进展 |
| 1.4 本研究的目的意义及内容 |
| 1.4.1 本研究的目的和意义 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 第二章 华山新麦草染色体核型分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 根尖材料的获得与处理 |
| 2.1.3 根尖染色体制片 |
| 2.1.4 核型分析及染色体模式图的绘制 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 华山新麦草的染色体图分析 |
| 2.2.2 华山新麦草的染色体核型模式图分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 小麦-华山新麦草后代DH5和DH88的分子细胞遗传学鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 细胞学观察 |
| 3.1.3 植物基因组总DNA的获得 |
| 3.1.4 基因组原位杂交(GISH)分析 |
| 3.1.5 多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
| 3.1.6 分子标记分析 |
| 3.1.7 来自华山新麦草基因组特异条带的分析和SCAR标记开发 |
| 3.1.8 田间农艺性状调查 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 DH5和DH88的细胞学观察 |
| 3.2.2 DH5和DH88的GISH鉴定 |
| 3.2.3 DH5和DH88的FISH鉴定 |
| 3.2.4 DH5和DH88的EST-STS分子标记分析 |
| 3.2.5 华山新麦草基因组特异SCAR标记开发与验证 |
| 3.2.6 DH5和DH88的农艺性状分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 小麦-华山新麦草后代DH66的分子细胞遗传学鉴定 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 细胞学观察 |
| 4.1.3 顺序FISH/GISH技术 |
| 4.1.4 小麦15K SNP芯片分析 |
| 4.1.5 分子标记(EST-STS、SSR和 SCAR)分析 |
| 4.1.6 农艺性状调查 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 DH66的细胞学观察 |
| 4.2.2 DH66的多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
| 4.2.3 DH66的15K SNP芯片分析 |
| 4.2.4 DH66的分子标记分析 |
| 4.2.5 DH66的农艺性状评价 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 小麦-华山新麦草后代TR77分子细胞遗传学的鉴定 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 细胞学观察 |
| 5.1.3 基因组原位杂交GISH技术 |
| 5.1.4 多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
| 5.1.5 小麦15K SNP育种芯片 |
| 5.1.6 分子标记分析 |
| 5.1.7 农艺性状调查 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 TR77的细胞学观察 |
| 5.2.2 TR77的分子标记分析 |
| 5.2.3 TR77的多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
| 5.2.4 TR77的SNP芯片分析 |
| 5.2.5 TR77的田间表型和白粉病抗性分析 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 小麦—华山新麦草后代DH109和小麦—滨麦后代DM131 之间的异同性分析 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.2 细胞学观察 |
| 6.1.3 分子标记分析 |
| 6.1.4 顺序FISH/GISH分析 |
| 6.1.5 小麦55K SNP育种芯片 |
| 6.1.6 抗病性及农艺性状调查 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 DH109和DM131的细胞学观察 |
| 6.2.2 DH109和DM131的GISH分析 |
| 6.2.3 DH109和DM131的分子标记分析 |
| 6.2.5 DH109和DM131的55K SNP芯片分析 |
