化学发光检测性激素水平诊断继发性闭经

一、化学发光法检测性激素水平诊断继发性闭经（论文文献综述）

田丰丰,刘安娜,刘芳^[1]（2021）在《血清性激素检验在女性闭经后萎缩性尿道炎诊断中的应用价值》文中指出目的检测女性闭经后萎缩性尿道炎患者的血清性激素水平,以探讨性激素测定在诊断女性闭经后萎缩性尿道炎中的应用价值。方法选择2016年1月至2019年12月本院收治的132例闭经后萎缩性尿道炎患者为观察组,年龄范围为22～53岁;选取同期在本院进行健康体检的月经正常女性180例为对照组,年龄范围为23～49岁。对以上两组受试者采用化学发光法进行血清促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）、促黄体生成素（luteotropic hormone,LH）、泌乳素（prolactin,PRL）、孕酮（progesterone,P）、睾酮（testostertone,T）及雌二醇（estradiol,E2）水平检测。结果观察组FSH、LH、PRL水平分别为（10.52±12.58）mIU/ml、（11.08±8.67）mIU/ml、（33.36±27.89）μg/L,均明显高于正常对照组（5.17±2.79）mIU/ml、（4.21±2.43）mIU/ml、（15.94±5.83） μg/L,E2水平为（33.44±10.23）pg/ml,明显低于正常对照组（48.11±17.06）pg/ml,差异均有统计学意义（均P<0.05）;两组受检者T、P水平比较,差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论血清性激素水平能有效反映女性闭经后萎缩性尿道炎情况,可为临床诊断和治疗提供可靠的依据。

陈思^[2]（2021）在《补肾活血汤改善早发性卵巢功能不全的临床研究和调节模型小鼠Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制研究》文中指出背景:近年来早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）发病率呈年轻化而且不断上升的趋势,严重影响女性生殖健康。POI发病原因复杂,病机不明,早期诊断不健全,治疗效果不确切,因此如何探明POI的病因和机制、寻找早期诊断标准和探索有效治疗方法仍然是当前医学领域面临的重难点问题。中医中药治疗具有多成分,多途径,多靶点的整体调节功能。针对肾虚血瘀型POI,补肾活血法是妇科治疗本病的常用方法。本课题以中西医相关理论、临床疗效观察和实验研究结果等为依据,阐释补肾活血汤防治POI的临床证治效果和分子学机制,为中医药有效治疗POI提供科学依据。目的:通过临床研究评价补肾活血汤对肾虚血瘀型POI的防治作用,并通过实验研究从Keap1/Nrf2/ARE信号通路角度探讨补肾活血汤治疗POI的机制。方法:1.临床研究:将60例POI患者随机分为补肾活血汤组20例（予补肾活血汤口服治疗）、芬吗通组20例（予芬吗通1/10 口服治疗）和补肾活血汤联合芬吗通治疗组20例（予补肾活血汤和芬吗通1/10联合口服治疗）,所有患者分别给予相应药物治疗3个月经周期,比较三组POI患者治疗前后中医症候积分和Kupperman评分的改善情况,血清雌二醇（E2）和卵泡刺激素（FSH）水平变化,血清超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的改变,B超卵巢体积（OV）、窦卵泡数（AFC）、卵巢基质血流阻力指数（RI）的变化。2.实验研究:2.1采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析补肾活血汤水提物的化学成分。2.2筛选动情周期正常的C57BL/6J雌鼠20只,随机分为空白对照组5只、模型组5只、阳性药补佳乐对照组5只、补肾活血汤组5只。除空白对照组5只外,其余15只小鼠均予皮下注射ZP3多肽,1周后加强造模,建立自身免疫性POI动物模型。加强造模1周后,空白对照组和模型组每天灌胃生理盐水0.2mL,补佳乐组小鼠按0.13 mg/kg给予补佳乐溶液0.2 mL,补肾活血汤组小鼠按12.64 g/kg给补肾活血汤0.2 mL,持续28天。给药结束前10天取阴道脱落细胞巴氏染色观察小鼠动情周期变化。给药结束次日收集标本,计算脾脏、卵巢、子宫和胸腺的脏器指数,ELISA法检测血清抗ZP抗体（AzpAb）水平,性激素抗苗勒管激素（AMH）、E2、FSH和黄体生成素（LH）水平及SOD、MDA的变化;卵巢组织H&E染色、免疫组化染色和ZP抗体免疫荧光染色,光学显微镜观察卵巢组织形态变化、Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1的表达及ZP蛋白表达情况,Q-PCR检测卵巢中Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1 mRNA 水平变化。结果:1.临床研究所有入组患者的平均年龄为34.65±3.78岁,36-40岁患者占50%。POI患者合并免疫性疾病4例、心理应激9例,环境应激4例、手术6例、感染2例、有家族史1例。经治疗3个周期后,补肾活血汤组在综合疗效（88%）、中医症候疗效（82%）、Kupperman评分（30.07±3.74）与芬吗通组（78%、72%、31.61±3.18）和补肾活血汤联合芬吗通组（94%、88%、28.94±3.83）相当。在改善临床症状上,中药治疗后潮热汗出、失眠、疲倦乏力的症状明显改善（P<0.05）,芬吗通治疗后肌肉痛的症状有所改善（P<0.05）,补肾活血汤联合芬吗通治疗后潮热汗出、失眠、头晕、疲倦乏力、关节痛的症状改善明显（P<0.05）。三组在下调FSH水平方面差异均有显着性（P<0.05）,而三组治疗前后E2和OV和AFC均无明显变化（P>0.05）。补肾活血汤组治疗前后RI值下降明显（P<0.05）,余两组RI均无明显差异。治疗后补肾活血汤组和芬吗通组SOD上升（均P<0.05）。补肾活血汤组MDA下降明显（P<0.05）,而芬吗通组和补肾活血汤联合芬吗通组均无此变化。临床研究期间三组患者均无不良反应。2实验研究2.1 BSHXT水提物中鉴别并定量分析了 21种中药单体化合物。2.2与空白组相比,模型组小鼠体重明显下降（P<0.01）;与模型组相比,补肾活血汤组小鼠体重显着上升（P<0.05）。空白组小鼠动情周期紊乱率0%,模型组小鼠动情周期紊乱率100%,补佳乐组小鼠动情周期紊乱率60%,补肾活血汤组小鼠动情周期紊乱率80%。给药28天后收取标本并进行相关指标测定。与空白组相比,模型组小鼠卵巢指数下降明显（P<0.05）;与模型组比较,补佳乐组和补肾活血汤组卵巢指数均上升明显（P<0.01、P<0.05）。与空白对照组相比,模型组小鼠卵巢指数、子宫指数和胸腺指数下降（P<0.01）,脾脏指数上升（P<0.01）;与模型组相比,补佳乐组和补肾活血汤组卵巢指数上升（P<0.01、P<0.05）,且补肾活血汤组脾脏指数下降（P<0.05）。卵巢组织H&E染色和ZP免疫荧光染色表明,补肾活血汤能够明显减少小鼠卵巢中炎症细胞浸润和透明带的形成,且增加始基卵泡和次级卵泡数目、减少闭锁卵泡数目,而补佳乐无此作用。ELISA法检测小鼠血清中性激素（E2、FSH、LH、AMH）、AzpAb和SOD、MDA含量发现,与空白组相比,模型组小鼠性激素呈低雌高促水平,且AMH水平下降明显,而补佳乐和补肾活血汤均能不同程度逆转异常性激素状态;模型组血清AzpAb水平明显升高,补肾活血汤组下调AzpAb水平（P<0.01）优于Positive组（P<0.05）;模型组SOD明显下降、MDA水平明显上升,药物治疗后,补佳乐组和补肾活血汤组SOD、MDA水平均有改善。免疫组化和Q-PCR结果提示,与空白组相比,模型组Nrf2、Keap1、NQO1的表达及其mRNA水平明显下降,虽HO-1表达无明显变化,但其mRNA水平下降明显（P<0.05）。与模型组比较,补肾活血汤组Nrf2及其mRNA表达均增强,补佳乐组只能部分增强Keap1、NQO1 mRNA水平。结论:1.补肾活血汤可明显改善中医症候积分、临床症状积分、性激素水平,在改善卵巢RI和氧化应激状态方面优于芬吗通1/10和补肾活血汤联合芬吗通1/10治疗。2.补肾活血汤水提液中鉴别并定量分析了 21种中药单体化合物。3.ZP3成功诱导的POI免疫性模型小鼠卵巢发生炎症且功能下降,补肾活血汤不仅能减少小鼠卵巢中炎症细胞浸润和透明带的形成,逆转异常性激素状态,还能下调血清AzpAb,并激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路及下游抗氧化酶SOD、HO-1和NQO1活性。因此补肾活血汤可能通过Keap1/Nrf2/ARE信号通路改善模型小鼠卵巢功能、减少氧化应激状态并调节机体免疫。

