一、鸡球虫病综合防治的研究进展（论文文献综述）
陈文静[1]（2020）在《鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白3特异亲和肽抑制虫体入侵宿主细胞研究》文中认为鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白3（E.tenella microneme protein 3,Et MIC3）是E.tenella的微线体在球虫入侵宿主细胞早期阶段中分泌于子孢子表面的重要蛋白质,且能够与鸡盲肠上皮细胞表面的特定受体分子结合从而介导整个入侵过程。由E.tenella引起的球虫病对养禽业的危害非常大。由于当前主要的治疗（抗球虫药）和预防（球虫活苗）球虫疾病的方法存在易产生耐药性以及花费成本高等缺点,因此有研究基于其入侵机制进行抗球虫疾病的研究,并发现Et MIC3可作为候选疫苗有效降低球虫的入侵程度。Et MIC3由七个串联重复结构域组成（A、B、C1、C2、C3、C4、D）,包括两端三个不完全重复结构域和中间四个完全重复结构域（C1、C2、C3、C4段）,在对各个区域进行保守性及抗原性分析之后,本研究主要探讨了B段和C1段（Et MIC3-BC1）两个片段在虫体入侵宿主细胞过程中所起到的作用。噬菌体展示技术是一种新的技术,可以用来鉴别抗原表位及研究抗原和抗体的结构,并且能够筛选出抗原和抗体的模拟肽,在寄生虫病研究及防治中具有重要作用。本实验通过采用噬菌体展示技术获得了能与Et MIC3-BC1蛋白特异结合的亲和肽,并研究了目的亲和肽在体内、外抑制虫体入侵宿主细胞的作用。1、原核表达Et MIC3-BC1蛋白并制备相应多克隆抗体。本实验首先进行了重组表达质粒的构建（p ET-30a-Et MIC3-BC1）,并通过异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导剂的诱导将目的蛋白表达于E.coli（BL21）中。该重组蛋白在经SDS-PAGE验证之后,大量纯化回收,并且进行蛋白质复性。以复性之后的蛋白作为免疫原对新西兰大白兔进行免疫,从而制备多克隆抗体,通过Western blot（WB）和ELISA方法对抗体进行检测。琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE的实验结果显示了在本实验中p ET-30a-Et MIC3-BC1重组表达质粒被成功构建以及重组蛋白的成功表达;WB和ELISA结果说明了以Et MIC3-BC1蛋白作为抗原能够制备生物学活性（BA）良好的多克隆抗体。2、Et MIC3-BC1重组蛋白亲和肽的筛选。按照试剂盒说明,通过噬菌体展示技术,以纯化并且复性之后的重组Et MIC3-BC1蛋白为靶分子于噬菌体十二肽库中进行四轮生物筛选,并在第四轮生物筛选结束后随机地选择三十个状态良好的噬菌斑进行噬菌体扩增、提DNA、测序并推导出其氨基酸序列。结果显示,30个独立的噬菌斑共得到8种亲和力较高的十二肽序列,合成了其中出现频率及亲和力较高的A肽（AGRLLTPTMSLV）、D肽（DYHDPSLPTLGK）、W肽（WKDVHKAWLLEP）进行进一步研究。并且通过ELISA、间接ELISA和竞争ELISA法表明这三种多肽对应的噬菌体能够与Et MIC3-BC1和子孢子蛋白发生特异性结合以及抗Et MIC3-BC1多抗可以抑制噬菌体与重组蛋白之间的结合。3、测定A肽、D肽、W肽体外抵抗E.tenella子孢子入侵MDBK细胞的水平。采用MTT法测得这三种亲和肽作用于MDBK细胞的最大无毒浓度是125μg/ml。通过Percoll密度梯度离心法进行E.tenella子孢子的纯化,并且采用CFDA-SE荧光探针对子孢子进行标记。通过流式细胞仪检测当三种多肽浓度分别为25μg/m L,50μg/m L,75μg/m L,100μg/m L,125μg/m L时抑制子孢子（30万/孔）入侵MDBK细胞（1万/孔）的效率。结果显示这三种多肽都能够抑制子孢子的入侵,并且A肽、D肽的抑制效果都极显着高于W肽（P<0.01）,A肽的抑制效果极显着高于D肽（P<0.01）。4、检测A肽、D肽、W肽相应噬菌体在机体内的抗球虫作用。75只21日龄蛋鸡随机分成五组（15只/组）:PBS组、A组、D组、W组、E.tenella感染对照组。21日龄时,PBS组的鸡口服无菌PBS,A组、D组、W组、E.tenella感染对照组的鸡口服E.tenella孢子化卵囊（1万/只）。于攻虫后的第0-2天,给PBS组与E.tenella感染对照组口服无菌PBS,A组每天口服1×1012pfu A肽所对应的阳性噬菌体、D组每天口服1×1012pfu D肽所对应的阳性噬菌体、W组每天口服1×1012pfu W肽所对应的阳性噬菌体。感染后第七天取各组粪便,观察克粪便卵囊排出减少率。于感染后的第八天对各组鸡进行剖杀,测定各组鸡的体重变化、盲肠病变评分、大体病理学和组织病理学变化、OPG和ACI等指标。结果表明,A组、D组、W组都能够抵抗一定程度的球虫感染,其中A组和D组的各项指标与攻虫对照组相比差异极显着（P<0.01）且A组优于D组,W组与E.tenella感染对照组相比较差异显着（P<0.05）。各组的抗球虫指数分别为:200（PBS组）、168.74（A组）、161.27（D组）、137.36（W组）、118.21（E.tenella感染对照组）。5、Atodock分子对接软件评估Et MIC3-BC1蛋白和三种多肽的结合方式。通过Swiss-model对Et MIC3-BC1蛋白建立三维模型,用Atodock分析A肽、D肽、W肽分别和Et MIC3-BC1蛋白在空间上的结合情况。结果显示A肽、D肽、W肽与Et MIC3-BC1蛋白之间均存在疏水作用力和氢键,且A肽的结合作用最佳,D肽次之,W肽较弱,表明三种多肽在空间上均能够与Et MIC3-BC1蛋白结合。综上,本实验用Et MIC3-BC1蛋白所筛选出的亲和配体（A肽、D肽、W肽）体内、外能够有效的抑制E.tenella子孢子对宿主细胞的入侵,具备一定的抵抗球虫感染保护作用。本研究丰富了研制基于Et MIC3的鸡球虫病相关多肽疫苗的依据。