| 6.2.6 DH109和DM131的抗病性分析和农艺性状差异 |
| 6.3 讨论 |
| 第七章 结论与创新点 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）小黑麦与冬黑麦杂交后代的细胞遗传学及SSR研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 黑麦属的研究进展 |
| 1.1.1 黑麦的分类及分布 |
| 1.1.2 黑麦优异基因的发掘 |
| 1.2 黑麦在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.2.1 六倍体小黑麦的创制 |
| 1.2.2 八倍体小黑麦的创制 |
| 1.2.3 异附加系的创制 |
| 1.2.4 异代换系的创制 |
| 1.2.5 易位系的创制 |
| 1.3 麦类作物的抗寒性研究 |
| 1.3.1 抗寒性的生理机制 |
| 1.3.2 抗寒性的遗传机制 |
| 1.3.3 北方寒地冬性小麦的研究现状 |
| 1.4 外源遗传物质的检测方法 |
| 1.4.1 形态学鉴定法 |
| 1.4.2 细胞学鉴定法 |
| 1.4.3 原位杂交检测 |
| 1.4.4 分子标记检测 |
| 1.5 研究目的及意义 |
| 1.5.1 研究目的 |
| 1.5.2 研究意义 |
| 1.6 研究技术路线 |
| 第2章 小黑麦×冬黑麦杂交试验及田间农艺性状调查 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试验材料 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 田间播种与杂交 |
| 2.3.2 田间农艺性状调查 |
| 2.4 试验结果 |
| 2.4.1 杂交试验结果 |
| 2.4.2 田间农艺性状调查结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 第3章 小黑麦杂交后代的细胞遗传学鉴定 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 试验材料 |
| 3.3 试验仪器及设备 |
| 3.4 试验方法 |
| 3.4.1 种子萌发及根尖处理 |
| 3.4.2 根尖体细胞有丝分裂染色体制片 |
| 3.4.3 花粉母细胞减数分裂制片 |
| 3.4.4 植物基因组总DNA的提取 |
| 3.4.5 探针的标记 |
| 3.4.6 原位杂交过程 |
| 3.5 试验结果 |
| 3.5.1 根尖有丝分裂染色体制片结果 |
| 3.5.2 花粉母细胞减数分裂观察 |
| 3.5.3 基因组原位杂交检测结果 |
| 3.6 本章小结 |
| 第4章 冬黑麦SSR分子标记鉴定 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 试验材料 |
| 4.3 试验仪器及设备 |
| 4.4 试验方法 |
| 4.4.1 植物基因组DNA的提取 |
| 4.4.2 PCR反应 |
| 4.4.3 SSR标记检测 |
| 4.5 试验结果 |
| 4.5.1 冬黑麦特异性SSR引物的筛选 |
| 4.5.2 冬黑麦SSR引物在杂种F1中的检测结果 |
| 4.6 本章小结 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 小黑麦与冬黑麦杂交的可行性 |
| 5.2 杂种与亲本田间农艺性状的比较 |
| 5.3 杂种后代的细胞遗传学分析 |
| 5.4 冬黑麦遗传物质的鉴定 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 图版说明 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（5）小麦背景中黑麦染色体1R的精准鉴定与遗传多样性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 黑麦属资源的研究及其应用 |
| 1.2.1 黑麦属的分类和分布 |
| 1.2.2 黑麦属基因组的研究及应用 |
| 1.2.3 黑麦属在小麦育种中的应用 |
| 1.3 黑麦染色体的鉴定 |
| 1.3.1 形态学标记 |
| 1.3.2 细胞学标记 |
| 1.3.3 原位杂交 |
| 1.3.4 生化标记 |
| 1.3.5 分子标记 |
| 1.4 黑麦属遗传物质的利用 |
| 1.5 研究目标 |
| 第二章 实验方法及步骤 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 染色体制备 |
| 2.2.2 荧光原位杂交(FISH) |
| 2.2.3 植物基因组DNA提取 |
| 2.2.4 PCR程序 |
| 2.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| 2.2.6 数据分析 |