陈春林^[3]（2020）在《麒麟丸对卵巢功能减退模型小鼠的药效作用及其主要成分淫羊霍苷的作用机制研究》文中研究说明目的:1、建立环磷酰胺（CTX）诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型;2、评估麒麟丸对CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型的药效作用;3、探索CTX和淫羊藿苷对人卵巢颗粒细胞（KGN细胞）的作用浓度和时间;4、探索麒麟丸的主要成分之一淫羊藿苷对CTX诱导的KGN细胞卵巢功能减退模型作用的分子机制。方法:1、动物实验（1）建立CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型:20只C57BL/6雌鼠采用随机数字表法平均分为2组,正常对照组和CTX造模组,CTX造模组采用CTX腹腔注射造模,正常对照组注射等体积的生理盐水,共15天。期间观察小鼠一般情况、被毛、体重、活动量及动情周期等,处死小鼠后取子宫等脏器称重并计算各脏器指数,取子宫、卵巢等进行苏木素-伊红（HE）染色观察其组织结构特征;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清抗苗勒管激素（AMH）、卵泡刺激素（FSH）、孕激素（Prog）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）的含量;2、动物实验（2）麒麟丸对CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型的药效探索:确认造模成功后,再将60只C57BL/6雌鼠采用随机数字表法平均分为6组,正常对照组、CTX造模组、阳性品对照组、麒麟丸低、中、高剂量组,每组10只/组。对除外正常对照组的其余各组均采用CTX腹腔注射造模,共15天,然后阳性品对照组给予调经助孕丸干预,麒麟丸低、中、高剂量组给予麒麟丸干预,共30天;期间观察小鼠一般情况、被毛、体重、活动量及动情周期等;45天后全部解剖取材,计算各脏器指数;取子宫、卵巢等进行HE染色观察其组织结构特征;免疫组织化学（IHC）染色检测小鼠卵巢及子宫表达雌激素受体（ER）、卵泡刺激素受体（FSHR）、黄体生成素受体（LHR）、孕激素受体（Pg R）蛋白的情况;采用ELISA检测血清激素AMH、FSH、Prog、LH、E2的含量;采用蛋白印迹（Western Blot）实验检测小鼠卵巢及子宫组织中ER、FSHR、LHR、Pg R蛋白表达量,荧光定量PCR（SYBR Green法）检测小鼠卵巢及子宫组织中ER、FSHR、Pg R、LHR的m RNA表达水平;3、细胞实验（1）探索CTX和淫羊藿苷对KGN细胞的作用浓度和时间:用KGN细胞作为研究对象,对其进行培养、传代、冻存、复苏,通过细胞增殖/毒性实验,细胞凋亡实验,细胞因子分泌变化情况选择合理的药物浓度和作用时间,采用CCK8检测不同浓度的淫羊藿苷或者CTX在不同作用时间长度下对KGN细胞的增殖作用,流式细胞技术检测KGN细胞的凋亡情况,ELISA检测细胞上清中TGF-β和E2-β的分泌表达情况;4、细胞实验（2）探索淫羊藿苷对CTX诱导的KGN细胞卵巢功能减退模型作用的分子机制:使用smad/TGF-β通路的激活剂/阻断剂（重组蛋白TGF-β/IDT-1）研究在TGF-β/IDT-1的作用下,淫羊霍苷/CTX对KGN细胞凋亡和对细胞PI3K/AKT通路和smad/TGF-β通路的调控作用。用流式细胞技术检测淫羊霍苷和TGF-β,CTX和IDT-1相互作用下KGN细胞的凋亡变化情况,Western Blot检测淫羊霍苷和TGF-β,CTX和IDT-1相互作用下细胞因子PI3K、AKT、TGF-β、smad1的表达变化;Elisa检测淫羊霍苷和CTX共同刺激KGN细胞后,细胞上清中TGF-β和E2-β的分泌表达情况。结果:一、动物实验（1）建立CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型的结果1、与正常对照组比较,CTX造模组小鼠一般情况差,容易出现烦躁、愤怒等现象,被毛蓬松无光泽,后期甚至出现脱毛现象,且日常活动量显着减少,阴道脱落细胞涂片显示小鼠动情周期紊乱,表现为动情间期延长、无动情期等,甚至造模后期出现小鼠阴道上皮细胞数量少,细胞体积小,中层及底层细胞增多,表层成熟的角化上皮减少,无动情周期;2、与正常对照组比较,CTX造模组小鼠子宫重量及子宫系数均减轻（P﹤0.05）,差异具有统计学意义;子宫和卵巢的大体及镜下均呈明显萎缩形态,子宫大体变细长,管径变小;镜下观察子宫壁变薄,子宫内膜腺体数量减少,腺体短而直,腺上皮细胞扁平且分泌现象少,子宫内膜间质细胞体积小,一般呈梭形,边界染色清晰,其内炎症反应细胞少;卵巢呈现多囊样发育,卵泡闭锁,各级卵泡数量减少,囊状扩张的卵泡增多,颗粒层细胞数减少,层次减少,卵泡内卵母细胞或放射冠消失,黄体数下降并有不完全黄素化,卵巢间质增生并纤维化;3、与正常对照组比较,CTX造模组小鼠AMH、E2降低（P<0.05）,FSH升高（P<0.05）,差异具有统计学意义。