田永平[2]（2020）在《鸡球虫病的综合防治》文中研究指明近年来,随着国家扶贫力度不断加大,农户养禽业遍地开花,呈现飞速发展的态势。在推动畜牧也不断发展城乡人民生活水平提升的同时,禽类传染病也随之爆发,特别是鸡的球虫病给养殖户带来严重经济损失。笔者主要结合生产工作经验,分析了鸡球虫病的病源,流行病学,致病作用,临床症状及科学防治,以期为广大养鸡户提供相应帮助。
黄金华[3]（2019）在《抗球虫中药的筛选及姜黄素复方制剂的研究》文中研究指明鸡球虫病是一种常见的寄生性原虫病,该病给世界养禽业带来了巨大的经济损失。鸡的艾美耳球虫公认的有七种,其中柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）是临床发病最多、危害最大的鸡球虫之一。鸡球虫病的防治仍主要依靠化学药物,但随着化学药物的广泛使用,耐药虫株不断产生、动物源食品中兽药残留等问题越来越多,临床球虫病的防治日益困难。中兽药多来自天然植物,绿色安全,组分多样,不易产生耐药性,是鸡球虫病防治研究新方向。本论文筛选出了对鸡柔嫩艾美尔球虫有显着抑制作用的单味药材,组成高效的复方制剂,并对复方制剂的抗球虫效果进行了全面评估。首先开展了20种单味中药的体外球虫卵囊抑制试验,结果显示姜黄素及仙鹤草、青蒿、常山、苦参这四种中药提取液对鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊孢子化呈明显抑制作用,在球虫卵囊体外孵育6 d后其卵囊孢子化率仅34.32%～47.76%。开展了五种对球虫卵囊有较好抑制作用的药材组合筛选,以姜黄素和仙鹤草为固定组方,建立了三种不同的复方,并开展了三个复方对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊抑制试验,结果显示添加三种复方药液的球虫卵囊体外孢子化率分别为29.15%、42.74%、44.56%,而地克珠利对照组的球虫卵囊孢子化率为27.69%,筛选出方剂一为最佳组方。选取40只健康小鼠,均分为五组,分别以50、40、30、20、10 m L/kg体重的剂量灌胃方剂一药液,每天一次,连续两天,测定方剂一药液的半数致死量（LD50）。结果显示方剂一药液对小鼠的半数致死量大于50 m L/kg体重。在安全性试验中,40只健康小鼠以30 m L/kg的剂量连续7天,每天灌胃两次方剂一药液观察小鼠的临床与解剖特征。结果显示实验小鼠未出现毒性反应,剖检各脏器也无异常病变,说明筛选的方剂一药液安全性较高。开展了以姜黄素为主的中药复方制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫的攻虫防治试验。120只14日龄的鸡,分为六组,四组为试验组,分别在口服柔嫩艾美耳球虫后一天,饲料中给予10、15、20 g/kg剂量的中药方剂一和0.2 g/kg剂量的0.5%地克珠利预混剂,评价抗球虫效果,另外两组分别为空白对照组和阳性对照组。结果显示中药方剂一不同的添加量均有一定的抗球虫效果,其中以20 g/kg剂量添加时,抗球虫效果最佳,其抗球虫指数为163.71,而对照化药地克珠利组的抗球虫指数为173.15。表明筛选的中药复方具有良好的抗球虫效果。最后本研究对筛选的以姜黄素为主的中药复方制剂进行了预防鸡球虫病的田间扩大试验。将600只1日龄矮脚黄鸡随机均分成三组,分别为方剂一给药组,给药剂量为20 g/kg饲料,连续添加至上市;同时设置化药对照组,每公斤饲料中添加1%的马杜霉素铵预混剂0.45 g,添加至上市前5天;另外一组为空白对照组。结果显示在饲料连续添加20 g/kg方剂一,能够促进矮脚黄鸡的生长,降低料重比,且抗球虫效果不亚于常规预防性抗球虫药马杜霉素。
廖申权,戚南山,吕敏娜,吴彩艳,李娟,蔡海明,林栩慧,胡俊菁,于林增,张健騑,谢明权,孙铭飞[4]（2020）在《鸡球虫病流行病学、防治药物与疫苗研究进展》文中提出家禽养殖业是畜牧业的基础性产业,我国家禽年出栏量达146亿羽,约占全球养殖量的22%,而鸡球虫病是一种严重危害养禽业健康发展的寄生性原虫病,每年给养鸡业造成巨大的经济损失。该病由一种或多种艾美耳球虫寄生于鸡肠道粘膜上皮细胞引起,可导致大量肠上皮细胞受损、出血甚至死亡。近70年来,国内外学者一直致力于鸡球虫病防治药物和疫苗的研制,传统的抗球虫药物有聚醚类离子载体抗生素和化学合成类药物,传统的鸡球虫病疫苗有强毒活卵囊疫苗和弱毒活卵囊疫苗。近年来,新药与新型疫苗研发技术平台不断发展,为新型抗球虫药物（天然产物药物）和新型疫苗（亚单位疫苗、DNA疫苗和活载体疫苗等）的研制提供新的手段和思路。结合鸡球虫病流行病学、防治药物等方面的研究概况,重点阐述抗球虫药物与鸡球虫病疫苗研发等方面的研究进展,以期为鸡球虫病的综合防控提供理论依据。