| 2.2.7 农艺性状统计 |
| 第三章 结果及分析 |
| 3.1 黑麦染色体特异性重复序列探针的发掘 |
| 3.2 黑麦1R染色体核型多样性分析 |
| 3.3 黑麦特异性分子标记的筛选 |
| 3.3.1 黑麦特异条带的筛选 |
| 3.3.2 PCR的验证 |
| 3.4 .特异性分子标记的应用 |
| 3.4.1 分子标记的多态性分析 |
| 3.4.2 遗传距离分析 |
| 3.4.3 聚类分析 |
| 3.5 小麦-黑麦染色体导入系分析 |
| 3.5.1 小麦-黑麦染色体导入系的创制 |
| 3.5.2 小麦-黑麦1R染色体导入系的核型分析 |
| 3.5.3 小麦-黑麦1R染色体导入系的农艺性状分析 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 小麦-黑麦新型染色体导入系的培育与利用 |
| 4.2 黑麦新型细胞分子标记的开发与利用 |
| 4.3 黑麦遗传资源开发的前景 |
| 第五章 总结和展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 硕士期间研究成果 |
（6）小麦-茸毛偃麦草新型渐渗系的分子细胞遗传学解析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 小麦远缘杂交概述 |
| 1.1.1 远缘杂交在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.1.2 三属杂种在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.1.3 小麦近缘物种抗锈病基因研究进展 |
| 1.2 小麦染色体工程概述 |
| 1.2.1 小麦-近缘物种中间材料的创制 |
| 1.2.2 小麦-外源染色体易位系的创制 |
| 1.3 远缘杂交后代的鉴定 |
| 1.3.1 形态学标记鉴定 |
| 1.3.2 细胞学标记识别 |
| 1.3.3 原位杂交识别 |
| 1.3.4 分子标记检测 |
| 1.4 中间偃麦草应用价值 |
| 1.4.1 中间偃麦草在小麦遗传改良中的应用 |
| 1.4.2 茸毛偃麦草研究进展 |
| 1.4.3 中间偃麦草抗病基因的挖掘 |
| 1.5 色素相关基因应用价值 |
| 1.5.1 花青素重要功能 |
| 1.5.2 小麦近缘物种色素相关基因研究进展 |
| 1.6 论文设计 |
| 1.6.1 研究目的及意义 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 第二章 小麦-黑麦-茸毛偃麦草三属杂种后代的细胞遗传学分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 植株材料 |
| 2.2.2 研究方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 小麦-茸毛偃麦草部分双二倍体TE1508 的细胞学分析 |
| 2.3.2 六倍体小黑麦Currency的细胞学分析 |
| 2.3.3 外源染色体在三属杂种自交后代的传递率 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 三属杂种后代外源染色体传递行为 |
| 2.4.2 偃麦草Js-2 染色体与小麦4B染色体亲缘关系的推测 |
| 2.4.3 多寡聚核苷酸探针在原位杂交分析中的重要性 |
| 2.4.4 小麦三属杂种应用价值 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 小麦-茸毛偃麦草代换系4J(4B)和4J~s(4B)的鉴定及抗性评估 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 植株材料 |
| 3.2.2 研究方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的细胞学鉴定 |
| 3.3.2 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的分子标记分析 |
| 3.3.3 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的抗病性分析 |
| 3.3.4 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的农艺性状调查 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 茸毛偃麦草染色体4J与4J~s的应用价值 |
| 3.4.2 4J~s染色体对小麦品种改良的优势评估 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 小麦-茸毛偃麦草附加系2J~s和3J的分子细胞遗传学分析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 植株材料 |