二、动物实验（2）麒麟丸对CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型的药效作用探索的结果1、与正常对照组比较,CTX造模组小鼠情况同动物实验（1）的结果;2、与CTX造模组比较,麒麟丸低、中、高剂量组小鼠给药后期一般情况好转,烦躁、易激惹现象缓解,被毛整洁有光泽,且日常活动量增加,阴道脱落细胞涂片显示小鼠动情周期恢复正常;3、与CTX造模组比较,阳性对照组、麒麟丸低、中、高剂量组小鼠子宫重量及子宫系数增加,差异具有统计学差异（P﹤0.05）;4、与CTX造模组比较,麒麟丸低、中、高剂量组小鼠子宫和卵巢的大体及镜下形态均正常,子宫大体形态较短粗,管径较大;镜下观察子宫壁变厚,子宫内膜腺体数量增加,腺体长而弯曲,腺上皮细胞呈立方状或柱状且分泌现象多,子宫内膜间质细胞体积大,呈椭圆形、梭形或不规则形,边界染色清晰,其内见较多炎症反应细胞;卵巢中可见发育中的各级卵泡,各级卵泡数量增加,囊状扩张的卵泡数量减少,颗粒层细胞数增加,常可见卵泡内卵母细胞,并见正常黄体形成;5、与CTX造模组比较,麒麟丸低、中、高剂量组小鼠AMH、E2均升高（P<0.05）,差异具有统计学意义;麒麟丸低、中、高剂量组小鼠FSH降低（P<0.05）差异具有统计学意义;6、与CTX造模组比较,麒麟丸低、中、高剂量组小鼠卵巢免疫组化及WB显示ER、Pg R蛋白均升高（P<0.05）,差异具有统计学意义;小鼠子宫及卵巢组织中ER、Pg R的m RNA均升高（P<0.05）,差异具有统计学意义;FSHR、LHR的m RNA均降低（P<0.05）,差异具有统计学意义;7、与正常对照组比较,麒麟丸低、中、高剂量组小鼠一般情况、阴道脱落细胞涂片、性激素检测均无差异,体重、子宫、卵巢、脾脏、肾脏、垂体、后爪的重量均无差异,组织学形态正常无差异,小鼠卵巢及子宫组织中表达ER、FSHR、LHR、Pg R蛋白的情况无差异,表达ER、FSHR、Pg R、LHR基因的m RNA水平无差异;8、与阳性对照组比较,麒麟丸低、中、高剂量组小鼠一般情况、阴道脱落细胞涂片、性激素检测均无差异,体重、子宫、卵巢、脾脏、肾脏、垂体、后爪的重量均无差异,组织学形态无差异,小鼠卵巢及子宫组织中表达ER、FSHR、LHR、Pg R蛋白的情况无差异,表达ER、FSHR、LHR、Pg R基因的m RNA水平无差异。三、细胞实验（1）探索CTX和淫羊藿苷对KGN细胞的作用浓度和时间结果1、当CTX高于10μM时,其对KGN细胞呈现出一个明显的毒性作用,且与药物浓度呈正相关关系;同时随着时间的延长,不同浓度的CTX都表现出明显的毒性作用。1μM-25μM的淫羊霍苷能促进KGN细胞的增殖,当药物浓度高于25μM后,淫羊霍苷对KGN细胞的增殖有一定的抑制作用,但细胞仍有正常增殖;2、CTX能促进细胞凋亡的增加,且随着浓度的增加,细胞凋亡数量增加;当CTX大于10μM后,CTX的浓度与KGN细胞的凋亡两者呈正相关;淫羊霍苷在1μM-100μM的浓度范围内对KGN的细胞凋亡基本没有影响;3、CTX能导致TGF-β的分泌增加,且随着浓度的增加而增加,其中在CTX为5μM时,能够抑制细胞TGF-β的分泌;E2-β的分泌变化与CTX的浓度呈负相关,这提示CTX对E2-β具有一定的调控能力;淫羊霍苷能促进KGN细胞分泌E2-β,抑制TGF-β的分泌,而且对这2个因子的分泌调控均在5μM浓度下达到最大效果。四、细胞实验（2）探索淫羊藿苷对CTX诱导的KGN细胞卵巢功能减退模型作用的分子机制结果1、单独给予淫羊霍苷或CTX刺激KGN细胞时都可以促进细胞凋亡,但是淫羊霍苷较CTX促进细胞凋亡的作用弱,将淫羊霍苷和CTX共同刺激KGN细胞时,细胞凋亡较单独给予CTX时减弱（P<0.01）,差异较明显并有统计学意义。2、单独给予淫羊霍苷刺激KGN细胞时,PI3K、AKT分泌增加;单独给予CTX刺激时,PI3K、AKT、TGF-β、smad1分泌均增加;给予淫羊霍苷和CTX共同刺激KGN细胞时,PI3K、AKT、TGF-β、smad1分泌均增加,但是TGF-β、smad1增加较单独给予CTX时弱。3、单独给予淫羊霍苷刺激KGN细胞时TGF-β分泌减少,E2-β分泌增加（P<0.05）;单独给予CTX刺激KGN细胞时TGF-β增加、E2-β减少（P<0.05）;同时给予淫羊霍苷和CTX刺激KGN细胞时TGF-β增加、E2-β减少,并且TGF-β增加较单独给予CTX时弱,E2-β减少较单独给予CTX时弱（P<0.05）,差异均有统计学意义。4、给予淫羊霍苷和TGF-β共同刺激KGN细胞时,KGN细胞凋亡较单独给予TGF-β时减少,较单独给予淫羊霍苷时增加（P<0.01）;给予CTX和IDT-1共同刺激KGN细胞时,KGN细胞凋亡较单独给予IDT-1时增加,较单独给予CTX时减少（P<0.01）,差异显着且有统计学意义。5、单独给予淫羊霍苷作用KGN细胞时,PI3K、AKT分泌增加,单独给予TGF-β时,PI3K、AKT、TGF-β、smad1分泌均增加,同时给予淫羊霍苷和TGF-β时,PI3K、AKT、TGF-β、smad1分泌均增加,但是TGF-β、smad1增加较单独给予TGF-β弱;单独给予IDT-1时,PI3K、AKT、TGF-β、smad1均无分泌,单独给予CTX时,PI3K、AKT、TGF-β、smad1分泌均增加,同时给予CTX和IDT-1时,PI3K、AKT无分泌,TGF-β、smad1仍有分泌。结论:1、采用CTX的造模方法可形成卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型;2、麒麟丸可以用于治疗CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）模型小鼠;3、麒麟丸在临床等效剂量下,对CTX诱导的卵巢功能减退（肾虚证）小鼠模型未见不良反应;4、在体外细胞实验中,淫羊霍苷对KGN细胞没有明显的促凋亡作用,同时能促进E2-β的分泌,24h作用时间下,在5μM时促进E2-β的分泌最为明显;5、在体外细胞实验中,当CTX浓度高于10μM时,其对KGN细胞呈现出一个明显的毒性作用,且与药物浓度呈正相关关系;而对细胞的毒性作用会随着刺激时间的延长而累积;同时CTX高于10μM时会对KGN细胞有明显的促凋亡作用,同时抑制E2-β的分泌,但促进TGF-β的分泌;6、CTX对KGN细胞的凋亡作用依赖于smad/TGF-β通路的激活,而淫羊霍苷能有效的阻断smad/TGF-β通路的激活来减少KGN细胞的凋亡,从而达到保护KGN细胞的作用。同时淫羊霍苷能有效的促进KGN细胞分泌E2-β这个关键性细胞因子。