代幸如[5]（2020）在《癸氧喹酯纳米脂质体的制备及抗鸡球虫效果研究》文中研究表明鸡球虫病（Chicken coccidiosis）是由艾美耳球虫引起的以肠道病变为主的寄生虫病,多发生于雏鸡,由于鸡只发病后主要造成肠道损伤、采食量下降,导致生产性能降低,机体消瘦甚至死亡,给养禽业带来严重危害,同时,球虫耐药性的产生也给该病的防治带来新的挑战。癸氧喹酯（Decoquinate,DQ）是用于预防鸡球虫感染的喹啉类化学抗球虫药,具有高效、安全等优点,其抗球虫效果与药物颗粒大小有关,但DQ颗粒较大、不溶于水,造成使用不便、药物吸收利用度低等缺点,因此,将其做成水溶性纳米脂质体具有重要的临床意义。1癸氧喹酯纳米脂质体（DQNL）的制备首先,寻找合适的溶剂使DQ、蛋黄卵磷脂及胆固醇充分溶解,为此对比了多种溶剂,如乙醇、氯代正丁烷、乙酸乙酯、甲醇、三氯甲烷等,根据溶解度确定三氯甲烷:甲醇（1:1）作溶解剂。由于DQ具有极强的亲脂疏水特性,故选择薄膜分散-超声法制备DQNL初样,然后对DQNL的制备条件进行优化。试验过程中DQ的含量使用HPLC检测,通过8个浓度梯度DQ标准品相应的吸收峰值,建立标准曲线方程Y=132653x-60368,R2=0.9997,经验证其方法学符合相关要求。优化试验的单因素试验设置了脂药比、膜材比、水浴温度及超声时间四个考察因素,每因素5个梯度,以包封率和载药量为指标,筛选出对指标影响较大的因素。根据单因素试验结果使用Minitab设计成四因素三水平L9（34）正交优化试验,以包封率为评价指标,分析得出最优组合配比。正交试验结果分析表明DQNL的最佳制备条件为:蛋黄卵磷脂:药物（w/w）为10:1;蛋黄卵磷脂:胆固醇（w/w）比为5:1;旋转蒸发温度为50℃;超声持续时间为15 min。2 DQNL的表征在此基础上对DQNL的结构、粒径以及稳定性等进行表征。HPLC法检测最优条件下制备的DQNL平均包封率达98.94%,载药量达6.91%;透射电镜观察DQNL的微观形态,显示DQNL具有脂质体的特征结构;纳米粒度分析仪测定DQNL的平均粒径为115.6nm,多分散指数为0.175,Zeta电位为-39.1 mV,表明DQNL粒径达纳米级别,分布均匀且粒子间稳定;将DQNL置于4℃环境中,每隔7d取样进行粒度分析,经28d测试结果显示DQNL粒径仅增加了 1.9nm,Zeta电位的绝对值降低了 3.9mV,表明DQNL在4℃储存时具有较高的稳定性。3 DQNL抗柔嫩艾美耳球虫作用评价选取对地克珠利（Dic）耐药的柔嫩艾美耳球虫（E.tenella）临床分离株口服接种制备球虫病模型进行本试验:将84只12日龄雏鸡按体重分为空白对照组（Blank Control,Con）、球虫模型组（E.tenella-infected,EI）、DQ 原药组（EI+40mg/kg DQ,DQ40）、DQNL 组,分别为高（EI+20mg/LDQNL,DQNL20）、中（EI+10mg/LDQNL,DQNL10）、低（EI+5 mg/LDQNL,DQNL5）剂量组,Dic 对照组（EI+2μL/LDic,Dic2）,共 7组,每组12只,适应三天接种球虫卵囊,后饲养一周,期间密切观察鸡只的精神状态及粪便情况。第八天称重采样,通过粪便记分、相对增重率、病变值、卵囊值及抗球虫指数（ACI）等评价抗球虫效果。结果得出DQNL5组与DQ40组的ACI相当,表明DQNL显着提高了 DQ的疗效,且可饮水使用。随后进行了 DQNL体外抑制球虫孢子生殖试验:将9组不同剂量的DQNL分别加入到新鲜分离的未孢子化球虫卵囊中,在统一条件下进行孢子生殖,72h后计数并计算卵囊的孢子化率,结果表明5mg/L及其以上浓度均可显着降低卵囊的孢子化率,并呈现明显的剂量依赖性。4 DQNL冻干保护剂筛选为进一步方便DQNL的储存和使用,对DQNL的冷冻干燥工艺进行初步探讨,即冻干保护剂的筛选。相同浓度的DQNL中加入不同类型的冻干保护剂,如糖类、盐类、酸类、聚合物等,然后进行冷冻干燥,通过考察冻干粉的颜色外观,复溶时溶液再分散的快慢及粒径大小,验证各类冻干保护剂对DQNL的保护作用。结果表明糖类化合物在DQNL冻干时具有明显的保护作用,方便了 DQNL储存和后续研究。结论:采用薄膜分散-超声法制备的DQNL平均粒径为115.6nm,粒径较小,分布均匀,可与水互溶,其抗球虫功效比DQ原粉明显增强;4℃避光条件下存放28 d仍稳定,糖类冻干保护剂对DQNL有明显的冻干保护作用。
梁海华[6]（2019）在《鸡球虫病诊断及防治方法》文中研究表明鸡球虫病是鸡常见且危害十分严重的寄生虫病,对鸡类的生命具有重大威胁,给全世界范围内都造成过严重损失,特别是幼鸡患病后死亡几率非常大,治疗痊愈后也会对鸡的生长和产蛋有很大影响,因此,针对鸡球虫病进行研究对于提高养殖户经济效益有重要意义。该文基于鸡球虫病的临床特点和诊断方法进行分析,探寻鸡球虫病的综合防治方法。
李超,顾小龙,卢春霞,廖琴,刘贤勇,索勋[7]（2018）在《我国鸡球虫病流行病学研究进展》文中研究表明鸡球虫病在我国广泛流行,严重影响我国养鸡业健康发展。目前各地关于鸡球虫流行情况均有报道,但鲜见关于全国整体流行情况的报道分析。本文对建国后各地的调查报告进行了梳理,发现我国各地鸡群球虫感染率均在50%以上,常见的虫种有柔嫩、巨型、堆型、和缓和毒害艾美耳球虫等,影响我国鸡球虫病流行的因素有饲养管理方式、环境及气候、免疫抑制或其他疾病、鸡只日龄等。同时我们还发现文献中检测鸡球虫的手段还比较落后,仅采用镜检球虫卵囊的占60%以上,并且调查范围局限于一市的占80%以上。由此可见,我国鸡球虫病流行严重,影响因素较多,而且流行病学调查手段落后、范围小,我们应当采用综合防控措施,并提高检测手段,以期控制鸡球虫病流行,促进养鸡业健康发展。