| 4.2.2 研究方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的细胞学鉴定 |
| 4.3.2 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的分子标记分析 |
| 4.3.3 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的抗病性分析 |
| 4.3.4 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的农艺性状调查 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 茸毛偃麦草2J~s染色体的应用价值 |
| 4.4.2 茸毛偃麦草3J染色体的应用价值 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 小麦-茸毛偃麦草异源易位系的鉴定及优异基因挖掘 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 植株材料 |
| 5.2.2 研究方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 小麦-茸毛偃麦草T4BS·4JL易位系的鉴定 |
| 5.3.2 小麦-茸毛偃麦草T4BS·5J~sL易位系的鉴定 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 ThMYB4J转录因子的研究价值 |
| 5.4.2 茸毛偃麦草5J~s染色体的应用价值 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 偃麦草7J染色体苗期胚芽鞘紫色基因的分子细胞遗传学定位 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 植株材料 |
| 6.2.2 研究方法 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 八倍体小偃麦TAF46与7J(7A)代换系的细胞学鉴定 |
| 6.3.2 7J染色体不同变异类型的细胞学鉴定 |
| 6.3.3 7J染色体不同变异类型的的分子标记分析 |
| 6.3.4 7J染色体苗期胚芽鞘紫色基因的定位 |
| 6.3.5 7J染色体特定区段分子标记开发 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 胚芽鞘色素基因研究价值 |
| 6.4.2 胚芽鞘色素基因与籽粒色素基因之间的关系 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 全文总结与展望 |
| 7.1 全文总结 |
| 7.2 后续工作展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附图 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 |
（7）人工合成六倍体小黑麦Ry亚基变异分子鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 远缘杂交及异源多倍化 |
| 1.2 远缘杂交及异源多倍化与作物改良 |
| 1.3 小麦远缘杂交与育种改良 |
| 1.4 黑麦基因在小麦改良中的利用 |
| 1.5 小麦高分子量谷蛋白亚基研究进展 |
| 1.6 立题依据 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 提取种子蛋白及SDS-PAGE鉴定 |
| 2.2.2 DNA提取 |
| 2.2.3 HMW-GS的 Glu-Ry克隆 |
| 2.2.4 RNA提取及转录组测序分析 |
| 2.2.5 Glu-Ry的5‘-UTR区序列克隆测序 |
| 2.2.6 Glu-Ry的5‘-UTR区变异序列Genome Walking分析 |
| 2.2.7 Glu-Ry的5‘-UTR区变异序列验证 |
| 2.2.8 Glu-Ay5‘-UTR区序列鉴定 |
| 2.2.9 PCR产物回收及T-载体克隆 |
| 2.2.10 序列测定与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 SDS-PAGE鉴定 |
| 3.2 Glu-Ry基因克隆分析 |
| 3.3 Glu-Ry在胚乳中的转录鉴定 |
| 3.4 Glu-Ry5‘-UTR区变异位点分子鉴定 |
| 3.5 5‘-UTR区变异序列Genome Walking扩增克隆 |
| 3.6 5‘-UTR区变异序列验证 |