潘雪^[4]（2020）在《多囊卵巢综合征与心理应激相关性及补肾解郁调冲法干预的实验研究》文中提出目的1系统查阅、整理国内外多囊卵巢综合征（PCOS）相关文献,并通过对PCOS与心理应激相关性的分析阐释,为临床诊治PCOS提供参考依据及新思路。2通过横断面研究分析PCOS的中医证候分布特点;以慢性心理应激为切入点,对各中医证型与生活质量、心理状态及人格特征进行相关性分析,探讨PCOS中医各证型与慢性心理应激的关系,明确“肾虚肝郁”在PCOS中的重要病机作用,为中医辨证治疗提供理论基础。3应用来曲唑联合慢性温和不可预知应激（CUMS）法建立动物模型证实慢性心理应激对PCOS的重要影响;以此模型为研究对象,结合生殖与心理应激方面指标,探讨补肾解郁调冲方对模型大鼠的治疗作用及疗效机制;以内质网应激（ERS）诱导的卵巢颗粒细胞凋亡通路PERK-ATF4-CHOP为研究新靶点,探讨补肾解郁调冲方对PCOS合并慢性应激大鼠的疗效机制。方法1临床研究对309例PCOS患者的临床信息进行采集及整理;采用健康调查简表（SF-36）、焦虑/抑郁自评量表（SAS/SDS）、艾森克人格问卷简式量表中国版（EPQ-RSC）对患者的生活质量、焦虑及抑郁情绪变化、人格特征进行调查;分析PCOS患者的中医证候特点及不同证型PCOS患者在生活质量、心理健康、人格特征方面的差异性;应用Logistic回归分析,探究肾虚肝郁型PCOS与发病相关因素、焦虑抑郁情况及人格特征的依存关系。2实验研究以CUMS方法模拟慢性心理应激,以来曲唑构建PCOS大鼠模型。将大鼠随机分为空白组、慢性应激组（CUMS）、PCOS组、PCOS合并慢性应激组（PCOS+CUMS）。以行为学、卵巢组织病理学、血清性激素、海马组织神经递质等为指标进行模型对比及评价。应用PCOS+CUMS动物模型进行疗效机制研究。除正常组外,将成模大鼠随机分为模型组、达英-35组、单纯补肾（即补肾）组、补肾解郁调冲（即补肾解郁）低、中、高剂量组。进行行为学检测,测定各组大鼠卵巢体积、卵巢质量;以HE染色观察卵巢组织病理形态;ELISA法测定血清LH、FSH、FT水平;HPLC-ECD测定海马组织中NE、5-HT 及 5-HIAA 水平。选取补肾解郁低、中、高剂量组中疗效较佳的组别与其余各组进行疗效机制研究,以Tunel法检测卵巢颗粒细胞凋亡情况;免疫组化法检测GRP78、CHOP蛋白在卵巢组织中的表达及定位;Western Blot法检测卵巢组织中CHOP、GRP78、PERK、ATF4蛋白的表达水平。结果1临床研究（1）本研究有效病例为309例,27-33岁年龄段患者所占比例最高（55.34%）,文化程度以大专及以上为主（91.26%）,脑力劳动者居多（75.4%）;肥胖患者占比为36.89%,67.96%的患者无运动习惯,月经紊乱者占比为95.47%,有不孕病史者占29.13%,其中原发性不孕者占不孕症患者的64.44%,继发性不孕者为35.56%;（2）309例PCOS患者中,肾虚肝郁证占比最高（37.22%）,其次为痰瘀互结证（23.30%）、脾虚痰湿证（20.39%）、肾虚血瘀证（19.09%）;（3）不同证型间文化程度、工作性质、BMI存在差异（p<0.05）;大专及以上者在肾虚肝郁证中占比最高（95.65%）;脑力劳动者在肾虚肝郁证、脾虚痰湿证中占比较高,分别为80.95%、80.87%;脾虚痰湿证、痰瘀互结证PCOS患者BMI高于肾虚肝郁证、肾虚血瘀证（p<0.05）;（4）在SF-36方面,总体健康（GH）、情感职能（RE）、精神健康（MH）、活力（VT）维度得分较低;存在焦虑状态者占PCOS患者总人数的28.8%,抑郁状态者占40.13%;（5）不同中医证型在VT及MH方面存在统计学差异（p<0.05）;肾虚肝郁证VT维度及MH维度得分低于脾虚痰湿证（p<0.05）;肾虚肝郁型PCOS患者SF-36心理健康总分低于其余3个证型,SAS及SDS评分高于其余3个证型（p<0.05）;（6）各中医证型间EPQ-RSC中E、N、P维度得分差异具有统计学意义（p<0.05）。脾虚痰湿证的E维度得分最高,肾虚肝郁证最低;肾虚肝郁证的N、P维度得分最高,脾虚痰湿证最低;（7）进一步对中医证型占比最高之肾虚肝郁证进行Logistic回归分析,年龄、文化程度、工作性质、BMI、抑郁情况、神经质N与肾虚肝郁证有关（p<0.05）。年龄偏小（以34-40岁为参照）、体重偏低（以超重、肥胖为参照）、抑郁状态与肾虚肝郁证呈正相关;高中及中专学历（以大专及以上为参照）、工作以体力劳动为主（以无业参照）、情绪稳定或人格为神经质中间型（以情绪不稳定者为参照）与肾虚肝郁证呈负相关。2实验一PCOS组、PCOS+CUMS组大鼠体质量、血清FT水平、LH/FSH比值高于空白组（p<0.05）;PCOS+CUMS组较PCOS组卵巢组织多囊样改变更加明显;CUMS组、-PCOS+CUMS组大鼠水平运动得分、垂直运动得分、蔗糖偏嗜度及海马组织中NE、5-HT含量低于空白组（p<0.05）,5-HIAA含量、5-HIAA/5-HT比值高于空白组（p<0.05）;3实验二（1）体质量、卵巢体积及卵巢质量:模型组大鼠体质量、左侧卵巢体积及卵巢质量较正常组明显增加（p<0.05）;与模型组比较,达英-35组、补肾组及补肾解郁中剂量组大鼠体质量明显降低（p<0.05）,补肾解郁中剂量组大鼠左侧卵巢体积及卵巢质量明显减小（p<0.05）;（2）卵巢组织病理学:模型组可见多个囊状扩张卵泡,颗粒细胞排列松散,层数减少;补肾解郁中、高剂量组可见正常形态的卵泡及黄体,囊性扩张卵泡少见,颗粒细胞排列整齐,层数较模型组增多;（3）性激素:模型组大鼠LH、FT水平及LH/FSH比值较正常组升高（p<0.05）;与模型组比较,达英-35组及补肾解郁中剂量组大鼠FT水平明显降低（p<0.05）,达英-35组及补肾解郁中、高剂量组大鼠LH水平、LH/FSH比值明显降低（p<0.05）;补肾组在LH水平方面较模型组降低（p<0.05）;4实验三（1）行为学:模型组大鼠水平、垂直运动得分及蔗糖偏嗜度低于正常组（p<0.05）;与模型组比较,补肾组及补肾解郁中剂量组大鼠水平运动得分明显升高（p<0.05）;各治疗组大鼠垂直运动得分、蔗糖偏嗜度虽与模型组无显着差异（p>0.05）,但补肾解郁中剂量组、补肾组大鼠垂直运动得分较治疗前呈升高趋势;补肾解郁中剂量组蔗糖偏嗜度升高幅度最大;（2）神经递质:模型组大鼠NE、5-HT含量较正常组降低,5-HIAA含量升高（p<0.05）,而5-HIAA/5-HT比值呈升高趋势,但无统计学意义（p>0.05）;与模型组比较,补肾组及补肾解郁各剂量组NE含量明显升高（p<0.05）,各治疗组大鼠5-HT、5-HIAA含量及5-HIAA/5-HT比值与模型组无显着差异（p>0.05）,补肾解郁中剂量组5-HT含量最高,补肾解郁高剂量组5-HIAA含量最低;5实验四（1）颗粒细胞凋亡情况:与正常组比较,模型组较正常组卵巢颗粒凋亡指数明显增高（p<0.05）;与模型组相比,达英-35组及补肾解郁中剂量组大鼠卵泡凋亡指数明显降低（p<0.05）;（2）GRP78、CHOP、PERK、ATF4蛋白表达:模型组大鼠卵巢组织中GRP78、CHOP蛋白主要表达于颗粒细胞层中;与正常组比较,模型组GRP78、CHOP、ATF4蛋白表达明显上调（p<0.05）,模型组PERK蛋白表达水平升高,但差异无统计学意义（p>0.05）;与模型组相比,达英-35组、补肾组及补肾解郁中剂量组GRP78、ATF4蛋白表达明显降低（p<0.05）,补肾解郁中剂量组CHOP蛋白表达水平明显降低（p<0.05）,各治疗组PERK蛋白表达水平下降,但差异无统计学意义（p>0.05）。结论1通过文献综述,PCOS是一种生殖功能障碍与代谢异常并存的内分泌紊乱性疾病,心理应激在PCOS的发生发展中具有重要作用。中医药在治疗PCOS方面积累了丰富的经验,应结合心理应激因素进一步研究中医药治疗PCOS的作用机制及优势。2临床研究证实,肾虚肝郁证是PCOS常见的中医证型;肾虚肝郁型PCOS患者存在更大的精神压力及心理负担,且易具有内向,情绪不稳定,焦虑紧张等人格倾向,“肾虚肝郁”与PCOS患者的慢性心理应激状态具有密切关联;年龄偏小、体重偏低、存在抑郁状态、情绪不稳定者辨证为肾虚肝郁证的可能性更大,临证治疗中应重视患者的精神心理状态。3来曲唑联合CUMS诱导的PCOS合并慢性应激状态动物模型较传统PCOS模型大鼠卵巢病理改变、内分泌及行为学变化、神经递质方面更贴近临床,可作为研究PCOS合并心理应激的病理及药效学机制的可靠动物模型,并进一步证实了慢性心理应激与PCOS相互影响。4补肾解郁调冲方可促进模型大鼠体内生殖内分泌环境恢复平衡,促进卵泡发育及排卵,改善行为学表现;该方的疗效作用机制可能与调节模型大鼠脑内单胺类神经递质,抑制PERK-ATF4-CHOP信号通路,下调GRP78表达,进而延缓ERS介导的卵巢颗粒细胞凋亡有关。