宋尚莲[8]（2017）在《鸡球虫病的综合防治措施》文中提出鸡球虫病对于养鸡产业的发展危害相当严重。该病为一种相当重要的寄生虫病,会给养殖户造成巨大的经济损失。但凡是在养鸡的地方就有球虫存在,特别是集约化养殖场,如果处理不当很容易暴发鸡球虫病。在文中主要就鸡球虫病的症状和病因进行分析,并就综合防治措施进行介绍。
曹建文[9]（2017）在《益生菌调控柔嫩艾美耳球虫感染鸡效果研究》文中提出鸡的球虫病是由一种或几种球虫寄生于鸡肠道上皮细胞内,从而导致肠道组织病变及肠道菌群的破坏。鸡球虫病呈全球性分布,在当今养禽业普遍存在且在世界范围内影响较大,集约化养鸡业最为多发,往往造成巨大的经济损失且对养禽业生产发展产生重大的影响。据统计,全世界养禽业每年因鸡球虫病导致的经济损失可达3亿美元。柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）俗称盲肠球虫,是危害性最为严重的球虫。随着化学药物的不断使用,禽体内药物残留和球虫耐药性的问题已经成为社会目前关注的焦点。因此,寻求一种高效、安全低毒的抗球虫药物已然成为当前亟需解决的问题。本研究通过对盲肠微生物测序发现,以益生菌枯草芽孢杆菌、鼠李糖乳杆菌和酵母菌为添加物来探讨益生菌对E.tenella感染鸡的保护效果研究。主要通过下面几个实验进行研究:（1）E.tenella感染鸡盲肠微生物的测序建立E.tenella感染模型,分为对照组和感染组,在感染第14天后,分别采集感染组和对照组盲肠组织,提取盲肠内容物微生物基因组DNA,然后对其进行测序。实验结果显示:在Alpha多样性分析中,感染组与对照组相比,感染组ACE的值增加16.86,Chao1值增加18.4,Simpson值增加0.01;E.tenella感染后对微生物群落影响较大,改变了鸡盲肠内微生物不同菌群在门和属水平上的相对丰度;在Beta多样性分析中,对照组的样品间空间距离较近而感染组的样品间空间距离较远。（2）益生菌对E.tenella感染鸡保护作用建立E.tenella感染鸡试验模型,以临床症状、血便记分、存活率、增重率、和益生菌对E.tenella的保护效果研究。结果显示:益生菌的添加能减轻球虫感染鸡的血便计分,显着降低了球虫感染鸡的死亡率,提高球虫病感染鸡的增重率。益生菌抗球虫指数为137,为低效抗球虫试剂。表明益生菌可以与其它饲料添加剂联合应用于临床球虫病的防治。（3）益生菌对E.tenella感染鸡盲肠组织结构及免疫细胞的影响建立E.tenella感染鸡试验模型,在接种球虫第7天,称重后取鸡盲肠组织,用HE染色观察盲肠组织病理学变化,采用AB-PAS和PAS染色法,来观察E.tenella感染鸡盲肠杯状细胞糖原和粘液成分的变化。实验结果表明:对照组,盲肠黏膜层的糖原及粘液成份分布正常,排列有序。E.tenella感染后,造成盲肠黏膜层被破坏,大量的糖原及粘液丢失。结论:E.tenella感染鸡后改变了鸡盲肠内微生物不同菌群在门和属水平上的相对丰度;在E.tenella感染后添加益生菌能有效减轻鸡的粪便计分,提高球虫病感染鸡的增重率,提高了鸡的抗球虫指数和感染鸡的存活率;益生菌呈现出低效抗球虫的作用;同时,添加益生菌可减轻盲肠肠黏膜和肠腺组织的病理学结构的损伤,明显改善鸡的肠道粘膜免疫,进而发挥了抗球虫作用。
郑艳琼[10]（2015）在《岳阳地区鸡球虫病感染情况调查及抗球虫药物防治试验》文中进行了进一步梳理鸡球虫病使鸡的生产效率降低,对家禽业特别是规模化养禽业危害严重。鸡球虫卵囊的生长和繁殖需经过无性生殖和有性生殖两个阶段,鸡球虫病在我国普遍存在,并且给养鸡业带来较大的经济损失。有养鸡的地方都是鸡球虫病的流行区。岳阳地区白羽肉鸡和蛋鸡的养殖量逐年增加,鸡球虫病给白羽鸡的养殖造成了一定的损失,笔者在岳阳地区选择了岳阳县、岳阳楼区、泪罗市、平江县4个调查点,采用临床检查、病理解剖、粪便检查等方式调查岳阳地区白羽鸡球虫病的流行情况。结果显示：白羽肉鸡岳阳县、汨罗市、平江县三个调查点鸡球虫病的感染率为2.87%、2.88%、2.79%,蛋鸡岳阳楼区、泪罗市两个调查点鸡球虫病的感染率为12.0%、12.24%。白羽肉鸡15-42日龄、蛋鸡60-80日龄发病率较高,每年的第1季度和第4季度为本病的高发期。根据调查山字球虫粉、百球清、新球特、球新四种抗球虫药的治愈率分别为90%、90%、60%和60%,通过试验,经疫苗免疫后使用抗球虫药物治疗的治愈率为95%,未经疫苗免疫直接使用抗球虫药物治疗的治愈率为85%。笔者总结分析了,自2009年至今岳阳地区白羽鸡防控鸡球虫病的经历的无需防控、药物治疗和疫苗免疫结合药物治疗的三个阶段的防治效果,提出加强饲养管理、保证足够长的空栏期、加强季节性管理等综合防治鸡球虫病的基本思路。
二、鸡球虫病综合防治的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鸡球虫病综合防治的研究进展（论文提纲范文）
（1）鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白3特异亲和肽抑制虫体入侵宿主细胞研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 1.1 鸡球虫概述 |
| 1.1.1 鸡球虫的种类 |
| 1.1.2 鸡球虫的生活史 |
| 1.1.3 鸡球虫病的临床危害及入侵机制 |