| 3.7 Glu-Ay5‘-UTR区序列鉴定 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 资助来源 |
（8）利用寡聚核苷酸探针鉴定小麦-黑麦易位系及其在小麦染色体的多态性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 小麦概述 |
| 1.1.1 小麦与近缘物种的杂交 |
| 1.1.2 小麦-黑麦远缘杂交 |
| 1.1.3 小麦-黑麦1RS.1BL易位系 |
| 1.1.4 小麦-黑麦的其他易位 |
| 1.1.5 小麦-黑麦附加系、代换系 |
| 1.1.6 小麦-黑麦远缘杂交的其他作用 |
| 1.2 外源染色体的鉴定 |
| 1.2.1 染色体C带分析 |
| 1.2.2 原位杂交技术 |
| 1.3 探针的发展 |
| 1.3.1 串联重复序列作为探针 |
| 1.3.2 寡核苷酸探针 |
| 1.4 探针的多态性 |
| 1.5 分子标记分析 |
| 1.6 本研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 利用ND-FISH分析“川农”号小麦中寡核苷酸探针多态性实验材料 |
| 2.1.2 利用ND-FISH鉴定不同来源的小麦-黑麦易位系实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 发根及预处理 |
| 2.2.2 中期染色体制片 |
| 2.2.3 非变性荧光原位杂交ND-FISH |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 利用ND-FISH分析“川农”号小麦中寡核苷酸探针的多态性 |
| 3.1.1 A组染色体上ND-FISH信号多态性 |
| 3.1.2 B组染色体上ND-FISH信号多态性 |
| 3.1.3 D组染色体上ND-FISH信号多态性 |
| 3.1.4 部分“川农”小麦品种与亲本的ND-FISH信号对比 |
| 3.2 利用ND-FISH鉴定不同来源的小麦-黑麦易位系 |
| 3.2.1 构建亲本的标准ND-FISH图 |
| 3.2.2 川农23 与黑麦杂交后代的细胞学鉴定 |
| 3.2.3 川农25 与黑麦杂交后代的细胞学鉴定 |
| 3.2.4 川农27 与威宁黑麦杂交后代的细胞学鉴定 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 利用ND-FISH分析“川农”号小麦中寡核苷酸探针的多态性 |
| 4.1.1 “川农“号小麦品种染色体结构的研究 |
| 4.1.2 ND-FISH信号模式的多态性 |
| 4.1.3 ND-FISH信号多态性的来源 |
| 4.2 利用ND-FISH鉴定不同来源的小麦-黑麦纯合易位系 |
| 4.2.1 不同黑麦抗病性的差异 |
| 4.2.2 小麦新1RS.1BL易位系的选育 |
| 4.2.3 小麦3RS.6AL易位系的选育 |
| 4.2.4 其他小麦-黑麦易位系的选育 |
| 4.2.5 小麦-黑麦附加系和代换系的选育 |
| 4.2.6 小麦-黑麦多重易位和小麦间易位的选育 |
| 4.2.7 杂交子代的染色体多态性 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（9）携带特异HMW-GS小麦-沙融山羊草1Ssh代换系的创制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 高分子量谷蛋白研究概况 |
| 1.1.1 普通小麦高分子量特性 |
| 1.1.2 小麦近缘物种高分子量谷蛋白挖掘 |
| 1.2 外源目标基因转移方式 |
| 1.2.1 远缘杂交 |
| 1.2.2 组织培养 |
| 1.2.3 电离辐射 |
| 1.2.4 Ph遗传控制基因 |
| 1.3 外源目标基因的检测 |
| 1.3.1 农艺性状调查 |
| 1.3.2 生化标记检测 |
| 1.3.3 PCR分子标记检测 |
| 1.3.4 细胞学检测 |
| 2 立题依据 |
| 3 实验材料与方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 杂交及回交 |
| 3.2.2 HMW-GS组成纯合株系农艺性状观察分析 |
| 3.2.3 SDS-PAGE分析 |
| 3.2.3.1 种子样品前期处理 |
| 3.2.3.2 电泳凝胶制备及电泳 |
| 3.2.4 染色体1A、1B、1D分子标记筛选 |
| 3.2.4.1 基因组DNA提取 |
| 3.2.4.2 1A、1B及1D特异标记筛选 |
| 3.2.5 细胞学观察分析 |
| 3.2.6 沙融山羊草1Ssh染色体分子标记开发 |
| 3.2.6.1 引物设计 |
| 3.2.6.2 基因组DNA提取 |
| 3.2.6.3 分子标记PCR验证 |
| 3.2.7 ~(60)Co-γ射线诱导小麦-沙融山羊草相互易位染色体系 |