栗九志^[5]（2020）在《血清雌二醇光激化学发光分析检测体系的建立和性能评价》文中进行了进一步梳理目的:血清雌二醇的准确定量对女性的生理、病理情况都具有很高的指导意义。本研究以光激化学发光分析的原理为基础,希望建立一种竞争模式的均相免疫分析检测体系,用来定量检测血清中的雌二醇浓度,并对此检测体系进行分析性能评价和临床价值评估。方法:1.血清雌二醇光激化学发光分析方法的初步建立:基于光激化学发光的平台,以单克隆抗人雌二醇抗体包被受体微球,以生物素标记雌二醇或雌三醇,与待测临床样本一起加入到微孔板中孵育,接下来加入链霉亲和素包被的供体微球,以上组成了本研究的检测环境。本研究中首先选出了最佳的反应模式,然后筛选出更适于本实验的竞争性抗原,最后使用棋盘滴定的方法来确定受体微球和生物素化抗原的最适浓度,从而初步建立血清雌二醇光激化学发光分析方法。2.血清雌二醇光激化学发光分析方法的性能评价:在条件优化的基础之上,我们得出拟合方程的校准曲线,评估本检测体系的分析性能,主要包括灵敏度、精密度、准确度、特异性等。并选取了133例临床样本,与IMMULITE 2000分析仪和VIDAS分析仪做相关性分析,从而验证该检测体系的准确度。本研究中使用Graph Pad Prism 7软件绘制剂量-反应曲线及进行相关统计学分析。结果:1.血清雌二醇光激化学发光分析方法的初步建立:将反应模式、竞争性抗原的种类以及受体微球和生物素标记抗原的最佳稀释度进行优化。最终确定最佳反应模式为一步法、最适竞争性抗原为生物素标记的雌三醇抗原、单克隆抗人雌二醇抗体包被受体微球和生物素标记雌三醇抗原的最佳稀释度分别为1:200和1:18×104,以上为本检测体系的最佳工作条件。2.血清雌二醇光激化学发光分析方法的性能评价:分析灵敏度和功能灵敏度分别达到了7.16 pg/m L和13.7 pg/m L;批内和批间变异系数均低于15%;回收率介于97.5%至106.8%之间,满足了临床检测的要求;在干扰实验中,胆红素的干扰率为5.4%（高值）、-3.6%（中值）和4.9%（低值）,血红蛋白的干扰率为-2.4%（高值）、3.1%（中值）和-5.1%（低值）,甘油三酯的干扰率为3.7%（高值）、-2.1%（中值）和4.4%（低值）,说明该检测体系有着较强抗黄疸、溶血和脂血干扰的能力;此外,雌二醇与其结构类似物和某些常见生殖激素之间的交叉反应率从1.9%到10.6%不等,说明该检测体系对血清中雌二醇的检测具有高度的特异性。此外,我们的结果表明,该检测体系与IMMULITE 2000系统（y=0.6695x+47.92,r2=0.843）和VIDAS系统（y=1.099x-821.5,r2=0.9392）对雌二醇的检测具有高度的一致性。结论:本研究基于光激化学发光分析的原理,成功初步建立了竞争模式定量检测血清雌二醇的新方法。该检测体系是一种均相的测定方法,检测性能优良,具有灵敏度高、特异性强、重复性好、抗干扰能力强等特点,并且临床样本的用量少,有益于患者就医,可用于临床定量检测血清中雌二醇的浓度,并且与一些传统方法和临床常见的方法相比,该检测体系步骤简洁,无需分离和洗涤步骤,这大大缩短了反应时间,且成本较低,易于自动化。在雌二醇检测中具有很好的应用前景,有助于雌二醇诊断试剂盒的研制。