| 1.2 鸡球虫抗原蛋白的研究进展 |
| 1.2.1 表面抗原 |
| 1.2.2 鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白的研究 |
| 1.3 噬菌体展示技术的研究进展 |
| 1.3.1 噬菌体展示技术的基本原理 |
| 1.3.2 噬菌体展示技术的应用 |
| 1.4 计算机分子模拟技术的原理和相关应用 |
| 1.4.1 同源建模 |
| 1.4.2 分子对接 |
| 1.5 研究的目的和意义 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物和虫种 |
| 2.1.2 菌种、载体与细胞株 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 标准参照物 |
| 2.1.5 主要实验试剂的配制方法 |
| 2.1.6 仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 p ET-30a-Et MIC3-BC1 重组质粒的构建 |
| 2.2.2 重组质粒p ET-30a-Et MIC3-BC1 在大肠杆菌表达系统中的诱导表达 |
| 2.2.3 Et MIC3-BC1 重组蛋白的纯化回收及复性 |
| 2.2.4 多克隆抗血清的制备及其鉴定 |
| 2.2.5 噬菌体随机十二肽库对Et MIC3-BC1 蛋白亲和配体的生物淘选 |
| 2.2.6 结合克隆的特征鉴定 |
| 2.2.7 亲和噬菌体氨基酸序列的推导及合成 |
| 2.2.8 ELISA检测亲和噬菌体与重组Et MIC3-BC1 蛋白及虫体Et MIC3 蛋白结合情况 |
| 2.2.9 体外检测合成多肽抑制E.tenella子孢子入侵细胞的能力 |
| 2.2.10 体内检测多肽对应阳性噬菌体抗球虫保护作用 |
| 2.2.11 利用同源模建和分子对接分析Et MIC3-BC1与A肽、D肽、W肽的结合 |
| 2.2.12 数据统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 重组质粒p ET30a-Et MIC3-BC1 的构建 |
| 3.1.1 Et MIC3-BC1 基因的PCR鉴定 |
| 3.1.2 重组质粒p ET30a-Et MIC3-BC1 PCR鉴定 |
| 3.1.3 Et MIC3-BC1 重组蛋白的原核表达与纯化 |
| 3.2 Et MIC3-BC1 多克隆抗血清的效价和特异性测定 |
| 3.3 Et MIC3-BC1 重组蛋白亲和配体的生物筛选 |
| 3.3.1 Et MIC3-BC1 重组蛋白对噬菌体十二肽库的四轮筛选和滴度测定 |
| 3.3.2 亲和噬菌体的ELISA鉴定 |
| 3.3.3 测定亲和噬菌体的序列 |
| 3.4 多肽亲和力的检测 |
| 3.4.1 ELISA法检测亲和噬菌体与Et MIC3-BC1 的结合情况 |
| 3.4.2 Et MIC3-BC1 多抗竞争抑制亲和噬菌体与Et MIC3-BC1 重组蛋白的结合 |
| 3.4.3 ELISA检测虫体Et MIC3 蛋白与亲和噬菌体的结合 |
| 3.5 所筛选多肽对E.tenella子孢子入侵的体外抑制作用 |
| 3.5.1 E.tenella子孢子的纯化及其荧光标记 |
| 3.5.2 多肽浓度的确定 |
| 3.5.3 Et MC3-BC1 多克隆抗体抑制E.tenella子孢子入侵MDBK细胞 |
| 3.5.4 多肽对E.tenella子孢子入侵MDBK细胞的抑制 |
| 3.6 A、D、W肽体内抑制E.tenella子孢子入侵分析 |
| 3.6.1 体重增重变化 |
| 3.6.2 球虫感染后盲肠病变计分 |
| 3.6.3 卵囊排出减少率 |
| 3.6.4 抗球虫指数(ACI) |
| 3.6.5 盲肠病理学变化 |
| 3.7 同源建模和分子对接展示 A、D、W 肽和 Et MIC3-BC1 的结合 |
| 3.7.1 同源建模 |
| 3.7.2 分子对接 |
| 4 讨论 |
| 4.1 Et MIC3-BC1 蛋白表达 |
| 4.2 抗 EtMIC3-BC1 多克隆抗体的制备及其活性检测 |
| 4.3 Et MIC3-BC1 亲和肽的筛选与鉴定 |
| 4.4 体外评价所选亲和肽抑制E.tenella子孢子入侵细胞的能力 |
| 4.5 体内评价亲和噬菌体抑制E.tenella子孢子入侵细胞的能力 |
| 4.6 利用同源建模以及分子对接分析 A、D、W 肽与 Et MIC3-BC1 的结合 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（2）鸡球虫病的综合防治（论文提纲范文）
| 1 病源 |
| 2 流行病学 |
| 3 致病作用 |
| 4 临床症状 |
| 5 诊断 |
| 6 治疗 |
| 7 预防 |
（3）抗球虫中药的筛选及姜黄素复方制剂的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 鸡球虫病概述 |
| 1.1.1 鸡球虫病的病原及分类 |
| 1.1.2 鸡球虫病的危害 |
| 1.1.3 鸡球虫病的病理变化 |
| 1.1.3.1 肾脏、肝脏和肠道的变化 |
| 1.1.3.2 法氏囊的变化 |
| 1.2 鸡球虫病的防治 |
| 1.2.1 鸡球虫病的化学药物防治 |
| 1.2.2 鸡球虫病的疫苗防治 |