| 3.2.7.1 杂交辐射处理 |
| 3.2.7.2 杂交辐照处理后M1 代种子SDS-PAGE及分子标记筛选 |
| 3.2.7.3 杂交辐照处理后M1 代种子ND-FISH鉴定 |
| 3.2.8 Ph基因诱导小麦-沙融山羊草相互易位染色体系 |
| 3.2.8.1 杂交处理 |
| 3.2.8.2 杂交处理后F1/F2 代种子SDS-PAGE及分子标记筛选 |
| 3.2.8.3 杂交处理后F1/F2 代种子ND-FISH鉴定 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 农艺性状观察及HMW-GS追踪检测 |
| 4.2 ND-FISH观察 |
| 4.3 1A、1B及1D染色体分子标记筛选验证 |
| 4.4 1S~(sh)染色体分子标记开发 |
| 4.5 ~(60)Co-γ射线和Ph控制基因诱导杂种M1及F1/F2 性状结果 |
| 4.5.1 ~(60)Co-γ射线诱导杂种M |
| 4.5.2 Ph基因诱导杂种F1/F |
| 4.5.2.1 66-17-52×CSph1b F1 种子SDS-PAGE及 ND-FISH鉴定 |
| 4.5.2.2 66-17-52×CSph1b F2 种子SDS-PAGE及 ND-FISH鉴定 |
| 4.5.2.3 66-17-52×CSph1b F2 种子分子标记鉴定 |
| 5 讨论 |
| 5.1 18 个纯合材料的性状还需要进一步改良 |
| 5.2 ~1Ssh染色体分子标记在在小麦-沙融山羊草易位系中的应用 |
| 5.3 Ph突变基因在创制小麦-沙融山羊草易位系中的应用 |
| 5.4 ~(60)Co-γ在创制小麦-沙融山羊草易位系中的应用 |
| 5.5 1S~(sh)(5D)代换系在创制小麦-沙融山羊草易位系中的应用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（10）野生二粒小麦y-型HMW-GS基因渗入普通小麦的遗传特性及其对品质改良的潜在价值（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 小麦的起源及演化 |
| 1.1.1 小麦在我国的栽培历史 |
| 1.1.2 远缘杂交在小麦育种中的利用 |
| 1.2 野生二粒小麦是普通小麦育种的重要种质资源 |
| 1.2.1 野生二粒小麦的地理分布及其与普通小麦的亲缘关系 |
| 1.2.2 野生二粒小麦的主要生物学性状 |
| 1.2.3 野生二粒小麦有益性状及其在普通小麦中的应用研究 |
| 1.3 小麦高分子量谷蛋白与面粉的加工品质 |
| 1.3.1 小麦种子储藏蛋白的分类 |
| 1.3.2 谷蛋白分类 |
| 1.3.3 HMW-GS蛋白的分离 |
| 1.3.4 HMW-GS的染色体定位和等位变异 |
| 1.3.5 HMW-GS基因的结构特征 |
| 1.3.6 HMW-GS基因的分子克隆 |
| 1.3.7 HMW-GS与品质的关系 |
| 1.3.8 HMW-GS基因沉默研究概况 |
| 1.3.9 1Ay亚基基因研究进展 |
| 1.3.10 1By亚基基因研究进展 |
| 1.4 本研究立题依据和主要研究内容 |
| 第二章 来自野生二粒小麦的活性1Ay基因及其在普通小麦中稳定表达的分子鉴定 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 种子全蛋白提取 |
| 2.2.3 SDS-PAGE凝胶电泳 |
| 2.2.4 基因组DNA提取 |
| 2.2.5 基因组DNA的 PCR扩增 |
| 2.2.6 PCR产物T-载体克隆 |
| 2.2.7 热击感受态的制备 |
| 2.2.8 转化大肠杆菌 |
| 2.2.9 阳性克隆筛选 |
| 2.2.10 提取质粒 |
| 2.2.11 定向缺失制备亚克隆 |
| 2.2.12 DNA序列测定与分析 |
| 2.2.13 克隆基因的体外表达 |
| 2.2.14 序列系统进化分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 野生二粒小麦D97 及后代品系TaAy7-40的HMW-GS组成 |
| 2.3.2 野生二粒小麦D97、普通小麦CN16 及其后代品系TaAy7-40中1Ay基因的分子鉴定 |
| 2.3.3 野生二粒小麦D97的1Ay基因编码区的结构特征 |
| 2.3.4 后代品系与亲本1Ay基因的序列比对分析 |
| 2.3.5 三个克隆的Glu-1Ay等位基因的系统发育分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 TaAy7-40和D97的1Ay等位基因的鉴定 |
| 2.4.2 1Ay序列的变异 |
| 2.4.3 野生二粒小麦1Ay基因成功地被转移并整合入普通小麦 |
| 2.4.4 野生二粒小麦有效地丰富普通小麦Glu-1Ay等位基因的遗传多样性 |