付子洁^[6]（2019）在《早发性卵巢功能不全骨转换标志物与骨密度的相关性研究》文中研究表明目的:比较早发性卵巢功能不全患者（Premature ovarian insufficiency,POI）骨量正常组、骨量低下组、骨质疏松组性激素、血脂、骨转换标志物及骨密度水平,并进一步分析骨转换标志物Ⅰ型前胶原N端前肽（P1NP）、Ⅰ型胶原交联羧基端肽区（β-CTX）及血清总碱性磷酸酶（ALP）与骨密度（BMD）的关系,探讨骨转换标志物对POI患者骨量丢失及骨折风险的预测价值。方法:1.选取2017年12月至2018年12月期间就诊于河北医科大学第二医院妇科内分泌门诊并诊断为POI的60名患者作为研究对象。采用双能X线骨密度吸收检测法对患者进行不同部位（腰椎、左侧髋部及股骨颈部）的BMD测定,并根据BMD测定结果分为骨量正常组（T≥-1.0或Z>-2.0）、骨量低下组（-2.5<T<-1.0或Z≤-2.0）及骨质疏松组（T≤-2.5）;测定性激素:促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）、抗缪勒氏管激素（AMH）;血脂:总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）;骨转换标志物:P1NP、β-CTX及ALP水平。比较不同组间上述血清学指标水平;用电化学发光法测定血清P1NP、β-CTX及ALP含量,分析其与不同部位BMD的相关性。2.将患者的临床资料及各指标测量值记录于Excel表格中,采用SPSS21.0统计软件来进行统计学专业处理。结果:1.一般资料描述及临床特征分析骨量正常组、骨量低下组及骨质疏松组三组之间年龄、体重指数及月经改变类型无统计学差异（P>0.05）。染色体核型异常者为6人,占比10%;医源性POI 9人,占比15%;免疫及内分泌因素闭经者9人,占比15%;病因不明者为36人,占比60%。2.不同组间血清学指标血清FSH中位值为87.93（63.79,121.37）mIU/mL,E2中位值为17.00（9.00,30.75）pg/ml,AMH中位值为0.06（0.05,0.10）ng/ml。TC中位值为4.60（4.09,5.14）mmol/L,TG中位值为1.045（0.81,1.29）mmol/L,HDL-C中位值为1.41（1.26,1.64）mmol/L,LDL-C中位值为2.97（2.55,3.32）mmol/L。P1NP中位值为74.60（46.76,133.37）ng/ml,ALP中位值为86.0（64.25,120.00）U/L。三组间以上血清学指标水平无统计学差异（P>0.05）。β-CTX中位值为0.38（0.31,0.59）ng/ml,三组间比较差异有统计学意义（P=0.044）。3.骨转换标志物与骨密度的相关性将P1NP、β-CTX及ALP分别取第25、50及75百分位数为节点分为四组进行不同部位BMD（g/cm2）的比较。P1NP不同组间的腰椎BMD、左侧髋部BMD及股骨颈部BMD差异比较均有统计学意义,且P1NP与各部位BMD呈显着负相关（P<0.01）;β-CTX不同组间仅左侧髋部BMD差异比较有统计学意义,两者之间呈负相关（P<0.05）;ALP不同组间腰椎及左侧髋部BMD比较差异有统计学意义,且呈显着负相关（P<0.01）。结论:1.本研究显示POI患者多数病因不明,合并染色体核型异常、化疗史及免疫内分泌疾病者相对常见。2.POI女性骨量正常者、骨量减低者及骨质疏松者性激素及血脂水平无统计学差异。3.P1NP与腰椎、左侧髋部及股骨颈部BMD显着负相关,ALP与腰椎及左侧髋部BMD显着负相关,β-CTX与左侧髋部BMD负相关。4.在POI患者中,骨转换标志物可能预测骨量丢失及骨折风险。