| 1.2.3 鸡球虫病的中药防治 |
| 1.2.4 中药姜黄的抗寄生虫作用 |
| 1.3 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 虫体的样品 |
| 2.1.2 中药 |
| 2.1.3 化学药物 |
| 2.1.4 主要试剂 |
| 2.1.5 主要仪器 |
| 2.1.6 试验动物 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 柔嫩艾美耳球虫的活化 |
| 2.2.2 单味抗球虫中药的筛选 |
| 2.2.2.1 单味中药的筛选 |
| 2.2.2.2 单味中药提取液的制备 |
| 2.2.2.3 单味中药提取液体外卵囊孢子化抑制试验 |
| 2.2.3 抗球虫中药复方制剂的筛选 |
| 2.2.3.1 中药复方的筛选 |
| 2.2.3.2 中药复方药液的制备 |
| 2.2.3.3 中药复方制剂卵囊抑制试验 |
| 2.2.4 中药复方制剂的安全性试验 |
| 2.2.4.1 半数致死量测定 |
| 2.2.4.2 小鼠的安全性试验 |
| 2.2.5 中药复方防治鸡球虫病的临床试验 |
| 2.2.5.1 试验分组及处理 |
| 2.2.5.2 相对增重率 |
| 2.2.5.3 存活率 |
| 2.2.5.4 盲肠病变值 |
| 2.2.5.5 盲肠内卵囊值 |
| 2.2.5.6 抗球虫指数(ACI) |
| 2.2.6 中药复方防治鸡球虫病的田间扩大试验 |
| 2.2.6.1 试验分组及处理 |
| 2.2.6.2 增重和料重比 |
| 2.2.6.3 球虫感染情况 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 单味中药筛选结果 |
| 3.2 中药复方制剂组方筛选结果 |
| 3.3 中药复方的安全性试验结果 |
| 3.3.1 半数致死量测定结果 |
| 3.3.2 小鼠的安全性试验结果与分析 |
| 3.3.2.1 小鼠一般状态变化 |
| 3.3.2.2 各组小鼠体重变化 |
| 3.3.2.3 安全性试验各组小鼠肝脏、肾脏与体重的比值 |
| 3.4 中药复方防治鸡球虫病的临床试验结果与分析 |
| 3.4.1 相对增重率 |
| 3.4.2 存活率 |
| 3.4.3 盲肠病变计分 |
| 3.4.4 盲肠内卵囊值 |
| 3.4.5 ACI指数 |
| 3.5 中药复方防治球虫的田间扩大试验结果与分析 |
| 3.5.1 增重情况与料重比 |
| 3.5.2 球虫感染情况 |
| 4 全文讨论与结论 |
| 4.1 讨论 |
| 4.1.1 体外抗球虫卵囊试验 |
| 4.1.2 安全性评价 |
| 4.1.3 抗球虫临床试验 |
| 4.1.4 田间扩大试验 |
| 4.2 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（4）鸡球虫病流行病学、防治药物与疫苗研究进展（论文提纲范文）
| 1 鸡球虫病流行病学 |
| 1.1 鸡球虫的感染与繁殖 |
| 1.2 流行病学特征 |
| 1.2.1 鸡球虫病流行情况 |
| 1.2.2 鸡球虫病流行的影响因素 |
| 2 鸡球虫病防治药物开发 |
| 2.1 聚醚类离子载体抗生素 |
| 2.2 化学合成类药物 |
| 2.3 天然产物药物 |
| 2.4 鸡球虫抗药性研究 |
| 3 鸡球虫病疫苗研制 |
| 3.1 活卵囊疫苗 |
| 3.1.1 强毒活卵囊疫苗 |
| 3.1.2 弱毒活卵囊疫苗 |
| 3.2 重组疫苗 |
| 3.2.1 DNA疫苗 |
| 3.2.2 亚单位疫苗 |
| 3.2.3 活载体疫苗 |
| 4 展望 |
（5）癸氧喹酯纳米脂质体的制备及抗鸡球虫效果研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一篇 文献综述 |
| 1 鸡球虫病的概述 |
| 1.1 病原体 |
| 1.2 生活史及流行病学 |
| 1.3 寄生部位及致病性 |
| 1.4 致病性的影响因素 |
| 1.5 球虫病的危害 |
| 1.6 球虫病的耐药性 |
| 1.7 球虫病的防治 |
| 2 癸氧喹酯的概述 |
| 2.1 癸氧喹酯的介绍 |
| 2.2 癸氧喹酯的药理作用 |
| 2.3 癸氧喹酯的特点 |
| 2.4 癸氧喹酯临床应用研究进展 |
| 3 脂质体的概述 |
| 3.1 脂质体的定义 |
| 3.2 脂质体的分类 |
| 3.3 脂质体的制备方法 |
| 3.4 脂质体的冻干保护技术 |
| 3.5 脂质体的应用与发展 |
| 4 研究目的及意义 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第一章 癸氧喹酯纳米脂质体(DQNL)的制备 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 标准曲线的绘制 |
| 2.2 方法学验证 |
| 2.3 单因素试验结果 |
| 2.4 正交试验结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二章 DQNL的表征 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 DQNL包封率和载药量 |
| 2.2 DQNL的形貌观察 |