| 第三章 野生二粒小麦Glu-1By等位基因在普通小麦中稳定表达的分子特性 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.2.2.1 谷蛋白提取和SDS-PAGE分析 |
| 3.2.2.2 DNA提取和PCR扩增 |
| 3.2.2.3 PCR片段的克隆与序列分析 |
| 3.2.2.4 序列比对和聚类分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 后代品系TaAy7-40的1By亚基的SDS-PAGE分析 |
| 3.3.2 1By基因的分子鉴定 |
| 3.3.3 后代品系和亲本1By基因的序列比对分析 |
| 3.3.4 后代品系和双亲1By基因的系统进化分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 TaAy7-40和CN16的1By等位基因的鉴定 |
| 3.4.2 野生二粒小麦有效的丰富普通小麦Glu-B1-2 等位基因的遗传多样性 |
| 第四章 野生二粒小麦y-型HMW-GS对普通小麦加工品质的潜在利用价值 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.2.2.1 根尖染色体观察 |
| 4.2.2.2 面粉加工品质测定及参数分析 |
| 4.2.2.2.1 润麦并制粉 |
| 4.2.2.2.2 蛋白质含量的测定 |
| 4.2.2.2.3 面筋含量的测定 |
| 4.2.2.2.4 沉降值的测定 |
| 4.2.2.2.5 粉质参数的测定 |
| 4.2.2.3 统计分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 杂交后代TaAy7-40 的表型和核型性状分析 |
| 4.3.2 后代TaAy7-40 加工品质比较 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 稳定品系TaAy7-40 中的活性1Ay基因在普通小麦间的稳定传递及其对品质的改良潜能 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 谷蛋白提取和SDS-PAGE分析 |
| 5.2.3 DNA提取和PCR扩增 |
| 5.2.4 PCR片段的克隆与序列分析 |
| 5.2.5 序列比对和聚类分析 |
| 5.2.6 农艺性状测定 |
| 5.2.7 面粉加工品质测定及参数分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 杂种F_1 田间植株 |
| 5.3.2 SDS-PAGE分析 |
| 5.3.3 F_4 代姊妹系和父本N9的1Ay基因的分子鉴定 |
| 5.3.3.1 1Ay序列的分子克隆 |
| 5.3.3.2 1Ay的核苷酸序列分析 |
| 5.3.3.3 1Ay的氨基酸序列分析 |
| 5.3.4 系统进化分析 |
| 5.3.5 F_5 代稳定株系及其双亲的田间农艺性状 |
| 5.3.6 F_5 代稳定株系及其双亲的加工品质分析 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 1Ay基因在普通小麦中的遗传稳定性 |
| 5.4.2 新的1Ay等位基因的鉴定及其等位变异性 |
| 5.4.3 Glu-A1位点的HMW-GS对小麦加工品质的贡献 |
| 本研究的主要创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间已发表的论文和完成的专利 |
四、小麦-黑麦远缘杂交后代储藏蛋白遗传变异分析（论文参考文献）
- [1]小黑麦和小滨麦新种质的筛选及遗传组成鉴定[D]. 徐勤省. 山东农业大学, 2021(01)
- [2]抗白粉病、叶锈病小偃麦衍生系的分子细胞遗传学鉴定[D]. 李明珠. 山东农业大学, 2021
- [3]5份小麦-华山新麦草衍生后代的分子细胞遗传学鉴定及重要农艺性状评价[D]. 李家创. 西北农林科技大学, 2021
- [4]小黑麦与冬黑麦杂交后代的细胞遗传学及SSR研究[D]. 杨军丽. 哈尔滨师范大学, 2020(01)
- [5]小麦背景中黑麦染色体1R的精准鉴定与遗传多样性研究[D]. 徐云芳. 电子科技大学, 2020(07)
- [6]小麦-茸毛偃麦草新型渐渗系的分子细胞遗传学解析[D]. 李建波. 电子科技大学, 2020(07)
- [7]人工合成六倍体小黑麦Ry亚基变异分子鉴定[D]. 朱泓静. 四川农业大学, 2019
- [8]利用寡聚核苷酸探针鉴定小麦-黑麦易位系及其在小麦染色体的多态性分析[D]. 何茂洁. 四川农业大学, 2019(01)
- [9]携带特异HMW-GS小麦-沙融山羊草1Ssh代换系的创制[D]. 李小雨. 四川农业大学, 2019(01)
- [10]野生二粒小麦y-型HMW-GS基因渗入普通小麦的遗传特性及其对品质改良的潜在价值[D]. 王真真. 四川农业大学, 2018