张卉,沈海萍,孟楠^[7]（2017）在《自拟逍遥通经胶囊治疗青春期继发性闭经临床观察》文中指出目的观察自拟逍遥通经胶囊治疗青春期继发性闭经的疗效及安全性。方法选择医院2009年1月-2014年3月收治的青春期继发性闭经患者145例,根据治疗方法不同将患者分为观察组100例和对照组45例,分别给予自拟逍遥通经胶囊和常规西药治疗,观察2组患者治疗前后症状积分、性激素水平,比较2组患者的治疗效果及不良反应发生情况。结果观察组总有效率为94.0%高于对照组的80.0%,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前2组中医症候积分比较差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后2组中医症候积分均显着下降（P<0.05）,且观察组低于对照组（P<0.05）。治疗前2组激素水平比较差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后2组激素水平均显着提高（P<0.05）,但2组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论自拟逍遥通经胶囊治疗青春期继发性闭经疗效显着,安全性好,值得临床推广应用。

李永生,陈家强,谢筱颖^[8]（2016）在《化学发光法检测促卵泡激素 黄体生成素催乳素在萎缩性尿道炎患者中的价值》文中提出目的探讨在萎缩性尿道炎患者中采用化学发光法对促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）、催乳素（PRL）进行检测的应用价值。方法选取我院妇科2015年1月至2016年1月收治的45例闭经患者作为本次研究的观察组,再选取于我院同期进行健康体检且月经正常的45名女性作为对照组。2组均采用化学发光法检测其FSH、LH、PRL、孕酮、睾酮、雌二醇值,并进行比较。结果观察组的FSH、LH、PRL值均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;2组孕酮、睾酮值差异无统计学意义（P>0.05）;观察组的雌二醇水平明显较对照组低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论采用化学发光法检测FSH、LH、PRL值可明确反映出女性的萎缩性尿道炎情况。