| 2.3 DQNL的粒径及Zeta电位的测定 |
| 2.4 DQNL的稳定性 |
| 3 讨论 |
| 第三章 DQNL对鸡球虫病的防治效果 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 临床症状变化 |
| 2.2 体重变化情况 |
| 2.3 粪便记分情况 |
| 2.4 剖检盲肠病变 |
| 2.5 抗球虫指数(ACI) |
| 3 讨论 |
| 第四章 DQNL对鸡球虫卵囊孢子生殖的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 3 讨论 |
| 第五章 DQNL的冻干保护剂筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 3. 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）鸡球虫病诊断及防治方法（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 临床特征及诊断方法 |
| 1.1 急性鸡球虫病 |
| 1.2 慢性鸡球虫病 |
| 1.3 诊断方法 |
| 2 防治方法 |
| 2.1 注意饲料及水源管理 |
| 2.2 引种防疫及鸡舍环境 |
| 2.3 益生菌防治方法及措施 |
| 2.4 中西医结合防治措施 |
| 3 结束语 |
（7）我国鸡球虫病流行病学研究进展（论文提纲范文）
| 1 文献筛选 |
| 2 鸡球虫分类和学名汉语译名变化 |
| 3 检测方法 |
| 4 我国各地区鸡球虫病流行情况 |
| 5 影响鸡球虫病流行情况的因素 |
| 5.1 饲养管理 |
| 5.2 环境及气候 |
| 5.3 其他疾病 |
| 5.4 鸡只日龄 |
| 5.5 品种 |
| 6 结论与防治展望 |
（8）鸡球虫病的综合防治措施（论文提纲范文）
| 1 鸡球虫病的症状以及病因 |
| 1.1 鸡球虫病的症状 |
| 1.2 鸡球虫病的病因 |
| 2 鸡球虫病的诊断 |
| 3 鸡球虫病的综合防治措施 |
| 3.1 切断球虫传播途径 |
| 3.2 科学的饲养 |
| 3.3 隔绝病鸡 |
| 3.4 强化药物预防, 防止中毒 |
| 3.5 采用中药进行防治 |
（9）益生菌调控柔嫩艾美耳球虫感染鸡效果研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号表 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 球虫病的概述 |
| 1.1.1 球虫病的分类 |
| 1.1.2 E. tenella球虫的生活史 |
| 1.1.3 流行特点 |
| 1.1.4 临床症状 |
| 1.1.5 病理变化 |
| 1.1.6 诊断与防治措施 |
| 1.2 化学药物防治 |
| 1.3 中草药防治 |
| 1.3.1 抗球虫中草药分类 |
| 1.3.2 中草药抗球虫病研究进展 |
| 1.4 生物制剂防治鸡球虫病的研究 |
| 1.5 益生菌防治鸡球虫病的研究进展 |
| 1.6 鸡肠道微生物 |
| 1.6.1 鸡肠道微生物的功能 |
| 1.6.2 影响鸡肠道微生物的因素 |
| 1.7 Illumina Mi Seq测序技术 |
| 1.7.1 Illumina MiSeq测序技术原理 |
| 1.7.2 Illumina MiSeq测序技术的应用 |
| 1.8 综合防控与管理 |
| 1.8.1 环境卫生消毒 |
| 1.8.2 加强饲养管理 |
| 1.8.3 免疫预防 |
| 1.8.4 合理用药 |
| 1.9 本实验的目的与意义 |
| 第2章E. tenella感染鸡盲肠微生物的测序 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试验材料 |
| 2.2.1 试验动物 |
| 2.2.2 E. tenella卵囊 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 盲肠内容物总DNA的提取 |
| 2.3.2 盲肠内容物微生物基因组DNA的测序 |
| 2.3.3 测序结果质量分析 |
| 2.4 E. tenella感染对鸡盲肠微生物菌群样本中多样性的影响 |
| 2.5 E. tenella感染对鸡盲肠微生物菌群组成的影响 |
| 2.6 E. tenella感染对鸡盲肠微生物菌群的聚类分析 |
| 2.7 E. tenella感染对鸡盲肠微生物菌群的LefSe分析 |
| 2.8 E. tenella感染对鸡盲肠微生物菌群进化树的分析 |
| 2.9 讨论 |
| 第3章 益生菌对E. tenella感染鸡的保护效果研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 试验用鸡 |
| 3.2.2 试验用球虫卵囊和益生菌 |
| 3.2.3 试验动物分组 |
| 3.2.4 球虫感染和处理方法 |
| 3.2.5 抗球虫效果研究 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 临床症状 |
| 3.3.2 益生菌对E. tenella感染鸡血便记分 |
| 3.3.3 益生菌对E. tenella感染鸡存活率的影响 |
| 3.3.4 益生菌对E. tenella感染鸡增重率的影响 |
| 3.3.5 益生菌抗E. tenella效果研究 |
| 3.4 结论 |
| 第4章 益生菌对E. tenella感染鸡盲肠结构及免疫细胞的 影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料及方法 |
| 4.2.1 试验用鸡 |
| 4.2.2 试验用卵囊和益生菌 |
| 4.2.3 试验分组 |
| 4.2.4 试验用试剂盒器材 |
| 4.3 试验方法 |
| 4.3.1 HE染色方法 |
| 4.3.2 石蜡切片PAS染色 |
| 4.3.3 石蜡切片AB-PAS染色 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 HE染色 |
| 4.4.2 石蜡切片PAS染色 |
| 4.4.3 石蜡切片AB-PAS染色 |
| 4.5 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
（10）岳阳地区鸡球虫病感染情况调查及抗球虫药物防治试验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 鸡球虫生活史 |
| 1.2 各种球虫造成的病变 |
| 1.3 鸡球虫病的诊断方法 |
| 1.4 影响鸡球虫感染的因素 |
| 1.5 世界及我国鸡球虫病流行现状 |
| 1.5.1 世界鸡球虫病流行现状 |
| 1.5.2 我国鸡球虫病流行现状 |
| 1.6 药物防治现状 |
| 1.6.1 常用的抗球虫药物 |
| 1.6.2 蒽环类抗生素 |
| 1.6.3 中药抗球虫药 |
| 1.6.4 岳阳地区常用的抗球虫药物 |
| 1.7 球虫疫苗研究现状 |
| 1.7.1 球虫疫苗研究进展 |
| 1.7.2 疫苗免疫存在的问题 |
| 1.8 研究的目的及意义 |
| 第二章 岳阳地区鸡球虫病感染情况调查 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 试验材料 |
| 2.3 检测方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 分析讨论 |
| 2.5.1 岳阳地区的气候利于球虫病流行 |
| 2.5.2 抓好饲养管理 |
| 2.5.3 保证足够长的空栏期 |
| 2.5.4 白羽肉鸡比蛋鸡感染率低 |
| 2.5.5 阳性率的季节性十分明显 |
| 第三章 抗球虫药对鸡球虫病治疗试验 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 试验材料 |
| 3.2.1 试验动物 |
| 3.2.2 试验药物 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 抗球虫药物的筛选 |
| 3.3.2 药物分组比较试验 |
| A. 试验方法 |
| B 试验效果的判定方法 |
| 3.4 试验结果 |
| 3.4.1 抗球虫药物的筛选结果 |
| 3.4.2 药物分组比较试验结果 |
| 3.5 分析讨论 |
| 3.5.1 抗球虫药物治疗效果明显 |
| 3.5.2 药物防治存在的主要问题是耐药虫株的产生 |
| 3.5.3 解决耐药性问题的办法 |
| 第四章 岳阳地区白羽肉鸡、蛋鸡鸡球虫防治现状及建议 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 岳阳地区白羽肉鸡、蛋鸡球虫病防控现状调查 |
| 4.3 岳阳地区历年白羽肉鸡、蛋鸡球虫病防控措施分析 |
| 4.4 防控建议 |
| 4.4.1 抓好季节性防控 |
| 4.4.2 加强规模养殖场的饲养管理 |
| 4.4.3 使用疫苗免疫可有效降低球虫感染率 |
| 4.4.4 合理选择药物防控 |
| 4.4.5 提高鸡体的抗病能力 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、鸡球虫病综合防治的研究进展（论文参考文献）
- [1]鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白3特异亲和肽抑制虫体入侵宿主细胞研究[D]. 陈文静. 东北农业大学, 2020(04)
- [2]鸡球虫病的综合防治[J]. 田永平. 农家参谋, 2020(16)
- [3]抗球虫中药的筛选及姜黄素复方制剂的研究[D]. 黄金华. 华南农业大学, 2019(02)
- [4]鸡球虫病流行病学、防治药物与疫苗研究进展[J]. 廖申权,戚南山,吕敏娜,吴彩艳,李娟,蔡海明,林栩慧,胡俊菁,于林增,张健騑,谢明权,孙铭飞. 广东农业科学, 2020(11)
- [5]癸氧喹酯纳米脂质体的制备及抗鸡球虫效果研究[D]. 代幸如. 扬州大学, 2020(01)
- [6]鸡球虫病诊断及防治方法[J]. 梁海华. 畜牧兽医科学(电子版), 2019(14)
- [7]我国鸡球虫病流行病学研究进展[J]. 李超,顾小龙,卢春霞,廖琴,刘贤勇,索勋. 寄生虫与医学昆虫学报, 2018(04)
- [8]鸡球虫病的综合防治措施[J]. 宋尚莲. 农技服务, 2017(24)
- [9]益生菌调控柔嫩艾美耳球虫感染鸡效果研究[D]. 曹建文. 河南科技大学, 2017(01)
- [10]岳阳地区鸡球虫病感染情况调查及抗球虫药物防治试验[D]. 郑艳琼. 湖南农业大学, 2015(08)