张志君,刘惠^[9]（2016）在《女性闭经患者血清FSH、LH、PRL水平测定分析》文中认为目的:通过检测闭经女性患者血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、催乳素（PRL）的水平,探讨其在闭经女性患者中的意义。方法:选取本院妇科门诊就诊的52例闭经患者为观察组,选取本院健康体检中心月经正常的52例女性为对照组。选取对象的时间均来自2012年4月至2015年4月在本院进行性激素检查的女性。采用化学发光免疫法分别检查两组女性血清中FSH、LH、PRL、雌二醇（E2）、孕酮（P）的水平,以进行对照研究。结果:观察组患者血清中FSH、LH、PRL的值分别为（14.68±13.26）m U/mL、（12.321±10.14）m U/mL、（38.85±33.14）ng/mL明显高于对照组血清中的水平,具有明显的统计学（P<0.01）,观察组E2的水平为（40.98±15.48）pg/mL明显低于对照组（51.54±8.87）pg/mL（P<0.05）,对照组和观察组孕酮（P）的值分别为（8.55±0.30）ng/mL和（0.56±0.26）ng/mL有明显差异,具有统计学意义（P<0.05）。闭经时间>6个月患者血清中PRL（18.67±6.87）mu/mL、FSH（19.23±5.14）mu/mL、LH（45.85±3.124）ng/mL的水平明显高于闭经时间<6个月激素水平（P<0.049）。但闭经时间>6个月患者血清中P（8.37±12.26）ng/mL、E2（0.42±0.53）ng/mL水平则低于闭经时间<6个月的患者血清内其激素的水平（P<0.044）。结论:通过对闭经女性患者性激素水平的检测,可以根据血清中性激素水平的高低进行病因诊断和基本的对症治疗。

陶利青,赵海军,喇建英,谢继平,闫丽娅,冯涛^[10]（2015）在《10558例产妇产后激素水平的调查分析》文中研究表明目的监测产妇血清卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、促黄体生成激素（luteinizing hormone,LH）、雌二醇（estradiol,E2）、泌乳素（prolactin,PRL）水平,评估产妇可能发生闭经的风险。方法将产后复查的产妇10 558例进行分组,按生产时出血量分为出血≥400mL组与出血<400mL组,按生产时产程长短分为产程≥36h组与产程<36h组,按生产时使用催产素用量分为用量≥20U组与用量<20U组。各组均空腹抽静脉血3mL,采用化学发光法测定其血清FSH、LH、E2、PRL水平,记录并进行统计学分析。结果生产时出血≥400mL对FSH、LH、E2有影响,与出血<400mL组比较差异有统计学意义（P<0.05）;产程≥36h对FSH有影响,与产程<36h组比较差异有统计学意义（P<0.05）;产妇生产过程中催产素用量≥20U对FSH有影响,与用量<20 U组比较差异有统计学意义（P<0.05）;生产过程中出血量、产程长短、催产素用量对PRL无明显影响（P>0.05）。结论生产过程中出血≥400mL可能导致继发性闭经,产程≥36h有造成继发性闭经的风险。

二、化学发光法检测性激素水平诊断继发性闭经（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、化学发光法检测性激素水平诊断继发性闭经（论文提纲范文）

（2）补肾活血汤改善早发性卵巢功能不全的临床研究和调节模型小鼠Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制研究（论文提纲范文）

（3）麒麟丸对卵巢功能减退模型小鼠的药效作用及其主要成分淫羊霍苷的作用机制研究（论文提纲范文）

（4）多囊卵巢综合征与心理应激相关性及补肾解郁调冲法干预的实验研究（论文提纲范文）

（5）血清雌二醇光激化学发光分析检测体系的建立和性能评价（论文提纲范文）

（6）早发性卵巢功能不全骨转换标志物与骨密度的相关性研究（论文提纲范文）

（7）自拟逍遥通经胶囊治疗青春期继发性闭经临床观察（论文提纲范文）

（8）化学发光法检测促卵泡激素 黄体生成素催乳素在萎缩性尿道炎患者中的价值（论文提纲范文）

（9）女性闭经患者血清FSH、LH、PRL水平测定分析（论文提纲范文）

（10）10558例产妇产后激素水平的调查分析（论文提纲范文）

四、化学发光法检测性激素水平诊断继发性闭经（论文参考文献）

• [1]血清性激素检验在女性闭经后萎缩性尿道炎诊断中的应用价值[J]. 田丰丰,刘安娜,刘芳. 国际医药卫生导报, 2021(07)
• [2]补肾活血汤改善早发性卵巢功能不全的临床研究和调节模型小鼠Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制研究[D]. 陈思. 南京中医药大学, 2021(01)
• [3]麒麟丸对卵巢功能减退模型小鼠的药效作用及其主要成分淫羊霍苷的作用机制研究[D]. 陈春林. 广州中医药大学, 2020(09)
• [4]多囊卵巢综合征与心理应激相关性及补肾解郁调冲法干预的实验研究[D]. 潘雪. 北京中医药大学, 2020(04)
• [5]血清雌二醇光激化学发光分析检测体系的建立和性能评价[D]. 栗九志. 天津医科大学, 2020(06)
• [6]早发性卵巢功能不全骨转换标志物与骨密度的相关性研究[D]. 付子洁. 河北医科大学, 2019(01)
• [7]自拟逍遥通经胶囊治疗青春期继发性闭经临床观察[J]. 张卉,沈海萍,孟楠. 临床合理用药杂志, 2017(16)
• [8]化学发光法检测促卵泡激素 黄体生成素催乳素在萎缩性尿道炎患者中的价值[J]. 李永生,陈家强,谢筱颖. 实用医技杂志, 2016(11)
• [9]女性闭经患者血清FSH、LH、PRL水平测定分析[J]. 张志君,刘惠. 中国性科学, 2016(09)
• [10]10558例产妇产后激素水平的调查分析[J]. 陶利青,赵海军,喇建英,谢继平,闫丽娅,冯涛. 河北医科大学学报, 2015(08)

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